補(bǔ)腎促排卵系列方對(duì) ASR 模型排卵功能及IGF-Ⅰ、MMP-9影響的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、　　目的：本課題立足中醫(yī)基礎(chǔ)理論,結(jié)合現(xiàn)代醫(yī)學(xué)研究,旨在通過(guò)實(shí)驗(yàn)研究,探討補(bǔ)腎促排卵系列方對(duì)雄激素致不孕大鼠( ASR)促排卵的可能機(jī)制,闡明其促卵泡發(fā)育和排卵的干預(yù)環(huán)節(jié),從而為排卵障礙性不孕癥的治療提供更為開(kāi)闊的科研思路和臨床治療依據(jù)。
　　方法：本實(shí)驗(yàn)選用SD雌性幼鼠,于出生第9日齡注射丙酸睪丸酮制作雄激素致不孕大鼠模型。將實(shí)驗(yàn)動(dòng)物隨機(jī)分為7組,即序貫高劑量組、序貫低劑量組、補(bǔ)腎填精方高劑量組、補(bǔ)腎填精方低劑量組、枸櫞酸氯米

2、芬組、空白對(duì)照組及模型對(duì)照組。同種飼養(yǎng)條件下,分籠喂養(yǎng), 每日定時(shí)灌胃給藥1次。序貫高、低劑量組給藥劑量分別為補(bǔ)腎填精方29g/kg(以生藥量計(jì))、14.5g/kg,補(bǔ)腎活血方24g/kg、12g/kg,每方連續(xù)灌胃3天,交替進(jìn)行, 6天為一個(gè)周期。補(bǔ)腎填精方高、低劑量組給藥劑量分別為29g/kg、14.5g/kg。分別相當(dāng)于臨床劑量的6.7倍、3.35倍。枸櫞酸氯米芬組給藥劑量為5.58mg/kg,相當(dāng)于臨床劑量的6.7倍。各組用藥體

3、積均為18ml/kg ?？瞻讓?duì)照組、模型對(duì)照組給予等量去離子水。均連續(xù)給藥30天。給藥30天后,經(jīng)陰道細(xì)胞涂片觀察并挑選處于動(dòng)情期的大鼠,進(jìn)行指標(biāo)測(cè)定。酶免法檢測(cè)大鼠血清胰島素樣生長(zhǎng)因子-I ( IGF-I)的含量；取大鼠子宮、卵巢稱(chēng)重,并換算為臟器指數(shù)；并用免疫組化法觀察卵巢上基質(zhì)金屬蛋白酶-9( MMP-9)的表達(dá)情況。
　　結(jié)果：( 1)模型對(duì)照組的大鼠體重顯著高于空白對(duì)照組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)。模型對(duì)照組的

4、大鼠子宮指數(shù)、卵巢指數(shù)顯著低于空白對(duì)照組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)。序貫高劑量組的大鼠體重與與模型對(duì)照組相比,差別有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義( P<0.05)。補(bǔ)腎填精方高劑量組及枸櫞酸氯米芬組的大鼠體重與模型對(duì)照組相比,差別均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義( P<0.01)。序貫高劑量組、補(bǔ)腎填精方高劑量組及枸櫞酸氯米芬組均能增加大鼠子宮、卵巢指數(shù),與模型對(duì)照組相比,差別均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義( P<0.01)。( 2)模型對(duì)照組的大鼠血清 IGF-I水平高于空白對(duì)

5、照組,與空白對(duì)照組比較, 差別無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)；序貫高、低劑量組,補(bǔ)腎填精方高、低劑量組及枸櫞酸氯米芬組的大鼠血清 IGF-I水平與模型對(duì)照組相比,血清 IGF-I 水平均有降低趨勢(shì),但差別均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。( 3)模型對(duì)照組的大鼠卵巢局部 MMP-9的表達(dá)面積和表達(dá)強(qiáng)度均明顯低于空白對(duì)照組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)。序貫高、低劑量組,補(bǔ)腎填精方高劑量組及枸櫞酸氯米芬組的大鼠卵巢局部 MMP-9 的表達(dá)

6、面積均高于模型對(duì)照組,與模型對(duì)照組相比差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)。序貫高劑量組、補(bǔ)腎填精方高劑量組及枸櫞酸氯米芬組的大鼠卵巢局部 MMP-9 的表達(dá)強(qiáng)度均高于模型對(duì)照組,與模型對(duì)照組相比差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)。序貫高劑量組的大鼠卵巢局部 MMP-9無(wú)論表達(dá)面積、表達(dá)強(qiáng)度均顯著優(yōu)于單用補(bǔ)腎填精方治療組,其差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。
　　結(jié)論：中藥補(bǔ)腎促排卵系列方通過(guò)降低 ASR 大鼠體重,促進(jìn)子宮、卵