簡介：目的探討腺病毒介導的HIL10對大鼠肝損傷的保護作用。在體外細胞模型實驗中探究腺病毒介導的人白細胞介素10HIL10是否能對損傷的培養(yǎng)肝細胞發(fā)揮抗炎保護作用在體內(nèi)實驗中探究攜帶HIL10基因的腺病毒的轉(zhuǎn)染效率以及對損傷的大鼠肝組織有保護作用。方法首先構(gòu)建攜帶HIL10的腺病毒載體。在體外實驗中先利用四氯化碳CCL4誘導肝細胞損傷模型并在實驗保護組細胞中先加入腺病毒載體培養(yǎng)24小時觀察細胞存活率。在體內(nèi)實驗中向CCL4誘導的肝損傷模型大鼠尾靜脈中注射包含腺病毒介導的HIL10的林格液觀察其與對照組大鼠血清谷丙轉(zhuǎn)氨酶ALT、谷草轉(zhuǎn)氨酶AST、肝纖維化四項指標血清透明質(zhì)酸、層粘連蛋白、III型前膠原、IV型膠原以及病理結(jié)果對比以增強綠色熒光蛋白EGFP作為熒光標記觀察腺病毒的轉(zhuǎn)染效率并使用ELISAWESTERNBLOT檢測HIL10在大鼠血漿內(nèi)的表達情況。結(jié)果在體外實驗中大鼠肝細胞加入CCL4至終濃度05MOLL后細胞出現(xiàn)明顯的損傷細胞存活率下降至59％至72之間與空白對照組相比差異具有顯著性P結(jié)論腺病毒介導的HIL10對肝損傷大鼠有較好的保護作用而且此技術(shù)很安全。所以腺病毒介導的HIL10對肝損傷以及肝纖維化的治療有廣闊的應用前景。

簡介：東北師范大學碩士學位論文認知負載與記憶痕衰退對成人空間工作記憶廣度的影響姓名王國明申請學位級別碩士專業(yè)基礎心理學指導教師張明20050501ABSTRACTTHESPANOFWORKINGMEMORYWASONEOFTHEFUNDAMENTALPROBLEMSINWORKINGMEMORYITWASDEFINEDTHENUMBERSORUNITSOFPREVIOUSLEARNINGITEMSTHATPARTICIPANTSCOULDCORRECTIVELYREMINDINASPECIFICTASKORAPARADIGMOFTHESPANOFWORKINGMEMORYTHESPANOFWORKINGMEMORYWASLIMITEDSOTHATTHERESOURCESHARINGTHEORYANDTHETRAILOFMEMORYTHEORYCOMPETITIVELYTRIEDTOEXPLAINTHEREASONOFLIMITATIONOFCOGNITIVERESOURCESUCHTWOTHEORIESEXISTEDGREATDIVERGENCEONTHEQUESTIONTHERESEARCHWASTOEXPLORETHEEFFECTOFCOGNITIVELOADANDTHETRAILOFMEMORYONTHESPANOFWORKINGMEMORYBYUSINGTHEPARADIGMOFSPATIALWORKINGMEMORYWITHSETTINGDIFFERENTCOGNITIVELOADANDLONGORSHORTPROCESSINGTIMEEXPERIMENT1USINGTHEPARADIGMOFINDEPENDENTSPATIALWORKINGMEMORYTASKWASTOCOMPARETHEEFFECTSOFDIFFERENTCOGNITIVELOADONTHESPANOFSPATIALWORKINGMEMORYOFPARTICIPANTSWHENTHEPROCESSINGTIMEISCONSTANTTHERESULTSSUGGESTEDCOGNITIVELOADSIGNIFICANTLYAFFECTSTHESPANOFSPATIALWORKINGMEMORYOFPARTICIPANTSEXPERIMEM2INVESTIGATESTHEEFFECTSOFHI曲ORLOWCOGNITIVELOADONTHESPANOFSPATIALWORKINGMEMORYWHENTHEPROCESSINGTIMEISCONSTANTBYTAKINGADVANTAGINGOFTHEPARADIGMOFDEPENDENTSPATIALWORKINGMEMORYITSHOWEDTHECOGNITIVELOADCOULDINFLUENCETHEPERFORMANCEOFPARTICIPANTSONTHETASKOFTHESPANOFSPATIALWORKINGMEMORYEXPERIMENT3FOUNDTHATCOGNITIVELOADINFLUENCEDPERFORMANCEOFPARTICIPANTSINTHETASKOFSPATIALWORKINGMEMORYRATHERTHANTHEPROCESSINGTIMEWHENWEMANIPULATEDSIMULTANEOUSLYTHECOGNITIVELOADANDPROCESSINGTIMESUCHTHESERESULTSFURTHEREXPANDINGTHEEXPLANATIONOFTIMEBASEDRESOURCESHARINGMODELKEYWORDSTHESPANOFSPATIALWORKINGMEMORY；COGNITIVELOAD；SHARINGRESOURCETHEORY；THETRAILOFMEMORYTRACE；PROCESSINGTIME1L

簡介：乙型病毒性肝炎仍是一個世界性的公共衛(wèi)生問題，全球范圍內(nèi)乙型肝炎病毒HEPATITISBVIRUS，HBV的慢性感染人群高達35億以上。HBV相關的慢加急性肝衰竭ACUTEONCHRONICLIVERFAILURE，ACLF是慢性肝炎患者死亡的重要原因，如果不進行肝移植，其死亡率高達6080％，每年大約有22600的患者死于肝衰竭。長期以來宿主免疫一直被認為是乙型肝炎加劇的主要原因，但是近年的研究結(jié)果表明病毒因素在ACLF的發(fā)病中同樣起重要作用。HBV是嗜肝病毒家族的一員，其DNA全長約為3200個核苷酸，呈現(xiàn)部分雙鏈環(huán)狀。HBV基因組包含4個相互重疊的開放性讀碼框，分別編碼HBV表面抗原、核心抗原、聚合酶和多功能的非結(jié)構(gòu)性蛋白X。由于HBV的復制過程包含前基因組RNA的逆轉(zhuǎn)錄，其逆轉(zhuǎn)錄酶缺乏校正功能，故HBV的突變率顯著高于其它的DNA病毒。HBV基因組的突變率可隨著病毒的復制不斷增加，其中一些突變可能與慢性肝炎的急性加劇相關，可作為ACLF的預警的生物標志物和抗病毒治療的靶標。近來有研究表明基本核心啟動子區(qū)的A1762TG1764A突變與ACLF發(fā)病相關，A1846T、G1896A和C1913AG位點的突變在ACLF患者中發(fā)生率顯著高于慢性肝炎患者。目前關于HBV突變和ACLF發(fā)病的關系主要集中于基本核心啟動子區(qū)和前核心區(qū)，對HBV基因其它部位的研究尚少。ACLF是否有另外的一些HBV突變位點與ACLF發(fā)病有關尚不清楚，為此本研究用HBV全基因組測序篩選出與ACLF發(fā)病相關的HBV突變，并發(fā)現(xiàn)一些新的突變位點，經(jīng)過擴大樣本的驗證，以期為ACLF的預警提供依據(jù)。方法1HBV全基因測序篩選與ACLF發(fā)病可能相關的HBV突變位點11ILLUMINA高通量測序。樣本來自兩組12例ACLF和12例慢性輕度乙型肝炎MILDCHRONICHEPATITISB，CHBM年齡配對、性別和基因型分布無顯著差異患者，所有樣本HBV的DNA水平均＞100，000COPIESML。首先從200ΜL的血清中提取病毒DNA，分3段重疊擴增HBV全基因組。PCR產(chǎn)物在GENOMEANALYZERⅡ平臺上進行高通量測序，然后處理高通量測序數(shù)據(jù)。12檢測上述樣本的肝功能指標ALT，AST，TBIL，PTA，HBV血清標記物和HBVDNA滴度。13分析GENBANK數(shù)據(jù)庫的HBV基因突變情況在GENBANK數(shù)據(jù)庫中搜索中國地區(qū)報道的ACLF和CHBM相關的HBV全基因序列共258條ACLF患者序列143條，CHBM患者序列115條，分析其突變。2HBV突變與ACLF發(fā)病的關系的驗證21樣本。來自80例無癥狀攜帶者ASYMPTOMATICCARRIERS，、152例CHBM、102例慢性重度乙型肝炎患者SEVERECHRONICHEPATITISB，CHBS和104例ACLF患者，共438例。22從200ΜL血清中提取HBVDNA，半巢式PCR擴增HBV基因組目標序列，PCR產(chǎn)物行常規(guī)SANGER測序。23檢測上述樣本肝功能指標，HBV血清標記物和HBVDNA滴度。結(jié)果1ILLUMINA高通量測序篩選結(jié)果11作為質(zhì)量控制的質(zhì)粒測序結(jié)果顯示所測得的讀長36BPDNA序列的不同位置發(fā)生測序錯誤的頻率不一致，在20位堿基之后其堿基替換率呈現(xiàn)上升趨勢，當位于序列的第3036個堿基時，測序的錯誤率顯著上升。為了降低錯配率，我們截取每個短片段序列前面的20BP進行質(zhì)粒全長的拼接。質(zhì)粒序列的總體誤差率為049％，其中每一百個核苷酸中錯配堿基讀取頻率＞4％的核苷酸平均為24個，將4％作為區(qū)分真實突變和技術(shù)誤差的界線。12T216C、G285A、A1846T、G1896A、C1913AG、G2095A、A2159G、A2189C和G2345A為ACLF患者常見的突變位點，在12例ACLF患者中發(fā)生上述突變的病例數(shù)分別為10例、9例、10例、10例、8例、5例、10例、11例和7例。13T216C、G285A、A1846T、G1896A、C1913AG、G2095A、A2159G、A2189C和G2345A這9個位點的突變頻率在ACLF患者中顯著高于慢性輕度肝炎患者（P＜005或P＜001）。14基本核心啟動子區(qū)BASALCEPROMOTER，BCPA1762TG1764A突變在12例ACLF和12例CHBM患者中的發(fā)生率均為6例。其突變頻率在ACLF患者和慢性輕度肝炎患者未見顯著差異。15從GENBANK數(shù)據(jù)庫下載258條HBV全基因序列，分析上述突變的分布情況發(fā)現(xiàn)T216C、G285A、A1846T、G1896A、C1913AG、A2159G、A2189C和G1764A在ACLF中的發(fā)生率均顯著高于CHBM，G2095A、G2345A和A1762T在ACLF組和CHBM組間未見差異。分別對HBVB基因型和C基因型患者的突變進行分析發(fā)現(xiàn)，在B基因型的患者中，T216C、G285A、A1846T、G1896A和C1913AG這5個位點突變在ACLF組中顯著高于CHBM組C基因型患者中，A1846T、C1913AG、A2159G、A2189C和G1764A這5個突變在ACLF組中顯著高于CHBM組。A1762TG1764A雙聯(lián)突變在B基因型和C基因型的ACLF患者中均未見顯著升高。2HBV點突變與ACLF發(fā)病的關系的驗證結(jié)果21ACLF組的B基因型比率顯著高于其余三組慢性乙型肝炎患者。22T216C、G285A、A1846TG、G1896A、C1913AG、A2159GC和A2189TC這7個突變的發(fā)生率在ACLF組顯著高于、CHBM和CHBS組（P＜005或P＜001）。23T216C、G285A、A1846TG、G1896A、C1913AG這5個位點在HBV基因型B的感染者中顯著高于HBV基因型C感染者。24對、CHBM、CHBS和ACLF患者的B基因型和C基因型毒株的突變進行比較發(fā)現(xiàn)以S為對照組，B基因型毒株感染者中，T216C、G285A、G1896A、C1913AG突變在CHBS和ACLF組中均顯著升高C基因型毒株感染者中，A1846TG、G1896A、C1913AG、A2159GC突變在ACLF組和CHBS組中顯著升高。以CHBM為對照組，HBVB基因型毒株感染者中，T216C、G285A、G1896A、C1913AG和A2159GC在ACLF患者中顯著升高C基因型毒株感染者中，G285A、A1846TG、G1896A和C1913AG在ACLF患者中顯著升高。當以CHBS為對照時，基因型B毒株感染者中，A2159GC和A2189TC在ACLF組中顯著升高。25與非ACLF組比較，B基因型毒株的T216C、G285A、A1846TG、G1896A、C1913AG、A2159GC和A2189TC與ACLF密切相關，而C基因型毒株的G285A、A1846TG、G1896A、C1913AG和A2159GC與ACLF密切相關。26多因素分析顯示T216C、G1896A、C1913AG和A2159GC是ACLF發(fā)病的獨立危險因素。27T216C、G1896A、C1913AG和A2159GC的兩個或以上的聯(lián)合突變與ACLF發(fā)生密切相關。28“含C216的聯(lián)合突變”，“含AG1913的聯(lián)合突變”，“含GC2159的聯(lián)合突變”對ACLF診斷具有較高的特異性。結(jié)論1B基因型病毒感染的慢性乙型肝炎患者更容易發(fā)展為ACLF。2T216C、G1896A、C1913AG和A2159GC突變?yōu)锳CLF發(fā)生的獨立危險因素。其中T216C和A2159GC系本研究新發(fā)現(xiàn)的ACLF發(fā)病的獨立危險因素T216C位點已申請國際專利，國際申請?zhí)朠CTCN2012071108，提示了HBVS區(qū)和核心區(qū)突變在ACLF發(fā)病過程中可能起著重要作用。3HBV聯(lián)合突變的分析發(fā)現(xiàn)，聯(lián)合突變在ACLF發(fā)病中發(fā)揮更為重要的作用?！昂珻216的聯(lián)合突變”，“含AG1913的聯(lián)合突變”，“含GC2159的聯(lián)合突變”對ACLF的診斷特異性較高。4上述病毒突變可作為預測乙型肝炎加劇的分子標志物，為阻止ACLF發(fā)病和改善HBV感染者的預后提供依據(jù)。

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簡介：溫州醫(yī)科大學碩士學位論文論文題目△∑壘曼主I鯉漁痘皇純疸痊痘垂絲角腿煎壓亟塹生魚笪笪趨廢硒塞答辯委員會主席揚基主塾拯塑J匕省△民醫(yī)瞳2答辯委員會成員盒陋勇教援濕劃醫(yī)型太堂附屆8艮視光醫(yī)醫(yī)2王銦塾拯遏劃直蟲墜醫(yī)院2論文答辯日期2O15．5．28溫州醫(yī)科大學碩士學位論文AVASTIN,FI療單純皰疹病毒性角膜炎所致新生血管的I臨床研究中文摘要1．目的評估局部應用AVASTIN⑧治療單純皰疹病毒性角膜炎所致新生血管的療效及安全性。2．方法本研究采用前瞻性自身前后對照的研究方法。選取2013年6月至2014年2月在我院確診為單純皰疹病毒性角膜炎的患者共15例17眼。所有患者因單純皰疹病毒性角膜炎反復發(fā)作引起角膜新生血管，入組前均在我院門診經(jīng)過規(guī)范化抗病毒藥物阿昔洛韋分散片一次200MG一天5次及皮質(zhì)類固醇激素藥物妥布霉素地塞米松滴眼液一次1滴，一天4次；每周遞減1次，為期1個月治療后患者眼紅、眼痛癥狀緩解，但新生血管消退效果不佳。在此治療基礎上，停用激素類藥物，給予所有入組患者AVASTINO．5MG配在2ML含0．01％苯扎溴銨的生理鹽水溶液中滴患眼，一天3次，用藥期間均繼續(xù)常規(guī)阿昔洛韋分散片口服治療。分別于用藥后第1周、第2周、第3周，一直到第7周每周進行隨訪。評估AVASTIN治療新生血管的療效。所有患者依次進行如下檢查視力、裂隙燈顯微鏡檢查、裂隙燈數(shù)字角膜攝影，觀察新生血管各項指標的變化，如新生血管面積、血管侵入面積等。視力及新生血管評估指標用SPSSL9．0統(tǒng)計軟件進行統(tǒng)計分析。3．結(jié)果本研究共納入15例17眼，其中男10只眼，女7只眼，年齡16’67歲，平均45．30±11．50歲，所有患者均嚴格遵醫(yī)囑用藥并堅持門診隨訪。所有患者的主、客觀結(jié)果如下1所有患者用藥1周與用藥前、用藥5周與用藥4周相比，新生血管面積明顯減少PO．007，其他時間段組間差異無統(tǒng)計學意義。2所有患者用藥1周與用藥前相比，眼部新生血管侵入面積變化均較前有所減少PO．007，其他時間段組間差異無統(tǒng)計學意義。3所有患者用藥1周與用藥前相比，眼部新生血管數(shù)目有所減少，且差異有統(tǒng)計學意義P0．007，其他時間段組間差異無統(tǒng)計學意義。4患者用藥1周與用藥前、用藥2周與用藥1周相比，視力有所提高，且差異有統(tǒng)計學意義P0．007，其他時間段組間差異無統(tǒng)計學意義。5本研究過程中15例17眼均接受7周的AVASTIN2

簡介：點擊查看更多病毒性腦（膜）炎196例臨床及腦脊液特點回顧性分析.pdf精彩內(nèi)容。

簡介：目的探討恩替卡韋治療慢性乙型肝炎（CHB）患者發(fā)生病毒學突破的相關危險因素。方法收集263例CHB感染者使用恩替卡韋（ETV）治療患者的病歷資料，做回顧性調(diào)查并分析患者的生化、病毒學、用藥史、依從性等指標是否影響病毒學突破的發(fā)生，并分析相關指標與ETV病毒學突破的關聯(lián)。結(jié)果263例患者，經(jīng)過24個月的隨訪觀察，24例發(fā)生病毒學突破，突破發(fā)生率為913％。其中HBEAG陽性和陰性病毒學突破率分別為1118、538，差異無統(tǒng)計學意義（P0118）；既往有LAM使用史和無LAM使用史病毒學突破發(fā)生率分別為1495，513，差異有統(tǒng)計學意義（P0007）；ETV10MG、05MG病毒學突破率分別為741，932，差異無統(tǒng)計學意義（P1000）；有肝硬化和無肝硬化患者病毒學突破發(fā)生率分別為1563，704，差異有統(tǒng)計學意義（P0038）；依從性差和依從性好的患者病毒學突破發(fā)生率分別為2941，611，差異有統(tǒng)計學意義（P0000）；ETV初治時ALT低中高三個水平組病毒學突破發(fā)生率分別為1024，648，1429，三個水平組之間的差異均無統(tǒng)計學意義（P＞005）；ETV初治時HBVDNA低中高水平組病毒學突破發(fā)生率分別為506、556、1842，低中水平組的差異無統(tǒng)計學意義（P＞005），低、高水平組和中、高水平組的差異有統(tǒng)計學意義（P＜005）。治療6個月時HBVDNA轉(zhuǎn)陰率越高，病毒學突破發(fā)生率越低。既往有拉米夫定（LAM）使用史的患者治療12個月時病毒學突破發(fā)生率為280，治療24個月時累積發(fā)生率為1495，發(fā)生病毒學突破的平均時間為（1988±476）個月；而初治時使用ETV在治療12個月時病毒學突破發(fā)生率為064，治療至24個月時發(fā)生率為513。結(jié)論既往有LAM使用史、ETV初治時HBVDNA＞107COPIESML、有肝硬化、依從性差是恩替卡韋發(fā)生病毒學突破的危險因素；治療6個月時HBVDNA轉(zhuǎn)陰率越高，病毒學突破發(fā)生率越低；既往有LAM使用史的患者較ETV初治的患者病毒學突破發(fā)生率高。

簡介：曲阜師范大學碩士學位論文樣例與問題聯(lián)結(jié)方式影響遷移和認知負荷的實驗研究姓名孫志軍申請學位級別碩士專業(yè)發(fā)展與教育心理學指導教師宋廣文20070401ABSTRACTWORKEDEXAMPLELEARNING，WHICHCATCHESTHEEYESOFLOTSOFRESEARCHERS，ISAHOTTOPICOFTRANSFERLEARNINGCOGNITIVELOADTHEORYINSISTSANICETEACHINGDESIGNSHOULDNOTONTYREDUCETHEEXTRANEOUSCOGNITIVETOADBUTENHANCETHEGERMANECOGNITIVELOADFORMERSTUDIESINSISTSTHATEXAMPLESCANREDUCETHEEXTRANEOUSCOGNITIVELOADENHANCETHEGERMANECOGNITIVELOADEXISTSTUDIESINSISTSTHATLEARNINGISIMPROVEDWHENWORKEDEXAMPLESAREPAIREDWITHPRACTICEPROBLEMSCOMPAREDTOWHENONLYWORKEDEXAMPLESAREPROVIDEDTOTHELEARNERSBUTTHEREAREFEWSTUDIESOFCONFORMITYDESIGNABOUTEXAMPLESANDPROBLEMSBASEDONTHEFORMERSTUDIES，THISSTUDYPUTFORWARDTWOKINDSOFCONNECTIONMODESABOUTEXAMPLESANDPROBLEMSEXAMPLEPROBLEMPAIRANDPROBLEMEXAMPLEPAIR，WHICHCOMPAREDTOPUREWORKEDEXAMPLESLEARNINGANDPUREPROBLEMSSOLVINGPRACTICEPRIORKNOWLEDGEOFSTUDENTSISANIMPORTANTVARIABLEINCOGNITIVELOADRESEARCHWHICHCALLINFLUENCETHEEFFECTSOFSPECIFICSTRATEGIESWHICHINCREASEGERMANECOGNITIVELOAD2X4X2MIXDESIGNWASAPPLIEDINTHISSLALDYWHICHEXAMINEDHOWPRIORKNOWLEDGEOFSTUDENTS，CONNECTIONMODESABOUTEXAMPLESANDPROBLEMSANDTRANSFERTYPESINFLUENCEDTHETRANSFERLEARNINGANDFURTHEROBSERVEDTHEINFLUENCETOCOGNITIVELOADOFPRIORKNOWLEDGEANDCONNECTIONMODESABOUTEXAMPLESANDPROBLEMSTHERESULTSHOWEDTHAT1PRIORKNOWLEDGEOFSTUDENTSHADSIGNIFICANTINFLUENCESONTRANSFERSCORESANDCOGNITIVELOADTRANSFERSCORESOFHIGLLPRIORKNOWLEDGESTUDENTSWEREBETTERTHANTHOSEOFLOWPRIORKNOWLEDGEGERMANECOGNITIVELOADOFSTUDENTSWITHHIGHPRIORKNOWLEDGEWASENHANCEDHIGHERTHANTHOSEOFLOWPRIORKNOWLEDGE2CONNECTIONMODESABOUTEXAMPLESANDPROBLERNSINFLUENCEDTRANSFERSCORESANDCOGNITIVELOADSIGNIFICANTLYTHESTUDENTSWITHLOWPRIORKNOWLEDGEIMPROVEDNEARTRANSFERUNDERTHEDESIGNOFPROBLEMEXAMPLEPA址ANDIMPROVEDFARTRANSFERUNDEREXAMPLEPROBLEMPAIRTHESTUDENTSWITHLOWPDORKNOWLEDGENOTONLYREDUCEDTHEEXLRANEOUSCOGNITIVELOADBUTALSOENHANCEDTHEGERMANE2

簡介：目的過敏性紫癜又稱亨舒綜合征HENOCHSCHONLEINPURPURA，HSP，是一種以廣泛的白細胞破裂性小血管炎為主要病理改變的系統(tǒng)性血管炎。好發(fā)于學齡期兒童，男孩多于女孩。病因尚未完全明確，微生物感染、食物、藥物過敏是其常見誘因。病變可累及皮膚、關節(jié)、胃腸道、腎臟等臟器。常以皮膚紫癜為首發(fā)癥狀，少數(shù)患兒以腹痛、關節(jié)疼痛、腎臟損害為首發(fā)表現(xiàn)。紫癜性腎炎（HENOCHSCHONLEINPURPURANEPHRITIS，HSPN）是由過敏性紫癜引起的腎臟損傷，多出現(xiàn)在病程的6個月以內(nèi)，發(fā)病率為25％～80％，是兒童時期最常見的繼發(fā)性腎小球疾病，也是影響過敏性紫癜預后的決定性因素。正常兒童尿中通常含有的尿蛋白≤100MGM224H，尿沉渣紅細胞＜3個HP。當HSP引起的免疫反應導致腎臟受損后，腎小球基底膜GBM濾過孔徑增大、基底膜斷裂，濾過膜上帶負電荷的糖蛋白減少導致帶負電荷的血漿蛋白濾過量明顯增加，電荷屏障損傷，腎臟通透性增強，此時在臨床上形成蛋白尿24小時尿蛋白定量＞150MGD和（或）腎性血尿（尿沉渣紅細胞計數(shù)＞3個HP）。尿微量白蛋白（尿MALB）檢測可以更加靈敏的反應早期腎損傷的發(fā)生1。MALB＞20MGL為異常。小兒常見的呼吸道病毒包括腺病毒、呼吸道合胞病毒、流感病毒（甲型、乙型）和副流感病毒。可以通過間接免疫熒光法檢測HSP患兒血清病毒IGM抗體，以了解病毒感染狀況。有研究表明，呼吸道病毒感染可能與過敏性紫癜發(fā)病有關2。但目前尚缺乏有關呼吸道病毒感染與過敏性紫癜患兒腎損傷的相關性報道。本文旨在通過檢測HSP患兒呼吸道病毒IGM抗體、尿蛋白定量、尿沉渣的動態(tài)變化，以探討呼吸道病感染與過敏性紫癜腎損傷的相關性。方法1、研究對象選取2011年12月至2012年12月河北醫(yī)科大學第二醫(yī)院兒內(nèi)科收入院的92例初治過敏性紫癜患兒為研究對象。過敏性紫癜的診斷依據(jù)典型的皮疹、伴或不伴胃腸道、關節(jié)、腎臟癥狀及血小板計數(shù)做出臨床診斷。紫癜性腎炎診斷依據(jù)在過敏性紫癜病程6個月內(nèi)，出現(xiàn)血尿和（或）蛋白尿。2、研究方法將入選的患兒治療前進行4種常見呼吸道病毒檢測，根據(jù)檢測結(jié)果，病毒陽性者列為觀察組（A組），病毒陰性者列為對照組（B組）。病毒陽性組給予利巴韋林注射液10～15MGKGD抗病毒治療7天。3個月后復查呼吸道病毒IGM抗體。檢測結(jié)果仍未陰轉(zhuǎn)者為病毒持續(xù)陽性組A1組，陰轉(zhuǎn)者為病毒陰轉(zhuǎn)組（A2組）。共隨訪6個月，觀察比較各組腎損傷的發(fā)生率，并進行統(tǒng)計學分析。3、檢測方法31、呼吸道病毒檢測抽取2ML靜脈血送檢我院兒科門診血清呼吸道常見病原體IGM抗體檢測，采用間接免疫熒光法。檢測方法在載玻片的孔里分別加入稀釋的血清和質(zhì)控品，37℃溫育90分鐘PBS洗兩次，蒸餾水洗一次加入熒光素結(jié)合物，37℃溫育30分鐘PBS洗兩次，蒸餾水洗一次，自然晾干加入一小滴封閉介質(zhì)，蓋上蓋玻片在熒光顯微鏡400倍視野下觀察。32、尿蛋白定量留取24小時尿液，計算24小時尿液總量，充分混勻后取3ML送檢，采用鄰苯三酚紅比色測定法進行定量檢測，收集檢測數(shù)據(jù)進行分析。33、尿沉渣檢測取2小時內(nèi)晨起中段尿10ML送檢腎內(nèi)科尿沉渣實驗室。檢測方法取尿液10ML以1500RMIN離心5MIN去上清液，留沉渣02ML輕搖離心管，混勻有形成分用1010鏡頭，觀察其中有形成分的全貌及管型用1040鏡頭觀察細胞成分和數(shù)量，連續(xù)觀察10個不同視野，取所見的最低和最高值，記錄結(jié)果。34、尿微量白蛋白檢測留取晨起清潔中段尿2ML送檢兒科實驗室。檢測方法采用免疫熒光干式定量法對樣本進行檢測。試劑盒及IGHROMAREADER免疫熒光分析儀由韓國BODITECHMEDINC公司生產(chǎn)。4、統(tǒng)計學分析應用SPSSSTATISTICS130數(shù)據(jù)統(tǒng)計軟件，對資料數(shù)據(jù)進行描述和統(tǒng)計分析。選取P＜005為有統(tǒng)計學意義。結(jié)果1、一般資料觀察組43人，其中男24人，女19人，男女比例126∶1，平均年齡833±286歲。對照組49人，其中男27人，女22人，男女比例123∶1，平均年齡853±277歲。兩組性別、年齡比較均無統(tǒng)計學差異。2、隨訪6個月，觀察組（A組）腎損傷的發(fā)生率為535％，對照組B組腎損傷的發(fā)生率為285％，差異有統(tǒng)計學意義。說明呼吸道病毒感染可以增加HSP患兒腎損傷的發(fā)生率。其中，病毒持續(xù)陽性組A1組腎損傷發(fā)生率為647％1117，病毒陰轉(zhuǎn)組A2組腎損傷發(fā)生率為46％1226，對照組（B組）腎損傷的發(fā)生率為285％，三組比較差異有統(tǒng)計學意義。說明病毒持續(xù)存在對腎臟損傷影響意義更大。3、不同病毒感染率依次為流感病毒2609％2492、副流感病毒1196％1192、腺病毒543％592、呼吸道合胞病毒326％392。4、不同病毒（腺病毒、流感病毒、呼吸道合胞病毒、副流感病毒）腎損傷發(fā)生率分別為40％、5417％、0％、7273％，差異無統(tǒng)計學意義。認為呼吸道病毒感染可以導致腎損傷的發(fā)生，但與病毒的種類關系不大。結(jié)論1、過敏性紫癜合并呼吸道病毒感染時腎損傷的幾率增大，其可能的機制為感染的病毒在體內(nèi)作為抗原引起抗體的產(chǎn)生，抗原、抗體結(jié)合形成免疫復合物，沉積于腎臟造成了腎損傷。但HSP腎損傷與合并的病毒種類關系不大。尚不能證明某一種單一病毒是HSP腎損傷的發(fā)病因素。2、HSP患兒中流感病毒感染最高，認為流感病毒在過敏性紫癜發(fā)病機制中占主要地位，具體機制有待進一步研究。3、病毒感染持續(xù)存在時作為抗原反復刺激機體，增加腎損傷的發(fā)生率。

簡介：目的構(gòu)建丙型肝炎病毒HCV核心蛋白真核表達載體PIRESCE，轉(zhuǎn)染至體外培養(yǎng)的人源性肝細胞QSG7701，研究丙型肝炎病毒核心蛋白對QSG7701細胞凋亡及自噬的影響。初步探討丙型肝炎病毒核心蛋白在丙型肝炎和肝細胞癌中的致病機制。方法體外培養(yǎng)人源性肝細胞QSG7701，將細胞分為QSG7701組（未轉(zhuǎn)染組）、QSG7701PCDNA31組（轉(zhuǎn)染空質(zhì)粒組）及QSG7701CE組（轉(zhuǎn)染PIRESCE組）。然后通過脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染法將HCV核心蛋白真核表達載體PIRESCE轉(zhuǎn)染至QSG7701細胞中。ANNEXINVFITCPI雙染倒置熒光顯微鏡下觀察凋亡細胞的細胞核變化流式細胞儀檢測細胞凋亡率WESTERNBLOTTING印記法檢測HCV核心蛋白及轉(zhuǎn)錄因子NFΚB的表達采用小分子干擾RNASIRNA技術(shù)抑制肝細胞NFΚB表達，流式細胞儀再次檢測三組細胞凋亡率。WESTERNBLOTTING印記法檢測自噬體標記分子LC3及自噬相關基因BECLIN1的表達。結(jié)果ANNEXINVFITCPI雙染法倒置熒光顯微鏡下觀察凋亡細胞的細胞核變化，可見PI將凋亡細胞的細胞核染成紅色，細胞核大小不等，出現(xiàn)核固縮、核碎裂、核溶解等細胞凋亡的特異性表現(xiàn)流式細胞儀檢測顯示QSG7701CE組細胞凋亡率為（134±007）％，低于QSG7701組（未轉(zhuǎn)染組）（235±011）％和QSG7701PCDNA31組（轉(zhuǎn)染空質(zhì)粒組）（258±013）％，三組比較差異有統(tǒng)計學意義（P＜005）WESTERNBLOTTING印記法檢測轉(zhuǎn)錄因子NFΚB在QSG7701CE組表達上調(diào)將QSG7701細胞分為正常對照組（不作處理）、陰性對照組（轉(zhuǎn)染陰性SIRNA組）及SIRNA組（轉(zhuǎn)染NFΚBSIRNA組），小分子干擾RNASIRNA技術(shù)抑制肝細胞NFΚB表達，流式細胞儀再次觀察凋亡率，SIRNA組凋亡率為（238±017）％，高于正常對照組120±011％和陰性對照組（129±009）％，三組比較差異有統(tǒng)計學意義（P＜005）。WESTERNBLOTTING法檢測自噬泡標記分子LC3及自噬相關基因BECLIN1在QSG7701CE組表達上調(diào)。結(jié)論HCV核心蛋白能夠抑制人源性肝細胞QSG7701的細胞凋亡，其主要機制可能是轉(zhuǎn)錄因子NFΚB表達上調(diào)。HCV核心蛋白可提高QSG7701的細胞自噬水平，其主要機制可能是自噬相關基因BECLIN1表達上調(diào)。

簡介：點擊查看更多江西地區(qū)兒童感染的乙型肝炎病毒全基因組序列分析.pdf精彩內(nèi)容。

簡介：肝臟疾病嚴重威脅人類健康。據(jù)統(tǒng)計，全世界每年約有140萬人死于由肝炎、感染、腫瘤等慢性肝臟疾病引起的晚期終末肝功能衰竭。原位肝移植（THOTOPICLIVERTRANSPLANTATION，OLT）是目前治療肝衰竭最主要的治療手段，但由于肝源短缺，費用高昂等問題，使得肝移植惠及的人群非常有限，難以廣泛開展。近年來，生物人工肝BIOARTIFICIALLIVER，BAL和肝細胞移植LIVERCELLTRANSPLANTATION，LCT開始作為肝移植的輔助或替代療法而日益受到人們的關注。然而，細胞來源不足一直是兩者發(fā)展及應用的一大瓶頸。20世紀90年代以來興起的干細胞技術(shù)日漸成熟，成為生命科學領域的研究熱點。以干細胞移植為主的細胞療法作為一種新興的手段，為解決種子細胞來源和肝臟疾病的治療提供了新的思路和方法。骨髓間充質(zhì)干細胞（BONEMARROWMESENCHYMALSTEMCELLS，BMSCS）是一類具有自我復制功能和分化潛能的早期未分化細胞，屬于成體干細胞的一種，具有很強的可塑性，可以跨越胚層橫向分化為肝樣細胞等多種組織細胞，且具備取材方便、體外培養(yǎng)技術(shù)成熟以及自體移植等優(yōu)點，因此其有望成為組織工程和細胞治療的理想種子細胞。如何高效誘導BMSCS向肝樣細胞分化，是干細胞移植等肝病治療的關鍵，但由于其具體的分化機制尚未明確，這一關鍵問題尚未得到滿意解決，臨床應用也遠未達到預期效果。因此探究BMSCS向肝樣細胞分化的分子機制意義重大。BMSCS向肝樣細胞分化的事實已經(jīng)得到了多數(shù)實驗的證實，但其具體的分化機制尚存在爭議。目前主要觀點有①橫向分化學說BMSCS本身具有多向分化潛能，可以分化為肝樣細胞②細胞融合學說BMSCS首先與宿主肝細胞融合，然后進一步分化為肝樣細胞。由于許多干細胞分化實驗并未發(fā)現(xiàn)細胞融合的現(xiàn)象，故目前多數(shù)學者更支持橫向分化學說，然而BMSCS橫向分化的具體調(diào)控機制仍不清楚。由于微環(huán)境是干細胞賴以生存的“土壤”，因此眾多研究人員將其作為干細胞定向分化機制研究的切入點。細胞局部的微環(huán)境包括細胞周圍多種細胞因子、激素、基質(zhì)細胞和細胞外基質(zhì)等。細胞因子的作用尤為重要，在不同的細胞因子作用下BMSCS可分化為不同的細胞類型。微環(huán)境中的各種因子的表現(xiàn)類型、濃度和作用次序是影響B(tài)MSCS分化的重要因素。不同時期、不同部位、不同狀態(tài)下微環(huán)境的組成及結(jié)構(gòu)不同，對干細胞的影響也不同。正常情況下，微環(huán)境保護干細胞不被清除，維持干細胞的未分化狀態(tài)，同時抑制其過度增殖當機體受到損害時，微環(huán)境發(fā)生相應改變，通過一定的信號通路傳遞，有選擇地激活或抑制相關轉(zhuǎn)錄因子，啟動相關基因，從而出現(xiàn)特定的轉(zhuǎn)錄和翻譯水平調(diào)控，進而使干細胞向特定成體細胞分化?；谝陨嫌^點，我們提出肝衰竭的肝內(nèi)微環(huán)境中存在著某些有別于生理狀態(tài)下的生物因子，這些因子能夠刺激BMSCS向肝樣細胞分化。為了探尋究竟是何種生物因子在發(fā)揮誘導作用，我們課題組在前期利用蛋白組學技術(shù)對比肝衰竭大鼠和健康大鼠肝臟，篩選出27個有顯著差異的蛋白位點，通過生物信息學分析我們發(fā)現(xiàn)其中的酪蛋白激酶I?。ㄉ险{(diào)）、T盒轉(zhuǎn)錄因子（上調(diào)）和酪氨酸蛋白激酶（下調(diào)）與細胞的增殖、分化密切相關。酪蛋白激酶IΑCASEINKINASEIΑ，CKIΑ是一類具有獨特理化特性的絲氨酸蘇氨酸蛋白激酶，廣泛存在于真核生物中，且分布廣泛，主要分布在細胞質(zhì)、細胞膜等部位。具有組成型活力（即被分離或者原核表達的CKIΑ都具有活性）。CKIΑ可磷酸化底物蛋白質(zhì)中已被磷酸化的位點，也可作為其它蛋白激酶的底物被磷酸化，參與蛋白質(zhì)的級聯(lián)磷酸化過程，在信號轉(zhuǎn)導中發(fā)揮作用，進而參與包括基因表達、細胞增殖及分化等多種細胞調(diào)節(jié)過程。研究已經(jīng)證實CKIΑ主要參與WNT和HH信號轉(zhuǎn)導通路，而該兩條信號通路與干細胞的分化和增殖密切相關。肝衰竭微環(huán)境中CKIΑ明顯上調(diào)，這些CKIΑ來自于何處是受損的肝實質(zhì)細胞表達的，還是微環(huán)境的變化刺激干細胞分泌的尚不清楚。而上調(diào)的CKIΑ能促進BMSC肝樣分化是外源性的CKIΑ直接刺激BMSCS，還是微環(huán)境中某些因素誘導BMSCS自身過表達CKIΑ，繼而這些內(nèi)源性表達的CKIΑ促進BMSCS分化呢這些問題也是我們課題組一直欲研究探討的。因此，本研究中的第一部分擬采用分子生物學技術(shù)，利用原核表達體系從大腸桿菌中表達出重組CKIΑ，并擬用NI柱親和層析使其得以高效純化，為下一步我們進行CKIΑ與BMSCS共培養(yǎng)實驗研究做前期準備，也為我們進一步探討CKIΑ的生物學功能和研究它在BMSCS向肝樣細胞分化過程中的作用奠定基礎。本研究的第二部分我們擬通過GATEWAY技術(shù)構(gòu)建可誘導表達CKIΑ基因的慢病毒載體，再通過轉(zhuǎn)染大鼠BMSCS，獲得CKIΑ過表達的BMSCS模型，從而為下一步可誘導表達CKIΑ的鼠BMSCS肝向分化的體內(nèi)外實驗研究奠定基礎。第一章大鼠CKIΑ的原核表達及純化目的構(gòu)建大鼠CKIΑ表達質(zhì)粒，采用大腸桿菌原核表達系統(tǒng)制備重組CKIΑ并將其純化，獲得濃度高、純度好的重組CKIΑ。方法RNA提取試劑盒分離、純化大鼠肝細胞總RNA。然后再以RNA為模板，以隨機六聚體核苷酸為引物，在MMLV逆轉(zhuǎn)錄酶的作用下進行反應，合成CDNA的第一鏈。根據(jù)GENBANK報道的大鼠CKIΑ的編碼序列，設計擴增大鼠CKIΑ基因的兩對引物，分別在內(nèi)側(cè)上下游引物5端加上限制性酶切位點NDEI和BAMHI。以RT反應產(chǎn)物CDNA為模板，用TAQDNA聚合酶進行巢式PCR擴增CKIΑ基因。用低熔點瓊脂糖凝膠電泳分離純化PCR擴增產(chǎn)物后，將其插入原核表達質(zhì)粒PET16B，構(gòu)建重組質(zhì)粒PET16BCKIΑ，經(jīng)酶切和DNA測序鑒定后，將PET16BCKIΑ轉(zhuǎn)化大腸桿菌STB13感受態(tài)細菌。再將工程菌以1∶100接種于含有葡萄糖和甘油的LB培養(yǎng)基中，37℃振蕩培養(yǎng)至OD值約0510，之后繼續(xù)培養(yǎng)3小時。4℃離心收集細菌，洗滌，超聲破碎。1200RMIN離心洗滌，分離包涵體。沉淀用含05％的TRITON洗滌3次，純化包涵體。用8M尿素溶解包涵體，然后用凝膠過濾純化目的蛋白，并用WESTERNBLOTTING對重組CKIΑ樣品進行分析鑒定。結(jié)果1、經(jīng)核苷酸序列測定和NDEIBAMHI雙酶切鑒定結(jié)果表明，成功構(gòu)建了重組質(zhì)粒PET16BCKIΑ2、經(jīng)NINTA柱親和純化后的重組CKIΑ經(jīng)WESTERNBLOTTING檢測，在30KDA和40KDA之間可見明顯增濃的大小約為38KDA的蛋白條帶，并在膠片上有相應的曝光條帶，與預期大小相符。結(jié)論1、成功構(gòu)建了PET16BCKIΑ原核表達載體，將其轉(zhuǎn)化至大腸桿菌后表達出CKIΑ的重組蛋白2、初步摸索優(yōu)化了重組大鼠CKIΑ的表達條件，包含體提取步驟，初步純化工藝3、成功克隆了大鼠CKIΑ基因，序列分析和文獻報道一致4、純化獲得重組CKIΑ，為進一步蛋白質(zhì)生物學功能鑒定和探討其在骨髓間充質(zhì)干細胞的肝向分化中的作用研究奠定了一定基礎。第二章攜帶大鼠CKIΑ基因慢病毒載體的構(gòu)建及轉(zhuǎn)染鼠BMSCS的實驗研究目的構(gòu)建可誘導表達CKIΑ基因的慢病毒載體，轉(zhuǎn)染人胚胎腎上皮細胞系293FT細胞獲得相應的病毒顆粒，感染并獲得在強力霉素誘導條件下穩(wěn)定、高效表達CKIΑ的BMSCS，為下一步可誘導表達CKIΑ的鼠BMSCS肝向分化的體內(nèi)外實驗研究奠定基礎。方法以PCDNACKIΑ為模板，采用聚合酶鏈反應法擴增前后端帶有ATTB重組位點的CKIΑ全長序列。利用GATEWAY載體構(gòu)建技術(shù)，將擴增產(chǎn)物通過BP反應克隆至PDOWN載體中，測序正確后，采用LR重組酶將PDOWNCKIΑ，PUPEF1A和PLVDES3DPNEO進行重組反應，構(gòu)建慢病毒載體表達質(zhì)粒PLVDES3DPNEOEF1ACKIΑIRESEGFP。然后將PLVDES3DPNEOEF1ACKIΑIRESEGFP與包裝質(zhì)粒（PLVHELPERSL3、PLVHELPERSLA、PLVHELPERSL5）混合，利用脂質(zhì)體共同轉(zhuǎn)染293FT細胞，包裝攜帶CKIΑ基因的慢病毒顆粒，然后感染大鼠BMSCS。在強力霉素DOXCYCLINE的誘導下，應用RTPCR方法檢測感染BMSCSCKIΑ基因表達情況，應用WESTERNBLOTTING方法檢測感染BMSCSCKIΑ的表達情況。結(jié)果通過酶切、聚合酶鏈式反應及測序驗證可誘導CKIΑ真核表達慢病毒載體構(gòu)建成功PLVDES3DPNEOEF1ACKIΑIRESEGFP與包裝質(zhì)粒共轉(zhuǎn)染包裝細胞293FT細胞，成功獲得攜帶CKIΑ基因的慢病毒顆粒，包裝產(chǎn)生病毒滴度為CKIΑ組5107TUML，繼之感染大鼠BMSCS，在強力霉素誘導條件下，經(jīng)過熒光顯微鏡檢測感染率達90％以上，應用RTPCR方法檢測重組CKIΑ基因表達情況，證實轉(zhuǎn)染組基因水平的表達量為陽性，未轉(zhuǎn)染組為陰性。應用WESTERNBLOTTING方法檢測CKIΑ表達情況，證實轉(zhuǎn)染組細胞表達陽性未轉(zhuǎn)染組表達為陰性。結(jié)論成功構(gòu)建出可誘導表達CKIΑ基因的慢病毒載體，獲得濃縮LENTIVIRALCKIΑ病毒液，在此基礎上最終獲得可以在強力霉素誘導條件下CKIΑ過表達的BMSCS模型，為下一步可誘導表達CKIΑ的鼠BMSCS肝向分化的體內(nèi)外研究奠定基礎。

簡介：分類號學校代碼10542密級學號201302080640ACOGNITIVESTUDYOFTHECOOCCURRENTINTERROGATIVECONSTRUCTION“V腳PREDICATE，，同現(xiàn)疑問詞構(gòu)式“VXXPREDICATE“的認知研究指導教師姓名、職稱廑憝墜熬撞湖南師范大學學位評定委員會辦公室二。一六年六月ABSTRACTTHENONINTERROGATIVEUSAGESOFTHEINTERROGATIVEWORDSAREVERYIMPORTANTPARTSOFTHESTUDYOFINTERROGATIVESSOFARTHESTUDIESABOUTINTERROGATIVEWORDSMAINLYFOCUSONTHECLASSIFICATIONOFTHENONINTERROGATIVEUSAGESOFSINGLEINTERROGATIVEWORDSTHESTUDIESOFCOOCCURRENTINTERROGATIVEWORDSDON’TGETMUCHATTENTIONFROMMOSTOFTHESCHOLARS。碭HSTHISTHESISTAKESTHECOOCCURRENTCONSTRUCTION“VOPREDICATE“，WHICHISASPECIALFORMOFTHESAMEINTERROGATIVESWITHSEPARATEDUSAGE，ASTHESTUDYOBJECTBYANALYZINGTHESYNTACTICSTRUCTUREANDSEMANTICFEATURESUNDERTHEGUIDEOFPROTOTYPETHEORYANDCONSTRUCTIONGRAMMARTHETHESISHASMADEATENTATIVESTUDYABOUTTHEMOTIVATIONOFTHEEMERGENCEOFTHENONINTERROGATIVEMEANINGMEANWHILETHETHESISALSODISCUSSESTHECORRESPONDINGENGLISHEXPRESSIONSTOMAKEACONTRASTGENERALLYTHECOOCCURRENTINTERROGATIVEWORDSCANBECLASSIFIEDINTOFOURTYPES，NAMELYTHESAMEINTERROGATIVESWITHSUCCESSIVEUSAGE，THESAMEINTERROGATIVESWITHSEPARATEDUSAGE，THEDIFFERENTINTERROGATIVESWITHSUCCESSIVEUSAGEANDTHEDIFFERENTINTERROGATIVESWITHSEPARATEDUSAGETHEOBJECTOFTHISTHESIS‘‘VXXPREDICATE’’ISASPECIALFORMOFTHESAMEINTERROGATIVESWITHSEPARATEDUSAGEBASEDONTHELINGUISTICDATACOLLECTED，THETHESISANALYZESTHESIXSUBCONSTRUCTIONSOF“VXXPREDICATE’’IN

簡介：目的（1）在HSV1感染BV2細胞建立的單純皰疹病毒性腦炎模型中，觀察TLR2信號通路各分子及下游炎性因子的變化，進一步明確TLR2通路在其發(fā)病過程中的作用；2研究在正常BV2細胞、單純皰疹病毒性腦炎模型中，柯里拉京對TLR2信號通路、下游炎性因子的干預作用，探索柯里拉京發(fā)揮抗炎作用的機制。方法（1）培養(yǎng)BV2細胞系、VERO細胞系，用VERO細胞擴增HSV1，提取HSV1，10稀釋病毒共8個滴度梯度，對BV2細胞進行滴定，記錄細胞形態(tài)變化，采用REEDMUENCH法計算出病毒TCID50滴度，以100TCID滴度HSV1感染BV2細胞系建立單純皰疹病毒性腦炎模型，模型組、正常對照組分別用ELISA方法檢測炎癥因子TNFΑ、IL6的表達量，用RTPCR方法檢測TLR2及下游信號通路中TIRAP、MYD88、IRF5、P38、NEMOMRNA相對表達水平，用流式細胞術(shù)檢測細胞表面TLR2的表達水平，用WESTERNBLOT方法檢測TIRAP、MYD88、P38、PP38、NEMO蛋白相對表達水平。（2）配制柯里拉京溶液，2倍稀釋8個濃度梯度對BV2細胞進行干預，用MTT方法檢測細胞活性以觀察柯里拉京的細胞毒性。用柯里拉京分別干預正常BV2細胞、HSE模型細胞，用上述方法檢測TLR2及下游各分子的變化。結(jié)果（1）HSV1感染小膠質(zhì)細胞BV2造模成功，單純皰疹病毒性腦炎模型組相對于對照組TLR2信號通路下游炎性因子TNFΑ、IL6分泌明顯增多，TLR2及下游信號通路中TRIAP、MYD88、IRF5、P38、NEMO的MRNA表達量升高，細胞表面TLR2增多，TRIAP、MYD88、P38、PP38、NEMO蛋白表達水平增高；差異均有統(tǒng)計學意義（P結(jié)論（1）TLR2信號通路在單純皰疹病毒性腦炎發(fā)病過程中中介導強烈免疫反應；（2）柯里拉京可能通過抑制TLR2信號通路的活性而減輕單純皰疹病毒性腦炎模型中的炎癥反應。

簡介：點擊查看更多上海市社區(qū)醫(yī)生及基地學員三階梯鎮(zhèn)痛認知現(xiàn)況調(diào)查.pdf精彩內(nèi)容。