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1、該研究應(yīng)用RAPD標記,選用10個隨機引物對36份雜交水稻親本材料進行了多態(tài)性分析,共檢測到106條帶,81條多態(tài)性帶.聚類分析結(jié)果表明,所有供試材料可以被明確的區(qū)分.為了得到一個穩(wěn)定的RAPD反應(yīng)體系,首先對影響反應(yīng)體系穩(wěn)定性的因子進行了優(yōu)化,優(yōu)化結(jié)果為:DNA模板用量10~60ng;Mg<'2+>濃度2.0mmol/L;dNTPs濃度1.5~2.0mmol/L;引物濃度1.2~2.0 μ mol/L;Taq聚合酶用量0.8~1.2U
2、.然后對40條引物進行篩選,結(jié)果得到10條具有重復(fù)性好、條帶清晰、多態(tài)性高的引物,即S227、S228、S229、S290、S358、S400、S490、S1405、S1422、S1492.用NTSYS-pc(versi on 2.1)軟件包中的Nei&Li法的計算方法計算36個親本材料的遺傳相似系數(shù),用UPGMA法聚類分析,用NJTREE程序構(gòu)建親本間的樹狀聚類圖.36個親本材料的遺傳相似系數(shù)和樹狀聚類圖結(jié)果表明,所有的供試材料,它們
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