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簡介:上世紀發(fā)現(xiàn)抗菌抗生素以來,細菌性疾病已經(jīng)得到有效控制,此為尋找抗病毒抗生素提供了研究途徑。本研究就是在獲得一株可產(chǎn)生抗病毒活性成分的基礎上,進行了有效成分的提取分離純化,并進行了抗病毒譜、抗病毒機制的初步研究。目的分離、確定真菌發(fā)酵物中的抗病毒成分,初步探討抗病毒譜。方法1抗病毒活性物質(zhì)的分離用丙酮乙酸乙酯提取、旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)從發(fā)酵菌絲中獲取酯相,然后過硅膠柱,用石油醚和乙酸乙酯混合液洗脫洗脫梯度為15∶1、12∶1、10∶1、8∶1,分部收集洗脫液,旋轉(zhuǎn)蒸干后測定抗病毒活性,然后將活性組分通過HPLC制備分離單峰化合物和混合峰組分,然后將單峰物質(zhì)做紫外光譜、質(zhì)譜、核磁共振炭譜和氫譜分析。2抗病毒譜的初步探索用體外抗病毒試驗方法將硅膠柱石油醚乙酸乙酯10∶1洗脫組分簡稱柱洗脫組分與單峰化合物做多科病毒的體外抑毒試驗,病毒包括皰疹科病毒HCMV、HSV1、HSV2、副粘病毒科病毒RSV、腺病毒AD3、腸道病毒COXB16、彈狀病毒科病毒VSV、呼腸孤病毒科病毒輪狀病毒,RVAS11、正粘科病毒流感甲地方株、流感乙地方株15株病毒。3抗病毒機制的初步探討①探討柱洗脫組分和JN219是在病毒哪個復制周期外使病毒喪失感染能力用HCMV作為測活依據(jù)首先將藥物與病毒在37℃作用1H后、與病毒同時、病毒感染1H使病毒完成穿入過程后接種藥物到多孔板細胞上,根據(jù)細胞病變判斷藥物作用效果;②在初步確定藥物在細胞外即可使病毒喪失感染能力的基礎上,將紫外線滅活的病毒與藥物作用后,觀察滅活的病毒是否競爭了藥物的抗病毒活性。4純化合物JN219抗病毒活性穩(wěn)定試驗將JN219存放于4℃,30D后做抗病毒試驗,通過與存放前測定結(jié)果的比較,探討其抗病毒活性的穩(wěn)定性。結(jié)果1抗病毒活性物質(zhì)的分離真菌產(chǎn)物用丙酮乙酸乙酯分離成水相和酯相,活性測定發(fā)現(xiàn)兩相中均有顯著抗病毒活性,鑒于酯相分離簡便,故選擇酯相做進一步分離。首先用硅膠柱分離,發(fā)現(xiàn)在石油醚乙酸乙酯之101提取相簡稱柱洗脫組分具有高效抗病毒活性,用制備型高壓液相色譜進一步分離,獲得一單峰物質(zhì)命名為JN219,和數(shù)個混合峰組分分別編號1、2、3、4號。JN219紫外吸收高峰在220NM,質(zhì)譜分析其分子量為519道爾頓,活性跟蹤發(fā)現(xiàn)JN219和混合峰組分1號均有抗病毒活性。但核磁共振炭譜和氫譜化學移位雜亂,不能計算出炭氫數(shù)目,未能推測出分子結(jié)構(gòu)。2抗病毒譜的初步探討通過抑毒試驗,證明柱洗脫組分和JN219對HCMMV、VSV、RV具有良好的抗病毒活性,而對HSV1、HSV2、RSV、有弱抗病毒活性,對AD3、COXB16無顯著抗病毒效果。3抗病毒機制的初步探討柱洗脫組分和JN219與毒液細胞外作用1H后可使HCMV喪失感染能力,而先將JN219接種細胞然后用病毒攻擊則不能全部抑制HCMV病變的發(fā)生;并且紫外滅活的HCMV可競爭抑制柱洗脫組分和JN219的抗病毒活性,表明柱洗脫組分和JN219的抗病毒作用主要與阻斷HCMV的穿入、融合過程有關。4純化合物JN219抗病毒活性穩(wěn)定試驗JN21930D前半數(shù)有效濃度為04UGML儲存30D后半數(shù)有效濃度為397UGML,與儲存前比較,30D活性降低9925倍。結(jié)論1獲取真菌代謝產(chǎn)物抗病毒有效組分和純化合物JN219;2探索了分離提純JN219的方法,為大量提取奠定基礎;3初步探討了有效組分和JN219的抗病毒譜,表明有效組分和JN219具有較廣的抗病毒譜;4初步探討了抗病毒機制,并初步認為其抗病毒作用位點主要是阻斷病毒入侵宿主細胞;5炭譜氫譜分析化學移位雜亂,無法計算,未能推算分子結(jié)構(gòu)。6儲存后JN219抗病毒活性有下降,穩(wěn)定性待探討。
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簡介:南開大學碩士學位論文肌萎縮側(cè)索硬化患者認知和行為功能的臨床研究姓名喬凌亞申請學位級別碩士專業(yè)臨床醫(yī)學指導教師黃旭升201205中文摘要語言功能障礙的有9例,占2432%,記憶功能障礙的有5例,占1351%,視空間功能均正常。行為功能中,表現(xiàn)有淡漠的有9例,占2432%,表現(xiàn)有心情不悅抑郁的有6例,占1621%,表現(xiàn)有暴躁易激惹的有4例,占1081%,表現(xiàn)有夜間行為改變的有4例,占1081%,表現(xiàn)有食欲減退的有2例,占541%,表現(xiàn)為焦慮和固執(zhí)的各有1例,分別占270%。行多變量二值LOGISTIC回歸分析后發(fā)現(xiàn)受教育年限越低、ALSFRSR球部功能評分越低,出現(xiàn)認知和/或行為功能損害的可能性越大。結(jié)論大約一半的ALS患者會出現(xiàn)認知和/或行為功能損害。在認知功能損害中最常累及的領域是執(zhí)行功能,在行為異常中最常見的是淡漠。受教育程度低和球部功能損害嚴重是ALS患者出現(xiàn)認知和/或行為功能損害的危險因素。關鍵詞肌萎縮側(cè)索硬化,認知功能,行為功能,額顳葉癡呆
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簡介:本研究旨在了解太原地區(qū)孕婦HBV感染狀況及其新生兒宮內(nèi)感染狀況;了解太原地區(qū)孕婦及新生兒HBV基因型分布特征;探討HBV基因型與宮內(nèi)傳播的關系;了解孕婦及新生兒乙型肝炎病毒S基因“A”抗原決定簇變異情況;探討HBVS基因“A”抗原決定簇變異與HBV宮內(nèi)傳播的關系,結(jié)果表明,HBSAG陽性母親所生新生兒的HBV宮內(nèi)感染率為3198﹪;S基因“A”抗原決定簇突變在孕婦HBV感染者中存在比較普遍;在宮內(nèi)傳播過程中存在HBVS基因變異株,但母嬰HBV基因型基本保持一致;攜帶HBVS基因“A”抗原決定簇突變株的孕婦宮內(nèi)感染率略高于攜帶HBV野生株的孕婦,但兩組差別無統(tǒng)計學意義。
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簡介:目的1檢測武漢人群中慢性HCV感染患者基因分型分析基因分型分布及其臨床意義2擴增HCV1B型感染患者的HCVNS3區(qū)并進行測序分析HCVNS3功能區(qū)氨基酸變異和CD8T細胞表位內(nèi)外的變異3比較中國武漢人群和德國人群HLA頻率分布差異。檢測HCV1B型感染患者HLA分型并比較分析武漢HCV患者人群與武漢健康人群HLA頻率分布4分析HCV1B病毒株序列變異與宿主HLAI限制性CD8T細胞表位變異的相關性并針對NS3序列預測HLAI限制性CD8T細胞表位。方法1收集227例武漢慢性HCV感染患者血清和全血抽提血清中HCVRNA采用型特異性引物擴增法對HCVRNA進行基因分型分析武漢人群中HCV基因型別分布并分析HCV1B型的臨床意義。2采用巢式PCR對HCV1B基因型的HCVNS3區(qū)進行擴增并測序采用軟件將HCV1B型患者的HCVNS3區(qū)序列進行序列比分析HCVNS3功能區(qū)的變異和CD8T細胞表位內(nèi)外的變異。3HLA頻率分布網(wǎng)站中比較中國武漢人群和德國人群的HLA頻率分布。采用型特異性引物PCR法檢測中國武漢HCV1B型患者相應的HLAIA和B位點等位基因與武漢健康人群HLAI等位基因頻率相比較。4采用ALIGN、DNAMAN等軟件分析武漢HCV1B感染患者中不同HLAI限制性的CD8T細胞表位的變異頻率。采用網(wǎng)絡軟件預測HCV1B型NS3區(qū)序列的HLAI限制性CD8T細胞表位。結(jié)果1227份武漢慢性丙肝患者中HCV基因1B型126例636%其他HCV基因型72例364%表明在我國慢性丙肝患者HCV主要型別是1B型。比較39例HCV1B型和19例HCV其他基因型別患者肝功能發(fā)現(xiàn)HCV1B型感染者較其他HCV基因型感染者更容易出現(xiàn)肝功能異常提示HCV1B型較其他HCV基因型更易造成肝臟損傷。2對30條HCVNS3區(qū)全長序列進行分析發(fā)現(xiàn)決定HCV功能的氨基酸序列很難發(fā)生變異表明HCVNS3功能區(qū)的氨基酸序列相對保守。而且HCVNS3區(qū)CD8T細胞表位內(nèi)的氨基酸突變頻率明顯大于表位外P3比較中國武漢人群和德國人群的HLAA和HLAB基因型頻率分布發(fā)現(xiàn)中國武漢人群中HLAA021124和HLAB131546頻率較高。而且中國武漢和德國人群的HLA基因型頻率分布有明顯不同在武漢人群中分布頻率較高的HLAA11、HLAB46基因型頻率在德國人群中明顯較低而在德國人群中分布頻率較高的HLAA01、HLAA03、HLAB07、HLAB08基因型頻率在中國武漢人群中較低。分析本研究中135例HCV患者的HLAA基因型頻率和134例HCV患者的HLAB基因型頻率發(fā)現(xiàn)跟中國武漢健康人群的HLA基因型頻率基本一致。4從群體水平上分析HCV1B型患者HLAI限制性的HCVNS3區(qū)CD8T細胞表位突變發(fā)現(xiàn)兩個HLAA02陽性的HCVNS3區(qū)CD8T細胞表位NS311691177和NS314431451突變頻率明顯高于HLAA02陰性的HCVNS3區(qū)CD8T細胞表位突變頻率有統(tǒng)計學意義P結(jié)論1武漢人群中主要的HCV病毒株型別是HCV1B型并且HCV1B型較其他HCV基因型更易造成肝臟損傷。2決定HCV功能的NS3功能區(qū)氨基酸序列很難發(fā)生變異而HCVNS3區(qū)CD8T細胞表位內(nèi)的氨基酸突變頻率明顯大于CD8T細胞表位外的氨基酸突變頻率提示CD8T細胞的免疫壓力是導致HCVNS3變異的重要原因之一。3武漢和德國人群的HLA基因頻率有明顯不同在武漢人群中HLA頻率較高比如HLAA11、HLAB46在德國人群中明顯較低。武漢人群中頻率較高的HLAI限制性的HCVCD8T細胞表位突變頻率則相對較高。4兩個NS3區(qū)CD8T細胞表位NS311691177和NS314431451跟HLAA02相關表明HCVNS3區(qū)CD8T細胞表位突變受到宿主HLA等位基因限制。本研究的創(chuàng)新點1發(fā)現(xiàn)武漢和德國人群的HLA基因頻率有明顯不同武漢人群中頻率較高的HLAI限制性的HCVCD8T細胞表位突變頻率相對較高為找出最佳的HCV抗原序列并研制預防性和治療性疫苗提供了科學基礎。2國內(nèi)既往多項研究集中在HCV的異質(zhì)性和HCVCD8T細胞表位預測僅少數(shù)研究HLAI類等位基因與HCV變異的關系。本研究的意義探討HCV在CD8T細胞免疫壓力下演化適應過程測定HLAI限制性HCVNS3區(qū)CD8T細胞表位序列多態(tài)性明確不同人群中HCV在CD8T細胞免疫壓力下演變規(guī)律為尋找保護性CD8T細胞抗原表位和研制基于T細胞HCV疫苗提供科學基礎。
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簡介:登革病毒DEN是黃病毒科的重要成員分4個血清型均可引起登革熱、登革出血熱和登革休克綜合征廣泛流行于世界100多個國家和地區(qū)人群對任何一型登革病毒的初次感染均較敏感感染后獲得對同型病毒比較持久的免疫力對異型病毒的免疫力很短暫因而感染1個型別后還可能發(fā)生第二次或連續(xù)感染且易產(chǎn)生抗體依賴的感染增強效應ADEADE是引起登革出血熱和登革休克綜合征的主要原因也是疫苗研究中的一大障礙目前尚無有效的抗DEN制劑或先導物質(zhì)的報告亦無被批準的疫苗DENNS5蛋白是病毒基因組編碼的最大的蛋白分子量10410近年來的研究表明NS5蛋白具有RNA聚合酶RDRP功能即可以識別具有相對特異性的模板RNA并與之結(jié)合合成與模板互補的RNA鏈在病毒基因組復制過程中起關鍵作用鑒此NS5可以成為阻斷或抑制病毒復制的靶標而目前國內(nèi)外尚無以DENNS5作為抗病毒靶標的研究報告該研究旨在建立DENNS5蛋白表達體系獲得具有RDRP活性的重組表達產(chǎn)物以NS5蛋白為靶分子篩選相應的小分子結(jié)合肽期望從中獲得具有RDRP活性抑制作用的先導物
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簡介:目的地研究表明大多數(shù)罕見的淋巴上皮瘤樣胃癌和少部分常見的胃腺癌組織中均可檢測到EBV基因組,約7~10﹪的胃腺癌組織EBV陽性,但EBV在胃癌發(fā)生發(fā)展中的作用尚不明確。本研究檢測EBV相關胃癌EBVASSOCIATEDGASTRICCARCINOMAS,EBVAGC和與之匹配的EBV陰性胃癌組織中EBVATIVEGASTRICCARCINOMAS,EBVNGC增殖細胞核抗原PROLIFERATINGCELLNUCLEARANTIGEN,PCNA和CMYC基因的表達,同時檢測EBV相關基因的表達,探討它們在EBVAGC發(fā)生發(fā)展中的作用。方法選取13例EBVAGCS、45例與之相匹配的EBVNGCS和58例相應癌旁組織作為研究對象,采用免疫組化技術檢測PCNA和CMYC基因編碼產(chǎn)物的表達;RTPCR和SOUTHERN雜交技術檢測EBV相關基因核抗原EBNA1和EBNA2編碼基因,潛伏膜蛋白LMP1編碼基因,早期基因BARF1和BHRF1的表達。結(jié)論①EBVAGC組織中CMYC的表達與EBV感染無明顯相關性。②EBV感染可促進EBVAGC組織中PCNA的表達。③EBVAGC組織中LMP1和EBNA2表達陰性,與CMYC的表達和細胞增殖無相關性;早期基因BARF1和BHRF1可通過誘導CMYC蛋白表達以及抑制細胞凋亡等作用促進EBVAGC的發(fā)生發(fā)展。
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簡介:目的構(gòu)建可以用于缺血性腦血管病基因治療的腺相關病毒載體RAAVVEGF并研究其在體內(nèi)外的表達方法利用DNA重組技術以VEGF取代XXGFP中的GFP基因構(gòu)建AAV載體質(zhì)粒XXVEGF用XX80和XXGFPXXVEGF磷酸鈣共轉(zhuǎn)染RAAV包裝細胞系HEK293獲得重組病毒載體RAAVGFPRAAVVEGF再經(jīng)氯仿處理PEGNACL沉淀氯仿抽提三步法純化將病毒載體體外轉(zhuǎn)染293細胞、體內(nèi)行大腦皮層內(nèi)注射研究其表達情況結(jié)果通過雙質(zhì)粒共轉(zhuǎn)染293細胞氯仿處理PEGNACL沉淀氯仿抽提三步法純化可以得到高滴度的RAAVVEGF且可在體內(nèi)外表達結(jié)論成功地構(gòu)建了RAAVGFPRAAVVEGF載體初步研究了其在體內(nèi)外的表達情況為缺血性腦血管病的基因治療打下了基礎
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簡介:目的人冠狀病毒HCOV229E屬Ⅰ型冠狀病毒,是引起人類上呼吸道感染的病原,常引起人的普通感冒。其基因組RNA是一不分節(jié)段的正鏈單股RNA,長約27KB,已知編碼11種蛋白,其中包括4種結(jié)構(gòu)蛋白,分別是刺突蛋白S、包膜蛋白M、小包膜蛋白E和核衣殼蛋白N。S蛋白三聚體形成突起,伸出包膜表面,是病毒的主要表面抗原成分,具有受體結(jié)合和膜融合活性,在組織嗜性、細胞融合和毒力等方面起重要作用。S蛋白由S1和S2兩個亞基組成,其中S1形成成熟蛋白的球狀部分,包括受體結(jié)合區(qū)RBD和高變區(qū)HVR,而S2相對保守,包括一段內(nèi)在的融合肽和兩段疏水的七次重復區(qū)域HR1和HR2。這些區(qū)域?qū)τ诓《镜那秩?、細胞與細胞間的融合具有重要意義。本研究將靶蛋白鎖定為S1蛋白片段S1417547位氨基酸,克隆獲得冠狀病毒HCOV229ES1基因片段S1蛋白12491642位核苷酸,在原核表達系統(tǒng)大腸桿菌中獲得高效表達,對表達蛋白加以純化,初步研究其抗原活性。方法根據(jù)GENBANK提供的HCOV229E株S基因序列DQ243973人工合成冠狀病毒HCOV229ES1蛋白特異性基因片段,并克隆入PET21A原核表達載體,構(gòu)建克隆載體PET21AS1,通過PCR鑒定。重組載體轉(zhuǎn)化宿主菌BL21DE3,經(jīng)IPTG高效誘導表達得到重組蛋白,用金屬螯合親和層析純化,并通過SDSPAGE電泳及WESTERNBLOT對表達的重組蛋白進行鑒定。結(jié)果獲得了主要以包涵體形式存在的目的蛋白,WESTERNBLOT鑒定其為S1基因片段蛋白。結(jié)論成功構(gòu)建了HCOV229ES1蛋白的表達載體,并在BL21DE3中得到了高效表達,為下一步表達蛋白免疫原性及疫苗抗病毒保護性測定打下了基礎。
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簡介:目的建立HPEV的實驗室檢測方法,在住院腹瀉患兒和無癥狀兒童中開展HPEV的檢測工作,初步掌握HPEV在蘭州地區(qū)住院腹瀉患兒和無癥狀兒童中的流行特征;探討不同HPEV基因型與急性胃腸炎之間的關系,為進一步揭示和闡明嬰幼兒重癥腹瀉的病因構(gòu)成及HPEV的病原學特點奠定基礎。方法研究對象選自2006年7月至2007年6月間,蘭州大學第一醫(yī)院兒科因重癥腹瀉而住院的286名5歲以下兒童作為病例組;以及蘭州大學第一醫(yī)院兒童體檢中心同期進行例行體檢的98名無臨床癥狀的5歲以下兒童作為對照組,進行病例對照研究。蘭州大學第一醫(yī)院兒科負責收集每位研究對象的糞便標本并填寫相關標本采集表后低溫運送至中國CDC病毒所。糞便標本經(jīng)提取核酸后通過REALTIMERTPCR檢測HPEV。隨機選取一例HPEV陽性標本的REALTIMERFPCR產(chǎn)物經(jīng)體外轉(zhuǎn)錄成RNA標準品,用以對HPEV核酸濃度進行定量。使用基于VP3VP1基因連接區(qū)的兩對引物進行巢式RTPCR擴增,通過對擴增產(chǎn)物進行測序分型。使用MEGA31序列分析軟件對測序結(jié)果進行基因序列分析和繪制系統(tǒng)進化樹;采用SPSS130統(tǒng)計分析軟件對研究結(jié)果和臨床資料進行統(tǒng)計分析。結(jié)果在本研究中,共檢出HPEV陽性標本99例,其中病例組檢出84例,檢出率為294%84286;對照組檢出15例,檢出率為153%1598。在病例組84例HPEV陽性標本中,HPEV1共發(fā)現(xiàn)43例,占512%,其余分別為HPEV3,25例298%,HPEV4,4例48%,HPEV6,2例24%,HPEV8,1例12%,未分型標本,9例107%;在對照組15例HPEV陽性標本中,HPEV1共發(fā)現(xiàn)8例,占533%,其余分別為HPEV3,3例200%,HPEV4,3例200%,HPEV5,1例67%。HPEV2和HPEV7均未檢測到。HPEV1感染好發(fā)于秋冬季節(jié),HPEV3感染好發(fā)于秋季;與HPEV1和HPEV3感染患兒年齡相比,HPEV4感染患兒年齡較小。病例組中714%6084的HPEV感染患兒為混合感染,對照組中HPEV感染患兒混合感染率為133%215,二者差異有統(tǒng)計學意義P<005,輪狀病毒和人杯狀病毒為最常見的混合感染病毒。病毒載量最高的兩份HPEV陽性標本均為對照組兒童,病例組和對照組間HPEV1、3、4基因型病毒載量差異無統(tǒng)計學意義P>005。VP3VP1基因進化分析發(fā)現(xiàn),有一份毒株N049330無法被分型,它與相臨參考株的氨基酸同源性分別為8941%和6744%。對不同組間臨床癥狀比較發(fā)現(xiàn),差異無統(tǒng)計學意義P>005,HPEV1和HPEV3感染并不能加重腹瀉患兒的臨床癥狀。結(jié)論HPEV在蘭州地區(qū)腹瀉住院患兒和無癥狀兒童糞便標本中的檢出率均較高,且有多種基因型在流行。研究結(jié)果提示,HPEV1和HPEV3可能并不是5歲以下兒童胃腸炎的致病原。因此,推測HPEV1和HPEV3可能是胃腸道GASTROINTESTINAL,GI中的機會性致病原,當機體感染其他病毒時才被激活而致病。
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簡介:目的回顧性的總結(jié)抗病毒治療對慢性乙型重型肝炎近期預后的影響,以求改善和提高慢性乙型重癥肝炎的治療水平。方法采用回顧性分析,收集從2000年到2008年就診于新疆醫(yī)科大學第一附屬醫(yī)院感染科的84例慢性乙型重型肝炎患者的臨床資料,這些患者被分為抗病毒治療組(44例)和對照組(40例)。抗病毒組在內(nèi)科常規(guī)治療基礎上,加用核苷類藥物抗病毒藥物;對照組患者僅使用內(nèi)科常規(guī)支持治療。于治療后2周、4周觀察各項指標,并分析比較抗病毒治療組與對照組患者生化指標、病毒轉(zhuǎn)陰率、MELD評分、生存率,預期死亡率和實際死亡率等。結(jié)果1)治療后2周各項觀察指標示①治療2周后兩組的TBIL、PTA、INR均值差異均有顯著統(tǒng)計學意義(P<005),其他各指標沒有統(tǒng)計學差異(P>005)。②抗病毒治療組治療前后MELD評分差異有統(tǒng)計學意義(P<005),對照組治療前后沒有統(tǒng)計學差異(P>005)??共《局委熃M與對照組治療后比較,MELD評分差異有統(tǒng)計學意義(△P<005)。③抗病毒治療組MELD評分20~29分組的預期死亡率與實際死亡率,差異有統(tǒng)計學意義(P<005),其他評分段預期死亡率和實際死亡率差異沒有統(tǒng)計學意義;對照組MELD評分各段預期死亡率與實際死亡率之間均沒有統(tǒng)計學差異(P>005)。2)抗病毒治療4周各項觀察指標示①治療4周后治療組與對照組相比病毒轉(zhuǎn)陰率差異有顯著統(tǒng)計學意義,P<005②初始病毒載量≥105拷貝ML與<105拷貝ML組的患者相比生存率差異有統(tǒng)計學意義(P<005)③治療4周后抗病毒組與對照組生存率差異有顯著統(tǒng)計學意義(P<005)。④合并并發(fā)癥的患者中兩組生存率差異有統(tǒng)計學意義,P<005。結(jié)論抗病毒治療可以改善生化指標,提高病毒轉(zhuǎn)陰率,降低MELD評分,提高生存率,改善慢性乙型重型肝炎的預后。
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簡介:隨著我國國際地位的日益提高,對外漢語教學在世界各地的不斷發(fā)展,西方自然思潮的回歸和全球醫(yī)學理念的興起,海外中醫(yī)熱‖現(xiàn)象日趨升溫,對外中醫(yī)教育應運而生,并呈現(xiàn)出蓬勃發(fā)展的局面。然而,中醫(yī)學具有很深的文化底蘊,中醫(yī)語言醫(yī)哲交融文學色彩濃郁的特點在很大程度上制約了學習者對中醫(yī)精髓的理解,這不僅對本民族學習中醫(yī)者本身就是一道不易跨越的門檻,對那些來自于不同文化國度的外國留學生而言就更為艱難。簡單的漢語基礎水平使他們不易理解具有深厚文化內(nèi)涵的中醫(yī)學知識;單純的語言學習使他們難以分辨中醫(yī)語言中明確的特定詞匯表示不確定多變的概念等等特征造成的多種語言沖突現(xiàn)象。理解中醫(yī)用語只求字面對應,不管內(nèi)容實質(zhì),從而造成了貌合神離的現(xiàn)象十分常見。隨著認知語言學的興起和修辭格研究方向的轉(zhuǎn)變,在二語習得教學研究領域中出現(xiàn)了對通感現(xiàn)象研究呈多元化發(fā)展的趨勢通感現(xiàn)象已超出傳統(tǒng)的單純的語言修辭范疇,擴展到從認知視角生理基礎和個人社會體驗等多角度多層面的研究階段,提出認知通感是一個可以后天構(gòu)建的動態(tài)發(fā)展過程的觀點。認知通感對提高對外中醫(yī)教學效能具有良好的輔助作用,喚起學習者相同或相似的心理感受對理解和掌握學習內(nèi)容產(chǎn)生積極意義。目的本文研究旨在探索在對外中醫(yī)教學中引入認知通感意識的可行性。研究方法本文采用個案分析,課堂觀察法,問卷調(diào)查法,訪談法,部分相關文獻的列舉和對比分析進行研究。研究結(jié)果本文通過各項研究方法得出的結(jié)果證明外國受訪者對中醫(yī)基礎理論大部分持肯定的態(tài)度,在“自然環(huán)境和社會環(huán)境對人體會造成影響”“人體疾病也會對人體的心理健康產(chǎn)生反作用”和“預防疾病比治療疾病更重要”這三個方面達成100%的“通感”或“共識”,對這三個方面的認識與中醫(yī)理論所指的在心理表征意義為“同一所指”;證明了對外中醫(yī)交流中可在一定程度上出現(xiàn)“通感”現(xiàn)象;外國受訪者的漢語水平和個體因素制約了受訪者對中國文化的理解程度,也是形成制約“通感”達成的因素;部分相關的中西醫(yī)文獻對醫(yī)學科學的認識闡述和論著表明了中西醫(yī)學領域中存在著認知通感的可能性和可行性。這些結(jié)果與伍敬芳和趙湘波從心理學和認知語言學的視角切入解讀人類語言中的通感現(xiàn)象相吻合。結(jié)論將認知通感的理念和模式引入對外中醫(yī)教學,可以有效地提高外國人學習中醫(yī)的興趣對中醫(yī)藥的理解能力和達成共識的程度。利用通感意識,可以提高外國學習者對漢語內(nèi)涵的理解,尤其是對專用于中醫(yī)漢語表述的理解,是一個擴大對外漢語教學領域的新思路和教學新途徑。
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簡介:目的研究乙肝病毒HBVX基因及其產(chǎn)物HBX蛋白對肝細胞HL7702的凋亡和細胞周期的影響,并探討相關機制。方法用分子克隆方法構(gòu)建HBVX基因重組質(zhì)粒PCDNA3X,將其與空質(zhì)粒PCDNA3轉(zhuǎn)入HL7702細胞中,經(jīng)過G418的篩選構(gòu)建2株新的細胞株,分別命名為HL7702HBX和HL7702CON。RTPCR和WESTERNBLOT分析證實HL7702HBX細胞穩(wěn)定表達HBVX基因。運用DNALADDER,流式細胞分析和電鏡等方法檢測這兩株細胞的凋亡和細胞周期情況。并通過人類凋亡和細胞周期基因芯片分析這兩株細胞凋亡和細胞周期相關基因的差異表達,最后經(jīng)REALTIMEPCR和WESTERNBLOT進一步驗證。結(jié)果重組質(zhì)粒PCDNA3X轉(zhuǎn)染后經(jīng)G418篩選,RTPCR和WESTERNBLOT分析結(jié)果顯示HL7702HBX細胞能夠穩(wěn)定表達HBVX基因。DNALADDER,流式細胞分析和電鏡觀察顯示與對照組相比,HL7702HBX細胞出現(xiàn)凋亡,并有更多的細胞處于S期。CDNA芯片分析顯示一些DNA修復基因XRCC1,DDB1,ERC和細胞周期點調(diào)控相關基因CDC47,RADL7ETC參與了這一過程。CDNA芯片和REALTIMEPCR結(jié)果顯示HBX可以上調(diào)XRCCL,CDC47,RAD17MRNA的表達,而蛋白印跡實驗卻顯示HBX下調(diào)這三個基因的蛋白表達。結(jié)論通過抑制DNA修復和細胞周期點調(diào)控,HBX蛋白可以促進HL7702肝細胞的凋亡和S期的聚集,從而在乙肝病毒感染所致的炎癥,纖維化和癌癥過程起關鍵作用。HBX的這一作用可能是通過轉(zhuǎn)錄后調(diào)控機制實現(xiàn)的。【
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