一種T細胞免疫原的設(shè)計及表達產(chǎn)物對口蹄疫疫苗的免疫增強作用.pdf

1、口蹄疫(Foot-and-Mouth Disease,FMD)是由口蹄疫病毒(FMDV)引起的一種急性、熱性、高度接觸傳染性的動物疫病,主要感染豬、牛、羊等偶蹄動物,被國際動物衛(wèi)生組織(OIE)列為必須通報的烈性傳染病。FMDV是小RNA病毒科(Picornaviridae)口蹄疫病毒屬(Aphthovirus)的成員,有七個血清型,分別為O、A、C、Asia1、SAT1、SAT2、SAT3,每個血清型又可產(chǎn)生很多基因亞型,血清型之間無

2、交叉免疫保護作用。由于FMDV型多易變,免疫原性弱,造成疫苗的免疫持續(xù)期短,免疫保護效果差。因此,研制高效持久的疫苗成為FMD防制技術(shù)研究的一個重要內(nèi)容。
　　 高水平中和抗體的產(chǎn)生需要有T細胞與B細胞的共同參與與協(xié)同作用,T細胞表位在抗原呈遞細胞內(nèi)與MHC分子結(jié)合并表達在細胞表面供T細胞識別結(jié)合,結(jié)合了抗原肽-MHC分子復(fù)合物的T細胞向B細胞提供協(xié)同刺激信號,活化并輔助B細胞分化為漿細胞,最終產(chǎn)生大量特異性中和抗體,因此,細胞

3、免疫對于產(chǎn)生保護性免疫作用重大?；谝陨险J識,我們設(shè)計并原核表達一種T細胞免疫原,試圖利用該T細胞免疫原為佐劑,提高現(xiàn)有滅活疫苗的免疫效果,使得現(xiàn)有滅活疫苗的免疫保護效果有一個明顯的提高,也為蛋白亞單位疫苗的研制奠定基礎(chǔ)。
　　 所設(shè)計的T細胞免疫原包含F(xiàn)MDV VP1,VP4,3A和3D蛋白上多個T細胞表位與兩個通用T細胞表位的T細胞免疫原,命名為TI；同時表達了O和Asia1 FMDV兩個型VP1蛋白的串聯(lián)編碼基因,表達產(chǎn)物

4、命名為OA-VP1。將上述T細胞免疫原分別與OA-VP1和口蹄疫滅活疫苗按不同劑量組合免疫小鼠,于免疫后不同時間測定各組小鼠的體液與細胞免疫應(yīng)答情況。采用微量中和試驗檢測小鼠O型和Asia1型中和抗體,采用流式細胞檢測技術(shù)和測定γ-干擾素的水平來分析不同免疫組小鼠細胞免疫的水平。結(jié)果顯示,與滅活疫苗或OA-VP1單獨免疫組相比,添加TI抗原后滅活疫苗(P<0.01)和OA-VP1免疫組(P<0.05)小鼠均能產(chǎn)生高水平的特異性中和抗體；