簡介：目的狂犬病RABIES是由狂犬病病毒RABIESVIRUS所致的以中樞神經(jīng)系統(tǒng)感染為特征的急性人畜共患烈性傳染病。是迄今為止人類病死率最高的急性傳染病，一旦發(fā)病病死率幾乎為100％。帶狂犬病病毒的動物是本病的傳染源，馴養(yǎng)動物中以犬為主，其次是貓、豬、牛和馬等。野生動物如蝙蝠、狐貍、浣熊、臭鼬等是發(fā)達國家和基本控制了犬狂犬病地區(qū)的主要傳染源，我國狂犬病的主要傳染源是病犬和帶毒犬。對貌似健康的犬只唾液進行狂犬病病毒抗原檢測是發(fā)現(xiàn)傳染源的快速、準確、有效的方法。目前世界衛(wèi)生組織推薦應(yīng)用的抗原檢測方法為快速狂犬病酶聯(lián)免疫診斷RAPIDRABIESENZYMEIMMUNODIAGNOSIS，RREID和直接熒光抗體檢測FLUESCENTANTIBODYASSAY，F(xiàn)AT。據(jù)世界衛(wèi)生組織調(diào)查，全球每年死于狂犬病的患者約有40，00050，000，其中99％以上發(fā)生在發(fā)展中國家，亞洲、非洲和拉丁美洲是狂犬病的主要疫源地，我國的狂犬病發(fā)病數(shù)僅次于印度，居世界第二位。我國人狂犬病流行從建國到現(xiàn)在經(jīng)歷了兩次起伏，1951年全國統(tǒng)一開展滅犬活動使狂犬病發(fā)病數(shù)大幅下降，但到70年代中期，疫情開始上升，1990年狂犬病發(fā)病數(shù)又開始下降，1998年后狂犬病發(fā)病人數(shù)開始持續(xù)回升，2004年與2005年報告發(fā)病數(shù)分別為2651例與2571例，2006年報告發(fā)病數(shù)3279例，2007年報告發(fā)病數(shù)3311例。四川省累計報告狂犬病例數(shù)也逐年上升，2006年為全國第6位191例，2007年為全國第三位335例，疫情形勢十分嚴峻。四川省衛(wèi)生廳對此高度重視，遂要求預(yù)防和控制狂犬病辦公室對我省不同地區(qū)家犬唾液進行狂犬病病毒抗原檢測以及時發(fā)現(xiàn)傳染源。由于世界衛(wèi)生組織推薦應(yīng)用的快速狂犬病酶聯(lián)免疫診斷方法應(yīng)用方便、簡單快速可用作大樣本的流行病學(xué)調(diào)查。目前國內(nèi)生產(chǎn)的試劑盒中應(yīng)用滅活的固定毒株作為陽性對照，其應(yīng)視為有潛在傳染性。本文應(yīng)用國產(chǎn)和進口的人用狂犬病疫苗作為陽性對照。比較疫苗陽性對照與試劑盒陽性對照陽性率間差異，為今后進行更安全的抗原檢測提供借鑒。方法對2006年2007年間采集的四川省1095只家犬唾液進行狂犬病病毒抗原檢測?？袢〔《究乖瓩z測采用快速狂犬病酶聯(lián)免疫診斷RAPIDRABIESENZYMEIMMUNODIAGNOSIS，RREID方法，選用武漢生物制品研究所抗原檢測試劑盒進行檢測，人用狂犬病疫苗作為抗原陽性對照與試劑盒中提供的陽性對照同時進行。操作方法嚴格按說明書操作規(guī)程進行，所有的試劑均在有效期內(nèi)使用，用樣本吸光率值與既定的判定值CUTOFFVALUE，COV進行比較來判定樣本中狂犬病病毒抗原陽性與否，資料分析采用計數(shù)資料的X2檢驗，當T005認為差異無統(tǒng)計學(xué)意義。試劑盒陽性對照與疫苗陽性對照兩種方法選用靈敏度SENSITIVITY，SEN、特異度SPECIFICITYSPE、陰性似然比NEGATIVELIKELIHOODRATIOLR、YOUDEN指數(shù)YOUDENSINDEX、診斷粗符合率CRUDEACCURACYCA及調(diào)整一致性ADJUSTEDAGREEMENTAA描述。結(jié)果1095只家犬唾液進行狂犬病病毒抗原檢測時，試劑盒陽性對照符合試劑盒說明顯色，5只家犬唾液抗原檢測呈陽性，人用狂犬病疫苗吸光率值大于判定點值方可作為陽性對照，人用狂犬病疫苗作陽性對照時同樣5只家犬唾液抗原檢測呈陽性，兩組陽性率間無差異經(jīng)FISHER確切概率法，四格表，P＞005人用狂犬病疫苗作為陽性對照靈敏度、特異度均為100％，陰性似然比為1，粗符合率為100％，調(diào)整一致性為100％。結(jié)論人用狂犬病疫苗作為狂犬病病毒抗原檢測的陽性對照的靈敏度、特異度高，與試劑盒陽性對照比較粗符合率和調(diào)整一致性沒有顯著性差異，疫苗陽性對照的陽性率與標準陽性對照的陽性率之間也無顯著性差異。提示人用狂犬病疫苗作為狂犬病病毒抗原檢測陽性對照是安全、有效的。

簡介：在現(xiàn)代電子技術(shù)的研究和應(yīng)用中，示波器是不可缺少的測量工具。隨著電子技術(shù)的發(fā)展，窄脈沖技術(shù)已經(jīng)進入皮秒時代，要對皮秒量級的脈沖波形進行測量，則需要帶寬達幾十吉赫茲的取樣示波器，然而寬帶取樣示波器的上升時間和帶寬校準面臨嚴峻的挑戰(zhàn)。因此，本文將圍繞用“NOSETONOSE”法校準寬帶取樣示波器上升時間和帶寬展開研究。本文首先詳細地分析了“NOSETONOSE”法校準寬帶取樣示波器技術(shù)的理論，并對整個校準過程進行了仿真。分析了“KICKOUT”脈沖產(chǎn)生的原理，并用PSPICE軟件對“KICKOUT”脈沖產(chǎn)生原理以及直流偏置的大小與“KICKOUT”脈沖的關(guān)系進行了仿真。其次對兩臺取樣示波器以及三臺取樣示波器對接進行了“NOSETONOSE”對接實驗，并用VISUALBASIC作為軟件開發(fā)平臺，編寫了“NOSETONOSE”法校準取樣示波器的自動控制和“KICKOUT”脈沖響應(yīng)波形的數(shù)據(jù)采集軟件。然后研究了“NOSETONOSE”法校準取樣示波器的數(shù)據(jù)處理方法，其中包括時基失真、時基抖動影響、時基漂移影響、如何進行相位解纏繞和反卷積濾波器的設(shè)計等。并用MATLAB語言編寫了“NOSETONOSE”方法校準取樣示波器的數(shù)據(jù)處理軟件，得到了取樣示波器的上升時間和幅頻響應(yīng)。并“NOSETONOSE”法校準帶寬為50GHZ和70GHZ的取樣示波器的上升時間和頻響的結(jié)果進行了分析，并與掃頻法校準的頻響結(jié)果進行了比較。同時對“NOSETONOSE”法校準帶寬為50GHZ取樣示波器的上升時間結(jié)果進行了不確定度評定。最后研究了“NOSETONOSE”方法校準取樣示波器過程中數(shù)據(jù)處理方法在計量和測試中的應(yīng)用，主要分析了如何測量微波高速開關(guān)的開關(guān)時間和如何準確測量25PS上升時間的方法。

簡介：第三軍醫(yī)大學(xué)研究生學(xué)位論文獨創(chuàng)性聲明秉承學(xué)校嚴謹?shù)男ｏL和科研作風，本人申明所呈交的論文是我本人在導(dǎo)師指導(dǎo)下進行的研究工作及取得的研究成果。據(jù)我所知，除了文中特別加以標注和致謝的地方外，論文中不包含其他人已經(jīng)發(fā)表或撰寫過的研究成果，也不包含為獲得我校或其他教育機構(gòu)的學(xué)位或證書而使用過的材料，與我同工作的同志對本研究所做的任何貢獻均已在論文中作了明確的說明并表示謝意。申請學(xué)位論文與資料若有不實之處，本人承擔一切相關(guān)責任。論文作者簽名立啻日期竺￡蘭墨幺第三軍醫(yī)大學(xué)研究生學(xué)位論文版權(quán)使用授權(quán)書本人完全了解第三軍醫(yī)大學(xué)有關(guān)保護知識產(chǎn)權(quán)的規(guī)定，即研究生在攻讀學(xué)位期間論文工作的知識產(chǎn)權(quán)單位屬第三軍醫(yī)大學(xué)。本人保證畢業(yè)離校后，發(fā)表論文或使用論文工作成果時署名單位為第三軍醫(yī)大學(xué)。學(xué)校有權(quán)保留并向國家有關(guān)部門或機構(gòu)送交論文的復(fù)印件和磁盤，允許論文被查閱和借閱。學(xué)?？梢怨紝W(xué)位論文的全部或部分內(nèi)容保密內(nèi)容除外，可以采用影印、縮印或其他手段保存論文。論文作者簽名指導(dǎo)教師簽名日期目錄英文縮寫一覽表1英文摘要3中文摘要6論文正文慢病毒介導(dǎo)BC047440基因沉默逆轉(zhuǎn)HEPG2／ADM細胞化療耐藥性機制的初步研究9前言99日U舌第一部分特異性BC047440SHRNA慢病毒對HEPG2／ADM細胞BC047440基因的沉默效應(yīng)及對HEPG2／ADM細胞化療耐藥性的影響12材料與方法12結(jié)果26J日；1CZU討念33小結(jié)34第二部分BC047440基因沉默逆轉(zhuǎn)HEPG2／ADM細胞化療耐藥性機制的探討35材料與方法35結(jié)果43討論48小結(jié)49全文結(jié)論50致謝5L參考文獻52文獻綜述肝癌的基因治療研究進展一56參考文獻63在讀碩士期間發(fā)表的論文67

簡介：R～～河北醫(yī)科大學(xué)學(xué)位論文使用授權(quán)及知識產(chǎn)權(quán)歸屬承諾本學(xué)位論文在導(dǎo)師或指導(dǎo)小組的指導(dǎo)下，由本人獨立完成。本學(xué)位論文研究所獲得的研究成果，其知識產(chǎn)權(quán)歸河北醫(yī)科大學(xué)所有。河北醫(yī)科大學(xué)有權(quán)對本學(xué)位論文進行交流、公開和使用。凡發(fā)表與學(xué)位論文主要內(nèi)容相關(guān)的論文，第一署名單位為河北醫(yī)科大學(xué)，試驗材料、原始數(shù)據(jù)、申報的專利等知識產(chǎn)權(quán)均歸河北醫(yī)科大學(xué)所有。否則，承擔相應(yīng)的法律責任。研究生簽名強嗨雌章和蛹二藪學(xué)哆領(lǐng)導(dǎo)積年月日河北醫(yī)科大學(xué)研究生學(xué)位論文獨創(chuàng)性聲明本論文是在導(dǎo)師指導(dǎo)下進行的研究工作及取得的研究成果，除了文中特別加以標注等內(nèi)容外，文中不包含其他人已發(fā)表或撰寫的研究成果，指導(dǎo)教師對此進行了審定。太論文由本人獨立撰寫，文責自負。研究生簽名弧脯哲導(dǎo)師簽章刪孜翔年月日目錄／必嬲必中文摘要1英文摘要3研究論文STATL和H2AX基因SHRNA慢病毒載體構(gòu)建及食管癌細胞體外轉(zhuǎn)染前言5一再LJ舌材料與方法7結(jié)果19附圖22附表39討論40結(jié)論44參考文獻45綜述信號轉(zhuǎn)導(dǎo)子與轉(zhuǎn)錄激活子ISTATL的研究進展50致謝65個人簡歷66

簡介：戊型肝炎病毒HEV是戊型肝炎的病原體，隨著HEV流行病學(xué)研究的深入，發(fā)現(xiàn)HEV的4個主要基因型存在著明顯的易感宿主差異基因1型HEV1和基因2型HEV2僅分離于人類，能導(dǎo)致大規(guī)模的戊肝爆發(fā)流行，實驗動物目前只成功感染非人靈長類，而基因3型HEV3和基因4型HEV4人畜共患，僅見于小規(guī)模流行和臨床散發(fā)。將HEV分為兩類包括HEV12的HHUMAN類和包括HEV34的ZZOONOSIS類。首先通過WESTERNBLOT、體外捕獲PCR、ELISA阻斷實驗及合成的多肽庫對實驗室制備的多株抗HEV單抗的識別表位進行系統(tǒng)的研究，結(jié)果發(fā)現(xiàn)12株線性單抗識別的位都位于F2AA408458之間，17株構(gòu)象型單抗識別表位都定位于F2AA459606之間，其中15株的識別表位位于天然病毒表面。現(xiàn)有研究結(jié)果表明HEV的主要中和表位區(qū)域集中于F2的AA459606之間，并且也是主要介導(dǎo)HEV與嗜性細胞吸附的區(qū)域。本研究通過比較這兩類HEVF2AA368606區(qū)段，發(fā)現(xiàn)存在4個類保守的差異位點，均位于HEV的主要中和表位區(qū)域，分別是SER483THR、VAL492MET、SER497THR和ALA599GLY。以能形成類病毒顆粒的HEV239F2AA368606為基礎(chǔ)，對這四個位點進行定點替換突變，并以這15株能夠捕獲HEV1和或HEV4的單克隆抗體比較各種突變體的免疫反應(yīng)性，結(jié)果表明僅AA497的差異造成了這兩類HEV中和表位構(gòu)象的部分差異，提示AA497及其相關(guān)的病毒表面結(jié)構(gòu)差異可能在H類和Z類HIEV宿主選擇中扮演重要角色。

簡介：目的1、分析國家傳染病疫情報告網(wǎng)中關(guān)于病毒性肝炎報告方面存在的主要問題。2、了解醫(yī)療機構(gòu)的病毒性肝炎診斷報告現(xiàn)狀以及影響因素。3、了解未分型肝炎的病原譜。對象與方法1、研究對象11疫情資料來源通過國家疾病監(jiān)測信息報告管理系統(tǒng)收集江蘇省泰興市、丹陽市和張家港市2005年1月L開～2009年12月31日報告的病毒性肝炎報告病例資料。所有報告病例的現(xiàn)住址為本市；報告病例均通過信息邏輯檢查和重復(fù)報告等審核。12張家港、丹陽、泰興三個縣級市的人民醫(yī)院、中醫(yī)院、婦幼保健院、五家鄉(xiāng)鎮(zhèn)衛(wèi)生院以及被調(diào)查醫(yī)院的臨床醫(yī)生。132009年1月1日12月31日在三個縣級市各級各類醫(yī)療機構(gòu)通過國家疾病監(jiān)測信息報告管理系統(tǒng)報告的部分病毒性肝炎住院病歷。2、調(diào)查方法21以問卷調(diào)查的形式在各級醫(yī)療機構(gòu)的感染管理科或防?？?、檢驗科、肝炎患者診治相關(guān)科室分別調(diào)查病毒性肝炎報告流程、肝炎檢測能力和醫(yī)務(wù)人員對肝炎報告知識的掌握情況反映醫(yī)療機構(gòu)對病毒性肝炎的管理現(xiàn)狀和醫(yī)務(wù)人員在診斷和報告病毒性肝炎過程中的存在問題。22對2009年1月1日12月31日期間泰興、丹陽、張家港傳染病網(wǎng)絡(luò)報告的病毒性肝炎部分住院病例進行流行病學(xué)調(diào)查內(nèi)容包括基本情況、流行病學(xué)史、臨床表現(xiàn)、實驗室檢測、醫(yī)院最終診斷等。3、實驗室檢測方法采集未分型肝炎病人的血標本及時分離血清2ML。用酶聯(lián)免疫吸附法ELISA檢測血清中下列指標抗HAVIGM、HBSAG、、HBEAG、抗HBC、抗HBCIGM、抗HCV、抗HEVIGM、EB病毒VCAIGM抗體、庚型肝炎病毒抗體HGCIGG、單純皰疹病毒IGM抗體HERPESSIMPLEXVIRUS2IGM、巨細胞病毒IGM抗體CYTOMEGALOVIMSIGM實驗步驟嚴格按照試劑說明書操作。4、分析方法采用EPIDATA302軟件建立數(shù)據(jù)庫雙份錄入數(shù)據(jù)并進行一致性校對運用SPSS130軟件進行統(tǒng)計分析；率的比較采用X2檢驗、率的變化趨勢采用趨勢X2檢驗；多因素分析用LOGISTIC回歸。結(jié)果1、2005年～2009年三個市共報告病毒性肝炎5755例其中臨床診斷病例2995例占520％、實驗室診斷2695例占468％疑似病例48例占083％病原攜帶17例占030％；一級醫(yī)院共報告病例1134例實驗室診斷病例占362％；二級醫(yī)院共報告病例4392例實驗室診斷病例占506％；不同等級醫(yī)院實驗室和臨床診斷存在顯著性差異X272998P2、五年間病毒性肝炎的報告發(fā)病率有顯著的統(tǒng)計學(xué)差異最高為2007年4371／10萬最低為2009年3505／10萬X23544P3、2005～2009年報告發(fā)病率按年齡組進行分析結(jié)果顯示5年間10歲以下年齡組報告發(fā)病率較低也較平穩(wěn)10～20～45～年齡組5年間報告發(fā)病率波動性較大各年齡組不同年間的報告發(fā)病率均有顯著的統(tǒng)計學(xué)差異P4、調(diào)查張家港丹陽泰興三個縣級市不同等級醫(yī)院傳染科醫(yī)生內(nèi)科醫(yī)生128人下發(fā)問卷128份回收問卷128份問卷合格率為100％。共收集三個縣級市2009年的病毒性肝炎病例332份三個縣級市乙肝診斷符合率為851％診斷存在統(tǒng)計學(xué)差異X2617P005；甲肝和戊肝的診斷符合率相對于乙肝較高；丙肝的診斷90％以上都屬于臨床診斷病例；同時未分型肝炎在所調(diào)查的病歷中也占有很大比重未分型肝炎的平均可分型率為421％。影響急慢性肝炎診斷的可能因素為醫(yī)院的等級以及醫(yī)生的職稱。5、23家鄉(xiāng)鎮(zhèn)級醫(yī)院的病毒性肝炎管理、檢測能力調(diào)查顯示開展乙肝兩對半、HBCIGM、HAVIGM、抗HCV、HEVIGM的定性檢測的醫(yī)療機構(gòu)分別占100％、217％、478％、739％、304％且在不同級醫(yī)院差異具有統(tǒng)計學(xué)意義X2448P6、對85例未分型肝炎的疾病譜研究發(fā)現(xiàn)乙肝14例戊肝2例脂肪肝2例巨細胞病毒感染5例人類皰疹病毒3例單純皰疹病毒感染2例未分型肝炎的重新分型率為329％。結(jié)論1、國家疫情報告網(wǎng)的20052009病毒性肝炎疫情分析發(fā)現(xiàn)一級醫(yī)院362％和二級醫(yī)院506％的實驗室報告病例較低但實際的機構(gòu)調(diào)查發(fā)現(xiàn)二級醫(yī)院的肝炎檢測頻率等均高于80％；五年間乙肝的10～20～45～年齡組報告發(fā)病率波動性較大各年齡組不同年間的報告發(fā)病率均有顯著的統(tǒng)計學(xué)差異同時急性乙肝和慢性乙肝的報告發(fā)病率之間的比例在同一年齡段人群中也少有一致因此疫情報告網(wǎng)上的數(shù)據(jù)很難反映其真實肝炎疫情。2、我們省現(xiàn)階段的病毒性肝炎診斷問題主要出在急慢性乙肝上乙肝急慢性診斷符合率為530％；甲肝、戊肝以及丙肝的報告和診斷正確率較乙肝高；影響病毒性肝炎診斷的可能因素為醫(yī)生的診斷知識掌握情況以及醫(yī)院的實驗室硬件設(shè)施和試劑的使用情況。3、未分型肝炎的診斷報告準確率較低從病例的調(diào)查再加上實驗室的復(fù)核診斷其重新分型率為329％20052009年的疫情報告網(wǎng)中報告的未分型肝炎占所有肝炎的比例最高達1111％因此應(yīng)加強對未分型肝炎的管理在報告未分型肝炎的時應(yīng)在排除其他型別肝炎的前提下再報告同時保留血清有待于上一級機構(gòu)進行復(fù)核。

簡介：當今“全球化時代”是多元文化相互交流、融合和碰撞的時代，現(xiàn)今中國社會生活的一個突出特征是多元化。護理作為維護人類健康服務(wù)的衛(wèi)生事業(yè)重要組成，為適應(yīng)社會全球化及多元化的背景，其發(fā)展趨勢是多元文化護理已成為時代的必然。護理教育是護理事業(yè)發(fā)展的最重要的基石，護理教育如何適應(yīng)多元文化護理的挑戰(zhàn)是近年來護理教育、臨床及衛(wèi)生行政部門極為關(guān)注且迫切需要解決的一個熱點問題。本研究首次以護理實習生為對象，在文獻綜述的基礎(chǔ)上，調(diào)查護生對多元文化護理的理論知識、語言溝通、宗教風俗、飲食文化的認知水平并對影響因素進行了分析，運用案例教學(xué)法、主題講授法及輔導(dǎo)自學(xué)法分別進行教學(xué)干預(yù)，并對干預(yù)前后的效果進行了比較，從管理者角度，對多元文化護理課程建設(shè)及教學(xué)方法提出了建議，本研究可為優(yōu)化護理教學(xué)質(zhì)量與效率提供科學(xué)依據(jù)。研究結(jié)果護生多元文化護理認知水平不高，表現(xiàn)在知識理論、語言溝通、宗教風俗及飲食文化四個維度上；總體及格率低，尤以概念不知、預(yù)防文化休克措施不明、“朝陽模式”未聽說、文化照顧保存、調(diào)整及再建不理解等為突出。影響護生多元文化護理認知的主要因素依次為沒有要求過、沒有培訓(xùn)過、不知道有此內(nèi)容、抽象難學(xué)、因語言交流困難不想學(xué)。三種方法干預(yù)認知得分結(jié)果縱向比較差異均具有顯著性，表明案例法、講授法及自學(xué)法均能提高護生多元文化護理認知水平；三種方法干預(yù)及模擬實景服務(wù)考核的橫向比較案例法提高程度最大，主題法次之，自學(xué)法提高程度最小；案例法與主題法及自學(xué)法間的差異均具有顯著性。在上述研究的基礎(chǔ)上，本研究提出如下建議（1）大力宣傳多元文化護理，明確其在構(gòu)建和諧護理中的作用；（2）增設(shè)多元文化護理課程是護理教育應(yīng)對社會多元化的必由之路；（3）增設(shè)多元文化護理課程應(yīng)明確教學(xué)目標及教學(xué)內(nèi)容；（4）采用案例講授法及兼顧其他教學(xué)法是進行多元文化護理教學(xué)的有效策略；（5）建立多元文化護理學(xué)習資料庫，幫助護生理解及應(yīng)用理論；（6）編撰中英法日四語種護理200句，滿足護生臨床應(yīng)用的需要。

簡介：徐州醫(yī)學(xué)院碩士學(xué)位論文KI67啟動子調(diào)控的荷載雙基因RNA干擾的條件增殖腺病毒靶向治療腎癌體外實驗研究姓名李靜申請學(xué)位級別碩士專業(yè)腫瘤學(xué)指導(dǎo)教師鄭駿年201203徐州醫(yī)學(xué)院碩士學(xué)位論文復(fù)制能力。2IMPCR檢測結(jié)果與免疫細胞化學(xué)結(jié)果顯示在腎癌KETR3、786O、ACHN細胞中，飚67ZD55DOUBLESIIⅢA組及鼬67ZD55Ⅺ67SIIⅢA組的Ⅺ67MIⅢA的表達和蛋白的表達均明顯降低，與其它組和對照組相比差異有統(tǒng)計學(xué)意義尸O05。3CCK8法、結(jié)晶紫染色法及A皿EXINVFITC／PI法顯示四種病毒對腎癌KETR3、786O、ACHN細胞均有殺傷作用、增殖抑制作用和誘導(dǎo)細胞凋亡的作用，且CCK_8法顯示病毒對細胞增殖的抑制作用與病毒的濃度及感染時間存在正相關(guān)性，其中飚67ZD55DOUBLESIRNA組對腎癌細胞的殺傷作用、增殖抑制作用和誘導(dǎo)細胞凋亡的作用最強，尸O05；飚67一ZD55組對腎癌細胞的殺傷作用、增殖抑制作用和誘導(dǎo)細胞凋亡的作用最弱，PO05，差異有統(tǒng)計學(xué)意義。四種腺病毒在KETR3細胞中作用最明顯，在786O細胞中作用其次，在ACHN細胞中作用較弱；四種病毒對HK2細胞均無明顯殺傷作用、增殖抑制作用作用和誘導(dǎo)細胞凋亡的作用。結(jié)論成功構(gòu)建的攜帶飚67啟動子、飚67SIRNA及HTERTSIRNA的條件增殖型腺病毒飚67ZD55、飚67ZD55飚67SIRNA、飚67ZD55HTERTSIIⅢA、Ⅺ67ZD55DOUBLESIIⅢA可在表達Ⅺ67的腎癌細胞內(nèi)大量擴增，除了發(fā)揮自身的溶瘤作用外，還可高效表達飚67SIRNA、HTEIMSIRNA，從而進一步增強了其抑制腎癌細胞增殖、促進腎癌細胞凋亡的作用；攜帶飚67啟動子上述腺病毒，表現(xiàn)出更強的靶向性和生物學(xué)活性。本研究為腫瘤的生物治療提供了一個新的思路，為本實驗的體內(nèi)實驗部分提供了可行性依據(jù)。4

簡介：H5N1禽流感在全球各地爆發(fā)以來，到2007年底，WHO已經(jīng)證實感染禽流感致死的人數(shù)超過200人，致死率高于50％。WHO的專家預(yù)測禽流感病毒在人體的逐步適應(yīng)很可能引起一場全球性的流感大爆發(fā)，推薦各國開發(fā)生產(chǎn)H5N1人用流感疫苗。目前H5N1人用流感疫苗主要是用雞胚為培養(yǎng)基質(zhì)開發(fā)生產(chǎn)，H5N1禽流感爆發(fā)時難于在短期內(nèi)提供足夠的雞胚生產(chǎn)疫苗，另外，雞胚中可能帶有的外源性因子也影響疫苗的質(zhì)量。VERO細胞是WHO推薦用于生產(chǎn)疫苗的細胞，能夠利用生物反應(yīng)器進行大規(guī)模培養(yǎng)。與雞胚來源的疫苗比較，在VERO細胞上得到的流感疫苗可以產(chǎn)生較強的體液免疫反應(yīng)和細胞免疫反應(yīng)。如果研究出一種用VERO細胞培養(yǎng)的H5N1禽流感疫苗毒株，將能較好的解決現(xiàn)在禽流感疫苗生產(chǎn)存在的一些問題，對防治禽流感有重大意義。該實驗選用H5N1禽流感疫苗株與本實驗室篩選的H3N2VERO適應(yīng)株同時接種雞胚，24小時后取尿囊液，加入H3N2VERO細胞適應(yīng)株的抗血清中和后在VERO細胞上傳代，獲得H5N1VERO細胞高產(chǎn)適應(yīng)株，利用空斑實驗純化毒株連續(xù)傳代20代后，應(yīng)用血凝抑制實驗與基因測序鑒定該毒株，并進一步測定該H5N1VERO細胞適應(yīng)株的致病性、免疫原性等生物學(xué)特性。獲得的H5N1VERO細胞適應(yīng)株可用于H5N1禽流感人用疫苗的開發(fā)。

簡介：本文通過4～5日齡白紋伊蚊胸腔接種和經(jīng)口感染登革病毒，并使之產(chǎn)卵，收集的蚊卵27℃保存7天后一部分檢測，一部分孵化，幼蟲飼養(yǎng)至成蚊，如此反復(fù)傳代。檢測每一代蚊卵內(nèi)登革病毒，以每一代感染登革病毒白紋伊蚊總RNA為模板進行RTPCR擴增502BP的片段，再設(shè)計登革Ⅰ、Ⅱ型病毒型特異性引物，然后以RTPCR產(chǎn)物為模板，分別用對應(yīng)型特異性引物作套式PCR，目的產(chǎn)物經(jīng)TA克隆后測序鑒定。2用C636細胞分離各子代成蚊體內(nèi)登革病毒，并用TCID50滴定其滴度。本文通過白紋伊蚊胸腔接種登革Ⅰ、Ⅱ型病毒和經(jīng)口感染登革Ⅰ型病毒，并使之傳代，運用RTPCR、套式PCR和C636細胞TCID50測定滴度，證實我國白紋伊蚊可以連續(xù)經(jīng)卵傳遞登革病毒，本實驗建立的檢測方法經(jīng)進一步完善在登革熱的流行病學(xué)調(diào)查及疾病監(jiān)測等方面將有一定的現(xiàn)實意義。

簡介：點擊查看更多益氣養(yǎng)陰、活血化瘀法對病毒性心肌疾病小鼠血清γ-IFN影響的研究.pdf精彩內(nèi)容。

簡介：點擊查看更多重組腺病毒Ad--RUNrf2對百草柘致大鼠肺損傷的保護作用.pdf精彩內(nèi)容。

簡介：流行性感冒簡稱流感是由流感病毒INFLUENZAVIRUS引起的急性呼吸道傳染病。流感病毒是世界上研究最早的病毒之一，是能在短時間內(nèi)引起世界大流行的病毒，而且可以在各個年齡段的人群中引起發(fā)病。在20世紀，人類發(fā)生了四次全球性的大流行。目前的流感疫苗均以雞胚為基質(zhì)生產(chǎn)，國內(nèi)外使用雞胚培養(yǎng)疫苗已經(jīng)有50年歷史。但雞胚流感疫苗不易規(guī)?；?，一旦發(fā)生流感大流行，難以在短期內(nèi)提供足量疫苗。VERO細胞是WHO積極推薦用于疫苗生產(chǎn)的細胞基質(zhì)。然而流感病毒要在VERO細胞上生長，必須添加胰酶才能保證有效繁殖，而培養(yǎng)液中的牛血清會使胰酶活性喪失，這就要求VERO細胞最好在低血清甚至無血清條件下進行培養(yǎng)。本研究首先以不同低血清濃度培養(yǎng)VERO細胞，并在此基礎(chǔ)上接種流感病毒株，優(yōu)化接種條件。然后對VERO細胞進行無血清培養(yǎng)，并用100ML攪拌瓶進行微載體培養(yǎng)并接種流感病毒H3N2型VERO細胞適應(yīng)株。一、低血清培養(yǎng)VERO細胞和流感病毒的研究本實驗采用SLM199為基礎(chǔ)培養(yǎng)基，添加不同濃度的血清培養(yǎng)VERO細胞，觀察細胞連續(xù)傳代的生長狀態(tài)，在10％血清濃度下培養(yǎng)的VERO細胞接種流感病毒血凝效價較高；固定血清濃度后優(yōu)化接種流感病毒條件，采用不同PH值、不同TPCK胰酶濃度和不同接種病毒量，測定其在不同病毒培養(yǎng)條件下的血凝效價，得到最佳培養(yǎng)流感病毒條件為PH值在72～75之間、TPCK胰酶含量為10ΜGML、MOI為10、病毒繁殖時間72H。二、無血清培養(yǎng)VERO細胞和流感病毒的研究采用逐步降血清法將VERO細胞適應(yīng)到以DMEMF12為基礎(chǔ)的無血清培養(yǎng)基中。首先靜止培養(yǎng)并接種流感病毒，收獲病毒量高于有血清培養(yǎng)的VERO細胞。然后采用動態(tài)培養(yǎng)VERO細胞并接種流感病毒，初步摸索適宜的培養(yǎng)條件。

簡介：目的不暇接對檢測乙型肝炎病毒HBVYMDD變異的3種方法進行靈敏度和特異性比較，并結(jié)合患者治療前HBVDNA載量、ALL水平及免疫標志物和YMDD變異后HBVDNA載量等臨床信息進行結(jié)果分析。方法分別以熒光定量PCRFQPCR、通用模板信號擴增UTPCR和聚合酶鏈反應(yīng)微板核酸雜交酶聯(lián)免疫吸附法PCRMNHEIJSA，對拉米夫定治療過程中血清出現(xiàn)HBVDNA由陰轉(zhuǎn)陽的52例慢性乙型肝炎患者，進行HBVYMDD變異檢測，比較3種方法的敏感性，并對3種方法檢測結(jié)果不一致的標本進行測序，比較它們的特異性。同時將治療前HBVDNA載量、ALT水平、免疫標志物及變異后HBVDNA載量與YMDD變異結(jié)果相結(jié)合進行綜合分析。結(jié)果FQPCR、UTPCR和PCRMNHELISA對YMDD變異的檢出率分別為5385％、4808％、7307％，經(jīng)兩兩比較，F(xiàn)QPCR和IJTPCR均與PCRRNNHEIJSA有明顯差異P01。將檢測結(jié)果不一致的17例標本進行測序，F(xiàn)QPCR、UTPCR、PCRMNHEIJSA與測序結(jié)果的符合率分別為941％、706％、294％，三者之間差異有顯著性P005。YVDD變異后的HBVDNA水平與YIDD變異后HBVDNA水平無顯著性差異P005。YMDD變異組治療前的ALT基礎(chǔ)水平高于YMDD野生組治療前水平P005。結(jié)論①3種方法比較，F(xiàn)QPCR檢測HBVYMDD變異具有較高的靈敏性和特異性，并能同時檢測出野生株和變異株的混合感染，與測序結(jié)果相符，是診斷IIBVYMDD變異較好的方法。UTPCR與PCRMNHELISA相比，特異性較好，且能具體檢測出YVDD、YIDD兩種變異，與測序結(jié)果符合率較高。以上結(jié)果提示，F(xiàn)QPCR和UTPCR法在檢測HBVYMDD變異方面優(yōu)于PCRMNHELISA法，值得臨床推廣應(yīng)用。②PCRMNHELJSA由于操作煩瑣和較高的假陽性率，建議在方法學(xué)得以改進后再考慮臨床應(yīng)用。⑨拉米夫定治療前ALT基礎(chǔ)水平高可能是YMDD變異的一個易發(fā)因素。密切監(jiān)控慢性乙肝患者的HBVDNA及ALT水平，有利于及時發(fā)現(xiàn)YMDD是否發(fā)生變異。⑥動態(tài)監(jiān)測HBVYMDD變異情況，有助于在拉米夫定治療過程中及時發(fā)現(xiàn)YMDD變異，及時調(diào)整治療方案。

簡介：重慶醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文BCRABL逆轉(zhuǎn)錄病毒介導(dǎo)的小鼠慢性粒細胞白血病樣模型的建立姓名張文萍申請學(xué)位級別碩士專業(yè)臨床檢驗診斷學(xué)指導(dǎo)教師馮文莉20080501重慶醫(yī)科大學(xué)碩士研究生學(xué)位論文臟組織學(xué)觀察，RTPCR和WESTERNBLOT分別檢測BCR／ABL在MRNA和蛋白水平的表達情況，鑒定小鼠成模狀況。移植89周后，外周血白細胞達2030X1010／L為對照鼠的5～8倍，外周血涂片幼稚細胞達到LO‰20％；骨髓粒系細胞顯著增高，易見幼稚細胞，肝脾也可見白血病細胞浸潤；移植45周后在受體鼠骨髓和脾臟檢出BCR／ABL融合基因，89周后在肝臟檢測出BCR／ABL融合基因，同時在骨髓和脾臟也檢測到BCR／ABL融合蛋白，建模成功的小鼠3～5月后相繼死亡。為了提高CML成模率，在實驗過程中還優(yōu)化和改進了方法用纖維連接蛋白作基質(zhì)進行病毒上清和骨髓細胞的共感染，使活細胞增加200／030％，且更易附著于瓶底，細胞狀態(tài)也更好；用2MGQOMG／109的5FU預(yù)處理雄性供體BALB／C小鼠，對小鼠骨髓原始細胞相對數(shù)量無明顯性影響；回輸給受體鼠感染了病毒的骨髓細胞數(shù)量分別為02X106個、04X106個、06X106個和1OXL06個時，小鼠CML成模率分別為60％、80％、90％和90％。2BCDABL逆轉(zhuǎn)錄病毒介導(dǎo)的小鼠CML_二次移植模型的建立收集成功建模的C№小鼠模型的骨髓細胞或脾細胞，經(jīng)尾靜脈輸入經(jīng)亞致死劑量R射線450CGY照射的同種雌性受體鼠中，通過脾集落形成實驗、骨髓形態(tài)學(xué)觀察、Y染色體及其特異性性別決定基因SRY檢測、BCR／ABL在MRNA和蛋白水平的表達情況，分析鑒定C池小鼠二次移植模型成模情況。結(jié)果顯示移植后12天，肉眼可見明顯的脾結(jié)節(jié)形成，連續(xù)切片可見成堆脾集落；移植45周后，在雌性受體小鼠骨髓中檢出相似Y染色體及Y染色體特異。I生SRY基因，骨髓和脾臟中檢L出BCR／ABL融合3