簡(jiǎn)介：隨著科技水平的不斷發(fā)展，現(xiàn)代生物技術(shù)研制出的各種有效的疫苗，對(duì)各種傳染病的預(yù)防和控制已經(jīng)達(dá)到了顯著效果。免疫佐劑IMMUNOADJUVANT作為疫苗的添加劑，對(duì)疫苗的免疫預(yù)防作用有效地發(fā)揮起著至關(guān)重要的作用。免疫佐劑是指先于抗原或與抗原同時(shí)應(yīng)用，能非特異地改變或增強(qiáng)機(jī)體對(duì)抗原的特異性免疫應(yīng)答，以及能增強(qiáng)相應(yīng)抗原的免疫原性或改變免疫反應(yīng)類型的物質(zhì)。佐劑對(duì)疫苗免疫效應(yīng)的增強(qiáng)作用主要表現(xiàn)在能在機(jī)體內(nèi)緩慢釋放抗原物質(zhì)以延長(zhǎng)疫苗與免疫細(xì)胞的作用時(shí)間能通過增加抗原物質(zhì)的表面積使之易于被巨噬細(xì)胞識(shí)別和吞噬刺激淋巴細(xì)胞的分裂和漿細(xì)胞產(chǎn)生抗體提高機(jī)體抗體滴度能夠改變抗體的類型以及增強(qiáng)遲發(fā)型變態(tài)反應(yīng)。傳統(tǒng)的免疫佐劑種類繁多，按免疫原性可分為具備免疫原性的佐劑和不具備免疫原性的佐劑，按化學(xué)性質(zhì)可分為無機(jī)佐劑、有機(jī)佐劑、合成佐劑、油劑四種。隨著新型疫苗的不斷發(fā)展，對(duì)免疫佐劑的各方面的要求也提高了，傳統(tǒng)的免疫佐劑因其安全性、免疫刺激效果等問題逐漸受到質(zhì)疑和淘汰，新的免疫佐劑的研究越來越受到廣泛關(guān)注。殼聚糖CHITOSAN，CS是由自然界中的甲殼素經(jīng)脫乙酰作用得到的，是天然多糖中帶正電的高分子物質(zhì)，具有化學(xué)穩(wěn)定性良好、無毒無害、生物相容性優(yōu)良和代謝產(chǎn)物無毒并能被生物體完全吸收等優(yōu)點(diǎn)。但CS在水中的溶解度非常低，廣泛應(yīng)用受到了一定限制。水溶性殼聚糖衍生物的制備解決了CS溶解性問題，具有更廣泛的研究和應(yīng)用前景。本實(shí)驗(yàn)室按照文獻(xiàn)以3氯2羥丙基三甲基氯化銨（3CHLO2HYDROXYPROPYLTRIMETHYLAMMONIUMCHLIDE，CTA）為化學(xué)改性劑對(duì)CS進(jìn)行接枝改性制備的殼聚糖季銨鹽3氯2羥丙基三甲基殼聚糖（3CHLINE2HYDROXYPROPYLTRIMETHYLCHITOSAN，HTCC）接枝度高達(dá)714％，溶解性高達(dá)701MGML。本實(shí)驗(yàn)以HTCC作為免疫佐劑，表達(dá)的戊型肝炎病毒HEPATITISEVIRUS，HEV重組蛋白作為多肽疫苗，免疫接種小鼠，檢測(cè)免疫指標(biāo)以評(píng)價(jià)HTCC作為免疫佐劑的潛質(zhì)。本研究主要內(nèi)容包括以下幾方面1HEV重組蛋白的表達(dá)、純化、復(fù)性和鑒定將包含HEVF2基因片段（394AA660AA）和HEVF3全基因的表達(dá)質(zhì)粒PET28AF23在大腸桿菌中進(jìn)行異丙基硫代半乳糖苷IPTG誘導(dǎo)表達(dá)37℃，200RPM條件下誘導(dǎo)培養(yǎng)4H后，分別取培養(yǎng)液、超聲上清和沉淀樣品進(jìn)行聚丙烯酰胺凝膠電泳SDSPAGE分析，結(jié)果顯示HEV重組蛋白在大腸桿菌中以包涵體形式表達(dá)。超聲沉淀經(jīng)低濃度尿素溶液洗滌、高濃度尿素溶解、NINTAHISBINDRESINS純化、梯度濃度的尿素復(fù)性液透析復(fù)性、聚乙二醇濃縮獲得純化的重組蛋白。分別取蛋白粗純化樣品、NINTAHISBINDRESINS純化樣品以及復(fù)性濃縮后的樣品進(jìn)行SDSPAGE分析得出低濃度尿素洗滌效果良好，去除了包涵體中大量的雜蛋白NINTAHISBINDRESINS純化效果顯著，得到了高純度的目的蛋白純化蛋白復(fù)性和濃縮后蛋白條帶清晰度高、條帶單一表明獲得了一定純度和濃度的HEV重組蛋白。復(fù)性濃縮的蛋白經(jīng)WESTERNBLOT分析表明其免疫原性良好。復(fù)性濃縮后的HEV重組蛋白作為多肽疫苗免疫小鼠。2免疫效果的研究50只BALBC雌性小鼠隨機(jī)分為5組①加HTCC佐劑組15MGMLHTCC02MGMLHEV重組蛋白②陽性組（弗氏佐劑02MGMLHEV重組蛋白）③不加佐劑組（02MGMLHEV重組蛋白）④HTCC15MGML組⑤PBS組。各組小鼠后腿肌肉注射200ΜL只次，間隔3周加強(qiáng)免疫一次，共免疫2次。在初次免疫2周、加強(qiáng)免疫2周和5周三個(gè)免疫階段，5組小鼠尾部靜脈取血分離血清，采用ELISA檢測(cè)抗HEVIGG抗體水平。末次免疫5周后，四色流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)免疫小鼠全血中CD4、CD8、IFNΓ和IL4細(xì)胞的百分率MTS法檢測(cè)小鼠脾臟T淋巴細(xì)胞的增殖反應(yīng)。加HTCC佐劑組在三個(gè)免疫階段中血清中的抗HEVIGG抗體均極顯著高于不加佐劑組P＜001，其小鼠脾臟T淋巴細(xì)胞的蛋白刺激指數(shù)也顯著高于不加佐劑組（P＜005）。流式細(xì)胞術(shù)結(jié)果表明各組間的CD4細(xì)胞百分率無顯著差異，加HTCC佐劑組的IFNΓ細(xì)胞百分率顯著高于不加佐劑組和兩個(gè)陰性組P＜005，其IL4細(xì)胞百分率顯著低于不加佐劑組和兩個(gè)陰性組（P＜005）。綜上所述，，HTCC作為HEV重組多肽疫苗的佐劑接種免疫小鼠，在一定程度上增強(qiáng)了多肽疫苗的免疫效果。

簡(jiǎn)介：分類號(hào)R2031密級(jí)學(xué)位類別科學(xué)學(xué)位囤專業(yè)學(xué)位口學(xué)校代碼10062學(xué)號(hào)20093034學(xué)科門類醫(yī)學(xué)又肄眚科鼻號(hào)碩士學(xué)位論文M俊STER’SDISSER姍ON論文題目?jī)?nèi)觀認(rèn)知療法合并藥物治療驚恐障礙的臨床對(duì)照研究TITLETHECLINICALSTUDYBETWEENNAIKANCOGNITIVEWITHMEDICINETHERAPYANDMEDICINETHERAPYONPATIENTSWITHPANICDISORDER一級(jí)學(xué)科臨床醫(yī)學(xué)二級(jí)學(xué)科精神病與精神衛(wèi)生學(xué)論文作者黃敬指導(dǎo)教師毛富強(qiáng)教授天津醫(yī)科大學(xué)研究生院二。一四年五月天津醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文中文摘要目的驚恐障礙是一種常見的急性焦慮障礙，嚴(yán)重影響患者的生活質(zhì)量和社會(huì)功能。本文探討了內(nèi)觀認(rèn)知療法NAIKANCOGNITIVETHERAPY，NCT合并藥物對(duì)于改善驚恐障礙患者臨床癥狀、社會(huì)功能和生活質(zhì)量的療效，為驚恐障礙的116I床治療提供新干預(yù)措施提供理論依據(jù)。方法將2010年11月10日至2011年5月LO日華北石油精神康復(fù)醫(yī)院住院病人符合國(guó)際疾病分類第十版INTERNATIONALCLASSIFICATIONOFDISEASES10，ICD10診斷標(biāo)準(zhǔn)的驚恐障礙患者70例，收集患者一般情況信息后，應(yīng)用隨機(jī)數(shù)字表法，將患者隨機(jī)分為干預(yù)組和對(duì)照組，干預(yù)組N35在服用帕羅西汀的基礎(chǔ)上，合并給予連續(xù)每天3小時(shí)療程四周的NCT對(duì)照組N35在服用帕羅西汀的基礎(chǔ)上合并給予常規(guī)支持性心理治療SUPPORTIVEPSYCHOTHERAPY，SP，觀察病情變化?；颊咴谌虢M、治療后分別進(jìn)行漢米爾頓焦慮量表HAMA17、臨床總體印象量表CGI、焦慮自評(píng)量表SAS、生活質(zhì)量量表SF36的評(píng)估。結(jié)果共有4例患者脫落，研究組32人對(duì)照組34人完成本研究。干預(yù)前兩組患者一般情況以及各評(píng)估指標(biāo)間比較均無明顯差異。①研究組患者治療后臨床總體印象量表CGIS評(píng)分較治療前明顯下降，經(jīng)配對(duì)樣本T檢驗(yàn)后，有顯著性統(tǒng)計(jì)學(xué)差異T13392，P0000。對(duì)照組治療后臨床總體印象量表CGIS評(píng)分較治療前下降，有顯著性統(tǒng)計(jì)學(xué)差異T14670，PO000。治療后研究組CGIS評(píng)分低于對(duì)照組患者，經(jīng)獨(dú)立樣本T檢驗(yàn)后，有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異T2127，P0037。治療后兩組患者疾病改善程度評(píng)分經(jīng)獨(dú)立樣本T檢驗(yàn)后有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異T2260，P0027。②研究組患者治療后HAMA焦慮評(píng)分軀體化焦慮因子、精神性焦慮因子評(píng)分均較治療前明顯下降，經(jīng)配對(duì)樣本T檢驗(yàn)后，有顯著性統(tǒng)計(jì)學(xué)差異固2200，P0000；T19320，P0000；T16275，P0000。對(duì)照組治療后HAMA焦慮評(píng)分較治療前下降，有顯著性統(tǒng)計(jì)學(xué)差異T23762，P0000；T25489，P0000；T17084，P0000。治療后研究組HAMA焦慮評(píng)分低于對(duì)照組患者，經(jīng)獨(dú)立樣本T檢驗(yàn)后，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義T3285，P0002；戶3158，P0003；戶2544，P0013。③研究組治療前后HAMA減分率為745341364％，對(duì)照組治療前后減分率661341030％，研究組減分率高于對(duì)照組，經(jīng)獨(dú)立樣本T檢驗(yàn)有差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義戶2835，P0006。④研究組

簡(jiǎn)介：目的研究KI67啟動(dòng)子調(diào)控的荷載雙基因RNA干擾的條件增殖腺病晦KI67ZD55DOUBLESIRNA對(duì)人腎癌細(xì)胞裸鼠皮下移植瘤生長(zhǎng)的影響，為臨床腎癌的病毒基因聯(lián)合治療提供依據(jù)。方法將培養(yǎng)至對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的KETR3人腎透明細(xì)胞癌細(xì)胞注射裸鼠皮下，構(gòu)建裸鼠皮下移植瘤模型，建模成功后將裸鼠隨機(jī)分為5組，每組10只，分別用KI67ZD55病毒、KI67ZD55KI67SIRNA病毒、KI67ZD55HTERTSIRNA病毒、KI67ZD55DOUBLESIRNA病毒及PBS進(jìn)行治療，病毒每次注射02ML7108PFU，PBS注射02ML，隔天注射一次，共三次。在治療結(jié)束的第7天，每組隨機(jī)脫頸處死4只動(dòng)物，取下瘤體組織，免疫組化法檢測(cè)瘤體內(nèi)KI67蛋白、HTERT蛋白及E1A蛋白的表達(dá)，WESTERN檢測(cè)E1A蛋白的表達(dá)，HE染色檢測(cè)腫瘤組織情況，TUNEL法檢測(cè)腫瘤組織細(xì)胞凋亡，其余動(dòng)物繼續(xù)飼養(yǎng)，定期測(cè)量腫瘤體積，繪制腫瘤時(shí)間體積生長(zhǎng)抑制曲線，在治療的第35天處死全部動(dòng)物，測(cè)量最終體積，取下肝臟組織，HE染色觀察病毒治療的毒性作用。結(jié)果1成功構(gòu)建人腎透明細(xì)胞癌裸鼠皮下移植瘤模型。2免疫組化顯示KI67ZD55DOUBLESIRNA組KI67蛋白的表達(dá)明顯低于其余各組，抑制KI67表達(dá)作用由強(qiáng)到弱依次為KI67ZD55DOUBLESIRNAKI67ZD55KI67SIRNAKI67ZD55HTERTSIRNAKI67ZD55PBS，KI67ZD55DOUBLESIRNA組與其余各組之間比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義PKI67ZD55HTERTSIRNAKI67ZD55KI67SIRNAKI67ZD55PBS，KI67ZD55DOUBLESIRNA組與其余各組之間比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義P3免疫組化法及WESTERN顯示，病毒復(fù)制蛋白E1A在PBS組無表達(dá)，而KI67ZD55組、KI67ZD55KI67SIRNA組、KI67ZD55HTERTSIRNA組、KI67ZD55DOUBLESIRNA組可見蛋白表達(dá)陽性信號(hào)，提示病毒在這四組腫瘤的瘤體內(nèi)復(fù)制。4瘤組織HE染色中PBS組細(xì)胞漿染色松散色淺，可見胞核呈雙葉或多葉分裂像，提示細(xì)胞增殖活躍，而KI67ZD55組、KI67ZD55KI67SIRNA組、KI67ZD55HTERTSIRNA組、KI67ZD55DOUBLESIRNA組可見到不同程度的細(xì)胞核深染，很少有核分裂像，顯示腫瘤組織生長(zhǎng)抑制。5TUNEL檢測(cè)各治療組凋亡率分別為PBS組416±183％，KI67ZD55組2384±316％，KI67ZD55HTERTSIRNA組4523±362％，KI67ZD55KI67SIRNA組3619±482％，KI67ZD55DOUBLESIRNA組6272±593％，KI67ZD55DOUBLESIRNA組與其余四組之間比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義P6腫瘤生長(zhǎng)抑制曲線顯示KI67ZD55DOUBLESIRNA組與其余組比較，抑制腫瘤生長(zhǎng)效果最強(qiáng)。7各處理組肝臟病理HE染色未見明顯差異。結(jié)論溶瘤腺病毒KI67ZD55DOUBLESIRNA能抑制腫瘤組織增殖、促進(jìn)其凋亡，可有效同時(shí)抑制人腎癌裸鼠移植瘤KI67蛋白及HTERT蛋白表達(dá)，其抑制腫瘤生長(zhǎng)的作用明顯強(qiáng)于其他兩種單干擾腺病毒，為腎癌的病毒基因聯(lián)合治療的提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。

簡(jiǎn)介：人乳頭瘤病毒HPV感染屬于嚴(yán)重的性傳播疾病，給人類健康帶來很大的影響，臨床學(xué)、分子生物學(xué)和流行病學(xué)調(diào)查已經(jīng)證明人乳頭瘤病毒是宮頸癌的主要病因，并且隨著科學(xué)技術(shù)的快速發(fā)展，分子生物學(xué)和基因工程技術(shù)的應(yīng)用不斷進(jìn)步，預(yù)防和治療宮頸癌的疫苗倍受許多科學(xué)家的重視。因此，此項(xiàng)疫苗的研究具有非常重要的社會(huì)效益和經(jīng)濟(jì)效益。目前大多數(shù)關(guān)于HPV疫苗的研究都是以其晚期蛋白L1或L1L2所形成的病毒樣顆粒VLPS為基礎(chǔ)進(jìn)行的，在本實(shí)驗(yàn)中，我們應(yīng)用畢赤酵母表達(dá)系統(tǒng)開展了基因工程HPV16L1預(yù)防性疫苗的研究工作，取得了一些進(jìn)展，為該疫苗的進(jìn)一步發(fā)展奠定了基礎(chǔ)。實(shí)驗(yàn)期間主要得到了以下幾個(gè)方面的結(jié)果1搜索GENEBANK中有關(guān)HPV16L1的基因序列，共搜索到30條較完整的序列，用軟件ALIGNX進(jìn)行序列比對(duì)，確定同源性最大的氨基酸序列，再根據(jù)畢赤酵母密碼子進(jìn)行優(yōu)化，送上海生工合成，但三個(gè)月后送來兩個(gè)片段，兩片段間有一段重復(fù)序列其中都含有BGLⅡ的酶切位點(diǎn)，將兩個(gè)片段分別酶切后通過BGLⅡ進(jìn)行連接，將連接產(chǎn)物作為模板，進(jìn)行PCR反應(yīng)，將其產(chǎn)物進(jìn)行鑒定，合成了全長(zhǎng)為1536BP的HPV16L1基因。2構(gòu)建了酵母重組質(zhì)粒PAO81916L1，經(jīng)酶切鑒定正確后通過電擊轉(zhuǎn)化到酵母菌株GS115中，經(jīng)G418抗性篩選獲高拷貝工程菌并用甲醇1％誘導(dǎo)進(jìn)行表達(dá)，每隔24H補(bǔ)加甲醇1％，在誘導(dǎo)后48H、72H和96H收菌，用WESTERNBLOT鑒定現(xiàn)在55KD處出現(xiàn)特異性的條帶，而陰性對(duì)照中未出現(xiàn)目的條帶，發(fā)現(xiàn)誘導(dǎo)后72H表達(dá)量最高。3構(gòu)建原核重組質(zhì)粒PET431A16L1，經(jīng)酶切鑒定正確后轉(zhuǎn)化至BL21CODONPLUSDE3和BL21CEDONPLUSDE3RILP菌株中進(jìn)行表達(dá)，目的蛋白以包涵體的形式存在，通過8M尿素變性處理后過離子交換樹脂，分階段進(jìn)行洗脫，01MNACL可洗脫雜蛋白，05MNACL可洗脫目的蛋白，純度可達(dá)80％以上，以便對(duì)酵母表達(dá)的目的蛋白進(jìn)行陽性對(duì)照。4構(gòu)建了真核重組質(zhì)粒PDRVI1016L1，經(jīng)酶切和測(cè)序鑒定正確后，用試劑盒大提質(zhì)粒免疫小鼠，共免疫四針，每次免疫后通過電穿孔加強(qiáng)免疫效果，制備了抗HPV16L1的抗血清，通過WB鑒定后發(fā)現(xiàn)該抗體能產(chǎn)生特異性的條帶，滴度較高，但特異性不強(qiáng)。

簡(jiǎn)介：研究背景高效抗逆轉(zhuǎn)錄病毒療法（HIGHLYACTIVEANTIRETROVIRALTHERAPY，HAART）被認(rèn)為是現(xiàn)今治療HIVAIDS行之有效的方法。奈韋拉平NEVIRAPINE，NVP是非核苷類逆轉(zhuǎn)錄酶抑制劑的一種，目前我國(guó)使用HAART方案治療的患者中大部分仍以NVP作為初始治療的首選藥物。因此，優(yōu)化NVP臨床用藥方案，觀察NVP血藥濃度與病毒學(xué)應(yīng)答的關(guān)系，探討NVP藥物相關(guān)肝毒性和皮疹發(fā)生的影響因素及發(fā)生機(jī)制等具有重要的臨床意義和價(jià)值。洛匹那韋LOPINAVIR，LPV和利托那韋RITONAVIR，RTV均是蛋白酶抑制劑，替諾福韋TENOFOVIR，TNF是核苷酸類逆轉(zhuǎn)錄酶抑制劑的一種，目前在我國(guó)主要應(yīng)用于初治治療失敗的HIVAIDS患者，研究這兩種藥物在中國(guó)HIVAIDS患者體內(nèi)的藥代動(dòng)力學(xué)特征對(duì)促進(jìn)其臨床安全有效應(yīng)用具有重要價(jià)值。研究目的探討NVP在中國(guó)HIVAIDS人群中的臨床藥效學(xué)和藥動(dòng)學(xué)特點(diǎn)；建立高效液相色譜法測(cè)定人血漿中TNF濃度，觀察TNF在中國(guó)HIVAIDS人群中臨床藥代動(dòng)力學(xué)特征；建立高效液相色譜法同時(shí)測(cè)定人血漿中LPV和RTV濃度，觀察LPV在中國(guó)HIVAIDS人群中的臨床藥動(dòng)學(xué)特征。研究對(duì)象與方法篩選2005～2011年期間接受包含NVP治療方案、規(guī)律隨診、自愿簽署知情同意書的828例HIVAIDS患者，于服藥前或服藥后2～4小時(shí)采集靜脈血2ML并分離血漿，應(yīng)用高效液相色譜紫外檢測(cè)法HPLCUV測(cè)定人血漿中藥物濃度，并詳細(xì)記錄治療前及每次隨診時(shí)患者的一般情況、血尿常規(guī)、肝腎功能、淋巴細(xì)胞亞群計(jì)數(shù)及病毒載量等結(jié)果，進(jìn)行NVP相關(guān)臨床藥動(dòng)學(xué)和藥效學(xué)分析。招募接受包含TNF和／或LPV抗病毒治療方案的16位患者住院治療，于服藥前以及服藥后05，1，15，2，2534，6，8，10，12，16，24小時(shí)，采集靜脈血并分離凍存血漿，應(yīng)用本研究建立的HPLCUV法分別測(cè)定人血漿中TNF和LPV藥物濃度，采用WINONLIN軟件計(jì)算TNF和LPV臨床藥動(dòng)學(xué)參數(shù)。研究結(jié)果導(dǎo)入期末NVP血漿谷濃度（CTROUGH）為426ΜGMLIQR305561，峰濃度CMAX為507ΜGMLIQR392644，均已達(dá)到國(guó)際公認(rèn)有效治療濃度下限30ΜGML，但是顯著低于穩(wěn)態(tài)NVPCTROUGH（615ΜGML，IQR463820，P0000）和NVPCMAX（651ΜGML，IQR522841，P0000）。分層分析發(fā)現(xiàn)，基線ALT≥15ULN患者的導(dǎo)入期末NVPCTROUGH顯著高于ALT＜15ULN患者（486VS425ΜGML，P0045）；隨著用藥時(shí)間的延長(zhǎng)，HIV合并HCV感染患者NVPCTROUGH逐漸升高，至隨訪第48周CTROUGH顯著高于未合并HCV感染患者816VS615ΜGML，P0004。發(fā)生病毒學(xué)失敗VIRALOGOCALFAILURE，VF的患者NVPCTROUGH均值顯著低于完全病毒學(xué)抑制和部分病毒學(xué)抑制患者組323ΜGMLVS673和660ΜGML，P0000。當(dāng)NVPCTROUGH＜39ΜGML時(shí)，發(fā)生VF的風(fēng)險(xiǎn)是NVPCTROUGH≥39ΜGML患者的615倍，預(yù)測(cè)VF發(fā)生的靈敏度和特異度分別為879％和90。單因素分析提示合并HCV感染、ALT和AST≥125ULN、CD4計(jì)數(shù)≥250MM3與肝損發(fā)生相關(guān)，女性、體重＜55KG與CD4計(jì)數(shù)≥250MM3與重度肝損發(fā)生相關(guān)，進(jìn)一步分層分析發(fā)現(xiàn)男性合并HCV感染會(huì)增加肝損發(fā)生風(fēng)險(xiǎn)，女性合并HCV感染則未觀察到這一現(xiàn)象；多因素LOGISTIC回歸分析發(fā)現(xiàn)ALT和AST水平升高以及高CD4計(jì)數(shù)與肝損發(fā)生密切相關(guān)，低體重和高CD4計(jì)數(shù)與重度肝損發(fā)生密切相關(guān)。男性患者肝損當(dāng)次NVPCTROUGH≥10ΜGML時(shí)發(fā)生重度肝損的比例是NVPCTROUGH＜10ΜGML患者的377倍，女性患者則未觀察到這一現(xiàn)象。當(dāng)肝損前次NVPCTROUGH≥5ΜGML時(shí)，發(fā)生肝損的風(fēng)險(xiǎn)是NVPCTROUGH＜5ΜGML患者的236倍，預(yù)測(cè)肝損發(fā)生的靈敏度和特異度分別為6L9和593。當(dāng)導(dǎo)入期NVPCTROUG≥6ΜGML時(shí)，發(fā)生肝損的風(fēng)險(xiǎn)是NVPCTROUGH＜6ΜGML患者的221倍，預(yù)測(cè)肝損發(fā)生的靈敏度和特異度分別為600和595。女性NVP相關(guān)皮疹發(fā)生風(fēng)險(xiǎn)是男性患者的173倍，合并HBVHCV感染或高CD4計(jì)數(shù)不會(huì)增加服藥患者皮疹發(fā)生風(fēng)險(xiǎn)；皮疹患者皮疹發(fā)生前次、當(dāng)次和后次MIG、IP10和IFNΓ因子水平均顯著高于正常健康人群，皮疹患者其當(dāng)次MIG和IP10因子水平均顯著高于皮疹發(fā)生前次和后次。建立同時(shí)測(cè)定人血漿中LPV和RTV濃度的高效液相色譜方法，LPV在05～20ΜGML范圍內(nèi)，RTV在005～5ΜGML范圍內(nèi)線性良好（R09995和09997）；建立測(cè)定人血漿中TNF濃度的高效液相色譜方法，TNF在20～2000NGML范圍內(nèi)線性良好R09997。兩種高效液相色譜檢測(cè)方法靈敏度高，操作簡(jiǎn)便，精密度、準(zhǔn)確度及穩(wěn)定性結(jié)果考察良好。WINNONLIN軟件計(jì)算顯示，替諾福韋符合二室模型，計(jì)算的藥動(dòng)參數(shù)分別為TMAX（120±047H）、CMAX36151±21904NGML、AUC407750±155488NGHML、T122953±1412H和CLF8089±2149LH統(tǒng)計(jì)學(xué)分析發(fā)現(xiàn)未合并LPV的患者其TNF血漿T12顯著大于合并LPV的患者（3804VS2209H，P0023）。TNF的非房室模型藥動(dòng)參數(shù)分別為T122184±764H、TMAX133±045H、CMAX44709±21739NGML、CTROUGH9866±3666NGM、AUC（40747±155186NGHML）和CLF4577±1305LH。LPV在中國(guó)服藥人群具有達(dá)峰時(shí)間晚、個(gè)體差異大等特點(diǎn)結(jié)論NVP200MG一天一次的給藥方式在中國(guó)HIVAIDS人群中可能具有可行性；基線肝臟功能異常和合并HCV感染會(huì)對(duì)NVP藥物代謝產(chǎn)生影響，臨床應(yīng)予以重視；NVPCTROUGH降低與病毒學(xué)失敗的發(fā)生相關(guān)，與國(guó)際通用的NVPCTRUGH30ΜGML閾值相比，在中國(guó)人群中以39ΜGML作為預(yù)測(cè)病毒學(xué)失敗發(fā)生的治療濃度閾值具有較高靈敏度；NVPCTROUGH升高與肝毒性發(fā)生相關(guān)特別是在男性患者中，肝損前次NVPCTROUG≥5ΜGML及導(dǎo)入期NVPCTROUGH≥6ΜGML預(yù)測(cè)肝損發(fā)生有一定的臨床意義；女性患者易出現(xiàn)NVP相關(guān)皮疹，IP10和MIG等炎癥性趨化因子可能通過介導(dǎo)TH1型免疫應(yīng)答反應(yīng)促進(jìn)組織損傷從而參與了NVP相關(guān)皮疹的發(fā)生發(fā)展；中國(guó)HIVAIDS患者服用TNF的穩(wěn)態(tài)血漿T12、CMAX、CTROUGH及AUC均顯著高于國(guó)外研究水平，TMAX與國(guó)外研究報(bào)道類似，合并LPV用藥可能會(huì)對(duì)TNF的藥物消除產(chǎn)生影響，臨床應(yīng)予以重視；LPV在中國(guó)服藥人群具有達(dá)峰時(shí)間晚、個(gè)體差異大等特點(diǎn)。

簡(jiǎn)介：社會(huì)比較中的認(rèn)知偏差是指?jìng)€(gè)體在社會(huì)比較中表現(xiàn)出的過度自信與不自信現(xiàn)象。研究者通常將這種現(xiàn)象稱之為“優(yōu)于常人”效應(yīng)和“差于常人”效應(yīng)。本研究旨在探討造成社會(huì)比較中認(rèn)知偏差的原因，并以此為基礎(chǔ)，探究社會(huì)比較中的認(rèn)知偏差對(duì)決策過程和決策結(jié)果的作用機(jī)理以及內(nèi)在心理機(jī)制。在以往的研究中，研究者發(fā)現(xiàn)并證明了社會(huì)比較中認(rèn)知偏差現(xiàn)象的存在，并提出了對(duì)這種現(xiàn)象的解釋。從上世紀(jì)80年代至今研究者們一直對(duì)其產(chǎn)生的原因進(jìn)行探索，相繼提出了自我提升理論、權(quán)重差異理論和信息差異理論。本研究在前人研究的基礎(chǔ)之上，以在校大學(xué)生為被試，采用三個(gè)系列實(shí)驗(yàn)，探討了社會(huì)比較中認(rèn)知偏差現(xiàn)象的原因以及對(duì)判斷和決策的影響實(shí)驗(yàn)一通過操縱生活事件的類型以及事件的可觀測(cè)性來考察不同的任務(wù)類型與信息清晰度對(duì)社會(huì)比較中認(rèn)知偏差的影響。實(shí)驗(yàn)二在實(shí)驗(yàn)一的基礎(chǔ)上，考察社會(huì)比較的一個(gè)重要領(lǐng)域一競(jìng)爭(zhēng)中的比較偏差，通過操縱競(jìng)爭(zhēng)雙方的實(shí)力以及競(jìng)爭(zhēng)對(duì)手的信息清晰度來考察不同的任務(wù)類型與信息清晰度對(duì)競(jìng)爭(zhēng)中認(rèn)知偏差的影響，以及探討認(rèn)知偏差對(duì)決策者決策意圖的影響。實(shí)驗(yàn)三在實(shí)驗(yàn)一和實(shí)驗(yàn)二的基礎(chǔ)之上，通過操縱常識(shí)問題測(cè)驗(yàn)的難度以及個(gè)體判斷的時(shí)間來進(jìn)一步探究社會(huì)比較中認(rèn)知偏差的內(nèi)在心理機(jī)制，以及認(rèn)知偏差對(duì)決策者決策行為的影響。研究結(jié)果如下1在社會(huì)比較中，面對(duì)不同類型的問題，會(huì)出現(xiàn)不同的認(rèn)知偏差；2在社會(huì)比較中，不同類型的問題和信息清晰度共同影響認(rèn)知偏差，且二者之間存在交互作用；3社會(huì)比較中的認(rèn)知偏差會(huì)影響個(gè)體的決策意圖和決策行為；4當(dāng)任務(wù)的難度低于個(gè)體的預(yù)期時(shí)，大多數(shù)人傾向于認(rèn)為自己要優(yōu)于其他人；5當(dāng)任務(wù)的難度高于個(gè)體的預(yù)期時(shí)，大多數(shù)人傾向于認(rèn)為自己要差于其他人。

簡(jiǎn)介：隨著智能控制技術(shù)、計(jì)算機(jī)和網(wǎng)絡(luò)技術(shù)以及仿生學(xué)、人工智能等學(xué)科的飛速發(fā)展，智能移動(dòng)機(jī)器人技術(shù)的研究越來越受到國(guó)內(nèi)外學(xué)者的重視。移動(dòng)機(jī)器人自主定位是智能導(dǎo)航和環(huán)境探索研究的基礎(chǔ)，是機(jī)器人實(shí)現(xiàn)真正智能化和完全自主的關(guān)鍵技術(shù)。移動(dòng)機(jī)器人的工作環(huán)境可分為室外環(huán)境和室內(nèi)環(huán)境兩種，本文主要針對(duì)非完整移動(dòng)機(jī)器人在室內(nèi)環(huán)境中的自主定位和環(huán)境認(rèn)知兩個(gè)核心問題進(jìn)行研究。本文主要研究自主移動(dòng)機(jī)器人基于前向視覺傳感器在室內(nèi)走廊環(huán)境中的自定位問題。首先介紹了國(guó)內(nèi)外機(jī)器人自定位研究現(xiàn)狀，闡述了定位研究的主要方法、關(guān)鍵問題以及技術(shù)發(fā)展趨勢(shì)。然后建立了一個(gè)有效的環(huán)境地圖描述移動(dòng)機(jī)器人的工作空間。在大型室內(nèi)結(jié)構(gòu)化環(huán)境的移動(dòng)機(jī)器人視覺定位任務(wù)中，機(jī)器人要以有效的方式理解，解釋以及表達(dá)工作環(huán)境的相關(guān)信息，才利于機(jī)器人對(duì)場(chǎng)景的有效分析。本文討論了基于單向視覺的室內(nèi)走廊環(huán)境的自定位，開發(fā)了基于PIONEER3D的人機(jī)交互式可視化自定位系統(tǒng)，提出幾何拓?fù)浠旌先S地圖的環(huán)境地圖，給出了單向傳感器成像模型以及基于反饋分層估計(jì)融合的自定位算法。實(shí)驗(yàn)分析了給定初始位姿和觀測(cè)信息下定位系統(tǒng)的精度和位姿估計(jì)的收斂情況，在考慮動(dòng)態(tài)障礙物的遮擋情況下，機(jī)器人在復(fù)雜的走廊區(qū)域中完成了在線環(huán)境感知和運(yùn)動(dòng)自定位任務(wù)。未知環(huán)境中的移動(dòng)機(jī)器人只具有較少的先驗(yàn)知識(shí)，因此對(duì)環(huán)境的認(rèn)知是實(shí)現(xiàn)環(huán)境建模、定位、規(guī)劃、行動(dòng)等自主導(dǎo)航控制的基本前提。移動(dòng)機(jī)器人的認(rèn)知理論與方法研究涉及計(jì)算機(jī)科學(xué)、人工智能、認(rèn)知心理學(xué)、神經(jīng)學(xué)、仿生學(xué)等領(lǐng)域，是新興的交叉學(xué)科認(rèn)知科學(xué)的一項(xiàng)重要前沿研究項(xiàng)目。本文討論了環(huán)境認(rèn)知理論，并通過實(shí)驗(yàn)證明了SIFT算法在環(huán)境認(rèn)知理論中的實(shí)用性。

簡(jiǎn)介：心肌炎是威脅人類健康的常見疾病，是指心肌中有局限性或彌漫性的急性、亞急性或慢性的炎性病變可原發(fā)于心肌，也可是全身性疾病的一部分。病因有感染、理化因素、藥物等，最常見的是病毒性心肌炎VMC，其中又以腸道病毒，尤其是柯薩奇B病毒感染最多見。許多實(shí)驗(yàn)和臨床資料提示病毒性心肌炎、擴(kuò)張型心肌病DCM是一種疾病的兩個(gè)階段，VMC最終可轉(zhuǎn)化為DCM。目的本實(shí)驗(yàn)通過建立慢性病毒性心肌炎CVMC小鼠的動(dòng)物實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ?，觀察實(shí)驗(yàn)小鼠心臟結(jié)構(gòu)、心功能的變化及觀察慢性病毒性心肌炎小鼠外周血TH17和CD4CD25TREG細(xì)胞及其分泌的細(xì)胞因子的檢測(cè)分析，以及探討拮抗RAAS系統(tǒng)藥物改變TH17TREG平衡在慢性病毒性心肌炎的發(fā)生發(fā)展中的關(guān)系，以期為慢性病毒性心肌炎的心肌保護(hù)尋求更多更好的選擇。方法選42只4周齡BALBC健康雄性小鼠隨機(jī)分為正常對(duì)照組N6、CVMC模型組N36。CVMC模型組分別于0、14、28D腹腔接種02、025、03MLCVB3TCID5010401ML共3次，正常對(duì)照組小鼠同期腹腔注射等體積生理鹽水。42D時(shí)小鼠應(yīng)用彩色多普勒超聲顯像儀，行心臟超聲檢查；包括心率HR、左室舒張末期內(nèi)徑LVDD、左室收縮末期內(nèi)徑LVSD、射血分?jǐn)?shù)EF。自42D起，纈沙坦干預(yù)組均按100MGKGD灌胃給藥，每日1次，共28D；CVMC對(duì)照組及正常對(duì)照組同予等體積生理鹽水灌胃。70D時(shí)將所有小鼠使用無創(chuàng)血壓測(cè)量?jī)x測(cè)定心率、收縮壓、舒張壓。稱重后摘眼球取血，ELISA法檢測(cè)其血清AMA的表達(dá)。摘取小鼠心臟及脾臟，脾臟中提取TREG和TH17淋巴細(xì)胞，采用流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)。心臟沿左室長(zhǎng)軸分為兩部分，一半置入10％中性甲醛固定后行HE、MASSON染色，另一半采用REALTIMEPCR技術(shù)，檢測(cè)TREG及TH17在小鼠心臟中MRNA的表達(dá)。采用SPSS170軟件進(jìn)行處理，數(shù)據(jù)均用Χ±S表示，多組均數(shù)間比較采用單因素方差分析方法；兩組均數(shù)間比較采用LSD檢驗(yàn)方法；P結(jié)果各組小鼠血壓水平無顯著性差異P005。慢性VMC組小鼠心臟質(zhì)量體質(zhì)量比HWBW大于纈沙坦干預(yù)組和對(duì)照組P結(jié)論病毒性心肌炎小鼠外周血中存在TH17TREG失衡，且與心肌病變有相關(guān)性，纈沙坦可通過調(diào)節(jié)TH17TREG平衡，減輕慢性VMC自身免疫損傷，避免向擴(kuò)張型心肌病進(jìn)展。

簡(jiǎn)介：目的1、檢測(cè)狼瘡性胸膜肺損害患者及SLE無胸膜肺損害患者EB病毒（EBV）、人巨細(xì)胞病毒HCMV抗體及DNA，以明確狼瘡性胸膜肺損害患者EBV及HCMV感染情況；2、分析17例狼瘡性急性彌漫滲出性肺病變患者EBV及HCMV感染情況，評(píng)價(jià)聯(lián)合抗病毒治療急性彌漫滲出性肺病變的臨床療效。方法本研究分為兩部分。研究病毒感染與狼瘡性胸膜肺損害相關(guān)性時(shí)，將SLE患者分為胸膜肺損害組及無胸膜肺損害組；研究狼瘡性急性彌漫滲出性肺病變患者的轉(zhuǎn)歸時(shí)，分為抗病毒治療組及未抗病毒治療組。應(yīng)用ELISA法檢測(cè)97例狼瘡性胸膜肺損害患者及106例SLE無胸膜肺損害患者血清EB病毒（EBV）IGA、IGM、IGG抗體，間接化學(xué)發(fā)光免疫檢測(cè)法（CLIA）測(cè)97例狼瘡性胸膜肺損害患者及106例SLE無胸膜肺損害患者血清人巨細(xì)胞病毒HCMV特異性IGM、IGG抗體；另實(shí)時(shí)熒光定量PCR法檢測(cè)71例狼瘡性胸膜肺損害患者及70例SLE無胸膜肺損害患者外周血淋巴細(xì)胞EB病毒及人巨細(xì)胞病毒DNA復(fù)制情況。結(jié)果1、胸膜肺損害組血清HCMVIGM抗體陽性率為206％，顯著高于無胸膜肺損害組（106），C2411，P0043。2、PCR測(cè)胸膜肺損害組外周血淋巴細(xì)胞EBVDNA為535、顯著高于無胸膜肺損害組（357），C2452，P0033。3、近期EBV或HCMV感染的狼瘡性胸膜肺損害患者，其皮膚損害率顯著升高（C241，P0043）；補(bǔ)體C4顯著降低（T276，P0007）；血沉顯著升高（T299，P0004）；CRP升高例數(shù)顯著增多（C2537，P0002）；SLEDAI評(píng)分顯著升高（T424，P4、胸膜肺損害組17例急性彌漫性滲出性肺病變患者HCMVDNA陽性率顯著高于其他胸膜肺損害患者（417VS68，C2C853，P0004）。5、至觀察終點(diǎn)，17例SLE急性彌漫滲出性肺病變患者中，抗病毒治療組818（911）病情好轉(zhuǎn)其中5例滲出基本吸收，4例肺部影像學(xué)表現(xiàn)呈慢性間質(zhì)性改變，182（211）死亡；未抗病毒治療組僅333（26）病情好轉(zhuǎn)，肺部影像學(xué)表現(xiàn)均呈慢性間質(zhì)性改變。結(jié)論1、EB病毒、人巨細(xì)胞病毒感染與狼瘡性胸膜肺損害發(fā)生相關(guān)其中人巨細(xì)胞病毒感染與狼瘡性急性急性彌漫滲出性肺病變關(guān)系密切。2、初步認(rèn)為抗病毒治療對(duì)狼瘡性急性彌漫滲出性肺病變有效。

簡(jiǎn)介：山西大學(xué)2009屆碩士學(xué)位論文語言、認(rèn)知與知識(shí)的生成一一喬姆斯基認(rèn)知思想研究作者姓名指導(dǎo)教師學(xué)科專業(yè)研究方向培養(yǎng)單位堵喬旱伍學(xué)習(xí)年限王艷菊魏屹東教授外國(guó)哲學(xué)認(rèn)知哲學(xué)哲學(xué)社會(huì)學(xué)院2006年9月_2009年6月二OO九年六月目錄IIIIIIIIIIIIIIIIIIIIIIIY2682741引言1一喬姆斯基的認(rèn)知思想來源311語言是受規(guī)則支配的體系312語言是社會(huì)的產(chǎn)物4121柏拉圖的語言思想4122以社會(huì)為參照點(diǎn)闡述語言5二喬姆斯基的內(nèi)在論821對(duì)外在主義者普特南的批判822語言習(xí)得機(jī)制9221LAD理論1O222語言的深層結(jié)構(gòu)和表層結(jié)構(gòu)10223語言內(nèi)在論1123語言知識(shí)的先天性13231認(rèn)識(shí)論的一個(gè)重要問題14232先天性與唯理論的關(guān)系14233西方唯理哲學(xué)中辨證法的繼承17三喬姆斯基的自然主義語言觀L931自然主義語言觀19311對(duì)二元論的批判19312“統(tǒng)一”與“簡(jiǎn)化”21313身一心問題的處理2232形而上學(xué)自然主義和認(rèn)知自然主義23321丹尼特的觀點(diǎn)23322奎因的自然化認(rèn)識(shí)論24四喬姆斯基的語言認(rèn)知方法2641自然科學(xué)研究方法26411語言學(xué)的學(xué)科性質(zhì)26412語言學(xué)的自然科學(xué)研究方法2742語言研究的其他方法29

簡(jiǎn)介：軸型復(fù)合組織瓣是整形外科醫(yī)生的常用工具，在難愈性創(chuàng)面及體表腫瘤切除后的修復(fù)重建過程中發(fā)揮重要作用。通過對(duì)復(fù)合組織瓣進(jìn)行基因修飾等手段從而達(dá)到基因治療的目的，是目前整形外科的研究熱點(diǎn)之一。有穩(wěn)定血管供應(yīng)的軸型復(fù)合組織瓣是良好靶組織，其微血管床是基因經(jīng)動(dòng)脈灌注轉(zhuǎn)染的理想模型。動(dòng)脈內(nèi)灌注目的基因高效轉(zhuǎn)染修飾局部組織，使其表達(dá)治療蛋白，在移植醫(yī)學(xué)及介入醫(yī)學(xué)領(lǐng)域已有報(bào)道，但在整形外科領(lǐng)域研究剛剛起步，相關(guān)文獻(xiàn)報(bào)道較少。本課題在研究改良大鼠帶蒂腹壁淺動(dòng)脈皮瓣SUPERFICIALINFERIEPIGASTRICARTERYFLAP，SIEAFLAP模型的基礎(chǔ)上，深入探討腺病毒載體介導(dǎo)外源基因AD5EGFP經(jīng)動(dòng)脈介入灌注轉(zhuǎn)染復(fù)合組織瓣的可行性、安全性并對(duì)其轉(zhuǎn)染條件作出評(píng)價(jià)。本課題由以下四個(gè)部分組成1、大鼠帶蒂SIEA皮瓣經(jīng)動(dòng)脈灌注模型的制備。采用乳膠血管鑄型和墨汁灌注方法對(duì)大鼠SIEA皮瓣血供系統(tǒng)進(jìn)行研究。并在此基礎(chǔ)上設(shè)計(jì)手術(shù)操作步驟，形成大鼠帶蒂SIEA皮瓣的暫時(shí)與體循環(huán)分離的封閉回路，經(jīng)SIEA灌注PBS觀察對(duì)實(shí)驗(yàn)大鼠及皮瓣存活的影響。結(jié)果顯示，應(yīng)用微血管夾分步夾閉股動(dòng)脈、肌支及腘動(dòng)脈，在隱動(dòng)、靜脈插管與注射泵相連，可形成由腹壁淺動(dòng)、靜脈和帶蒂SIEA皮瓣微血管網(wǎng)共同構(gòu)成的灌注封閉回路。設(shè)計(jì)微血管夾的夾閉步驟，使皮瓣缺血時(shí)間控制在5～10MIN以內(nèi)，即對(duì)隱動(dòng)、靜脈的插管固定時(shí)間。經(jīng)此操作灌注PBS術(shù)后SIEA皮瓣愈合正常，光鏡下檢測(cè)中性粒細(xì)胞計(jì)數(shù)與對(duì)照組相比無顯著差異P005。2、AD5EGFP擴(kuò)增純化及對(duì)大鼠微血管內(nèi)皮細(xì)胞轉(zhuǎn)染效率的影響。應(yīng)用293細(xì)胞體外擴(kuò)增、純化得到滴度為9109PFUMLAD5EGFP，應(yīng)用于后續(xù)細(xì)胞及動(dòng)物實(shí)驗(yàn)。以MOI25、50、100、200、400、800轉(zhuǎn)染MVECS，轉(zhuǎn)染后1、3、7、14、21D應(yīng)用熒光顯微鏡、流式細(xì)胞儀觀察檢測(cè)表達(dá)EGFP細(xì)胞陽性率。MTT法檢測(cè)轉(zhuǎn)染對(duì)MVECS增殖的影響，觀察安全MOI值范圍，并在此MOI值條件下調(diào)整AD5EGFP轉(zhuǎn)染MVECS的時(shí)間30MIN、60MIN、90MIN、120MIN，應(yīng)用流式細(xì)胞儀檢測(cè)轉(zhuǎn)染效率。結(jié)果顯示，AD5EGFP轉(zhuǎn)染MVECS后7D可見EGFP高表達(dá)，可延續(xù)到14D。在MOI≦400，AD5EGFP對(duì)MVECS轉(zhuǎn)染效率與MOI值呈正相關(guān)，且對(duì)轉(zhuǎn)染MVECS增殖無明顯影響，在此條件下AD5EGFP轉(zhuǎn)染MVECS60MIN即可達(dá)到785±19％轉(zhuǎn)染效率。3、腺病毒介導(dǎo)EGFP經(jīng)動(dòng)脈灌注轉(zhuǎn)染大鼠帶蒂SIEA皮瓣的研究。實(shí)驗(yàn)大鼠依據(jù)不同灌注液AD5EGFP30106、30107、30108、30109PFUML、PBS、腺病毒空載體AD5NULL，隨機(jī)分為6組。通過微血管夾暫時(shí)夾閉股動(dòng)脈、肌支及胭動(dòng)脈，在隱動(dòng)、靜脈插管與注射泵相連，形成大鼠帶蒂SIEA皮瓣局部封閉回路，經(jīng)動(dòng)脈灌注轉(zhuǎn)染大鼠帶蒂SIEA60MIN。術(shù)后7天應(yīng)用活體成像系統(tǒng)觀察皮瓣的EGFP熒光強(qiáng)度，應(yīng)用共聚焦顯微鏡、RTPCR檢測(cè)皮瓣組織中EGFP的表達(dá)和分布情況，通過組織學(xué)分析對(duì)皮瓣的安全性影響。結(jié)果顯示術(shù)后7天301079PFUML組活體觀察皮瓣可見體表綠色熒光信號(hào)。共聚焦顯微鏡觀察結(jié)果與活體觀察結(jié)果一致，其中30109PFUMLEGFP在皮瓣內(nèi)血管內(nèi)、外膜均可見表達(dá)，血管周圍組織包括脂肪、毛囊可見EGFP表達(dá)。PBS組、AD5NULL組未見EGFP表達(dá)。逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)RTPCR檢測(cè)顯示EGFPMRNA與AD5EGFP滴度值301079PFUML呈劑量依賴關(guān)系。對(duì)皮瓣組織學(xué)觀察未見明顯特異性炎癥反應(yīng)。4、不同轉(zhuǎn)染方式對(duì)大鼠SIEA皮瓣外源基因轉(zhuǎn)染及表達(dá)差異的研究。分別經(jīng)尾靜脈注射，經(jīng)動(dòng)脈灌注和皮瓣局部注射05ML30109PFUMLAD5EGFP，術(shù)后1、3、7、14、21D活體成像系統(tǒng)檢測(cè)SIEA皮瓣EGFP表達(dá)的分布。另取三組同樣方法處理的大鼠，于術(shù)后7D取材用于從組織形態(tài)學(xué)及分子生物學(xué)兩方面評(píng)價(jià)不同轉(zhuǎn)染方法對(duì)皮瓣局部EGFP表達(dá)的影響及不同轉(zhuǎn)染方法對(duì)全身重要臟器的影響。結(jié)果顯示，AD5EGFP在30109PFUML滴度條件下，經(jīng)動(dòng)脈灌注可以有效轉(zhuǎn)染大鼠帶蒂SIEA皮瓣，且對(duì)于大鼠重要臟器無明顯影響。經(jīng)尾靜脈注射不能夠有效轉(zhuǎn)染皮瓣，且在大鼠肝臟中可見EGFP表達(dá)。皮瓣局部注射可以有效轉(zhuǎn)染大鼠SIEA皮瓣，但與經(jīng)動(dòng)脈灌注轉(zhuǎn)染相比，目的蛋白表達(dá)分布欠均勻。活體成像系統(tǒng)可以直觀檢測(cè)大鼠帶蒂SIEA皮瓣EGFP表達(dá)的強(qiáng)度及陽性表達(dá)區(qū)域的分布。綜上所述，本實(shí)驗(yàn)建立了操作簡(jiǎn)便、穩(wěn)定的大鼠帶蒂SIEA皮瓣經(jīng)動(dòng)脈灌注研究模型。腺病毒載體可以將外源基因EGFP經(jīng)動(dòng)脈灌注轉(zhuǎn)染大鼠帶蒂SIEA皮瓣的微血管床，使大鼠帶蒂SIEA皮瓣作為目的基因表達(dá)載體并最終產(chǎn)生目的蛋白。與局部注射和全身轉(zhuǎn)染的方法相比，經(jīng)動(dòng)脈灌注基因修飾復(fù)合組織瓣的方法局部靶向性更強(qiáng)并且對(duì)全身無明顯毒副作用。實(shí)驗(yàn)中采用活體成像技術(shù)直接觀察術(shù)后皮瓣EGFP表達(dá)情況，使目的蛋白的檢測(cè)更加直觀，為進(jìn)一步深入研究經(jīng)動(dòng)脈灌注基因修飾復(fù)合組織瓣，使其發(fā)揮治療性修復(fù)創(chuàng)面作用提供理論依據(jù)。

簡(jiǎn)介：目的2型糖尿病TYPE2DIABETESMELLITUST2DM作為一種代謝性疾病可以引起全身多種組織器官的結(jié)構(gòu)和功能改變。近年來T2DM對(duì)中樞神經(jīng)系統(tǒng)的影響逐漸引起人們的關(guān)注相關(guān)研究也越來越多。T2DM引起認(rèn)知功能障礙的機(jī)制尚不十分明確目前認(rèn)為氧化應(yīng)激與炎癥反應(yīng)在其中起了重要作用。維生素C是水溶性維生素具有較強(qiáng)的抗氧化與抗炎作用。本研究將觀察維生素C對(duì)老年T2DM患者認(rèn)知功能的影響為其治療提供方向。方法將符合WHO診斷標(biāo)準(zhǔn)、年齡＞65歲、病史＞5年、HBA1C7％10％、具有輕度認(rèn)知功能障礙的T2DM患者隨機(jī)分為對(duì)照組30例和實(shí)驗(yàn)組30例。對(duì)照組給予常規(guī)治療包括調(diào)整飲食、適當(dāng)運(yùn)動(dòng)、合理選擇雙胍類和或磺脲類降糖藥實(shí)驗(yàn)組在常規(guī)治療基礎(chǔ)上加用維生素C023日療程1年。調(diào)整治療方案使兩組血糖水平控制于FBG＜10MMOLLPBG＜12MMOLL以內(nèi)。治療前后分別行MMSE量表檢測(cè)、蒙特利爾認(rèn)知功能檢測(cè)并量化打分。所得數(shù)據(jù)采用SPSS115統(tǒng)計(jì)軟件處理計(jì)量資料組間比較采用兩獨(dú)立樣本T檢驗(yàn)計(jì)數(shù)資料組間比較采用卡方檢驗(yàn)以P＜005為差異有顯著性。結(jié)果1治療前后實(shí)驗(yàn)組與對(duì)照組之間MMSE及MOCA比較治療前兩組患者無顯著性差異P＞005治療后實(shí)驗(yàn)組明顯高于對(duì)照組P＜001。2實(shí)驗(yàn)組與對(duì)照組MMSE及MOCA治療前后自身比較對(duì)照組治療前后無顯著差異P＞005實(shí)驗(yàn)組治療后顯著高于治療前P＜001。結(jié)論維生素C作為一種抗氧化劑能明顯改善老年T2DM患者的認(rèn)知功能障礙。

簡(jiǎn)介：點(diǎn)擊查看更多人支氣管上皮細(xì)胞在呼吸道合胞病毒感染后CFTR功能及上皮修復(fù)功能研究.pdf精彩內(nèi)容。

簡(jiǎn)介：目的構(gòu)建并擴(kuò)增攜帶紅色熒光蛋白的抗菌肽PR39的重組腺病毒載體ADPR39及攜帶綠色熒光蛋白的骨形態(tài)發(fā)生蛋白9BMP9的重組腺病毒載體ADBMP9，ADPR39與ADBMP9共轉(zhuǎn)染間充質(zhì)干細(xì)胞C3H10T12，檢測(cè)PR39及BMP9在C3H10T12細(xì)胞中的表達(dá)及生物活性。方法PCR擴(kuò)增PR39片段，亞克隆至PADTRACKTO4質(zhì)粒，構(gòu)建重組穿梭質(zhì)粒PADTRACKTO4PR39，經(jīng)雙酶切及測(cè)序鑒定。PADTRACKTO4PR39經(jīng)PMEⅠ酶切，轉(zhuǎn)化感受態(tài)ADEASIER細(xì)胞，構(gòu)建重組腺病毒質(zhì)粒PADPR39。PADPR39經(jīng)PACⅠ酶切后轉(zhuǎn)染至HEK293獲得重組腺病毒ADPR39并進(jìn)行擴(kuò)增。擴(kuò)增重組腺病毒ADBMP9。將重組腺病毒ADPR39及ADBMP9感染間充質(zhì)干細(xì)胞C3H10T12，通過熒光顯微鏡觀察、RTPCR及WESTERNBLOT鑒定目的蛋白的表達(dá)，同時(shí)檢測(cè)PR39的抗菌活性。結(jié)果PADTRACKTO4PR39及PADPR39構(gòu)建成功ADPR39包裝成功，ADPR39及ADBMP9成功擴(kuò)增。ADPR39及ADBMP9成功感染C3H10T12細(xì)胞，且表達(dá)了PR39及BMP9蛋白。轉(zhuǎn)染含PR39的細(xì)胞的上清液能有效抑制金黃色葡萄球菌的生長(zhǎng)，計(jì)算其抑菌率為961％。結(jié)論成功構(gòu)建攜帶紅色熒光蛋白的PR39重組腺病毒載體。通過重組腺病毒載體介導(dǎo)的PR39及BMP9基因能在C3H10T12細(xì)胞中高效表達(dá)，同時(shí)在C3H10T12細(xì)胞中表達(dá)的PR39具有較強(qiáng)的抗菌活性。

簡(jiǎn)介：分類號(hào)學(xué)號(hào)M201275991學(xué)校代碼10487密級(jí)碩士學(xué)位論文碩士學(xué)位論文1常溫大氣壓等離子體在VERO細(xì)胞中對(duì)HSVI病毒的滅活作用研究2典型病例報(bào)告學(xué)位申請(qǐng)人周素云學(xué)科專業(yè)口腔臨床醫(yī)學(xué)指導(dǎo)教師曹穎光教授答辯日期2015年5月獨(dú)創(chuàng)性聲明獨(dú)創(chuàng)性聲明本人聲明，這里呈交的學(xué)位論文是我個(gè)人在導(dǎo)師的指導(dǎo)下進(jìn)行的研究工作及取得的研究成果。除文中已標(biāo)明引用的內(nèi)容外，本論文不包含任何其他個(gè)人或集體已經(jīng)發(fā)表或撰寫過的研究成果。對(duì)本文的研究做出貢獻(xiàn)的個(gè)人和集體，均已在文中以明確方式標(biāo)明。本人完全意識(shí)到本聲明的法律效用，一切后果由本人承擔(dān)。學(xué)位論文作者簽名日期年月日學(xué)位論文版權(quán)使用授權(quán)書學(xué)位論文版權(quán)使用授權(quán)書本學(xué)位論文作者完全了解學(xué)校有關(guān)保留、使用學(xué)位論文的規(guī)定，即學(xué)校有權(quán)保留并向國(guó)家有關(guān)部門或機(jī)構(gòu)送交論文的復(fù)印件和電子版，允許論文被查閱和借閱。本人授權(quán)華中科技大學(xué)可以將本學(xué)位論文的全部或部分內(nèi)容編入有關(guān)數(shù)據(jù)庫進(jìn)行檢索，可以采用影印、縮印或掃描等復(fù)制手段保存和匯編本學(xué)位論文。保密□，在_____年解密后適用本授權(quán)書。本論文屬于不保密□。（請(qǐng)?jiān)谝陨戏娇騼?nèi)打“√”）學(xué)位論文作者簽名指導(dǎo)教師簽名日期年月日日期年月日