嗅神經(jīng)鞘細胞和硝普鈉對脊髓源性神經(jīng)干細胞的增殖、分化及生長的作用.pdf

1、近年來,脊髓損傷(spinal cord injure,SCI)的再生修復(fù)研究取得了很大的進展.細胞移植被認為是最有前景的方法之一.細胞移植治療SCI焦點主要集中移植后細胞的定向分化和分化后細胞的軸突如何穿過SCI后修復(fù)所生成瘢痕.神經(jīng)干細胞(neural stem cells,NSCs)和嗅神經(jīng)鞘細胞(olfactory ensheathing cells,OECs)的移植最有希望解決上述問題.NSCs定向誘導(dǎo)為神經(jīng)細胞,移植到損傷部

2、位,可以提供所需的種子細胞.OECs可以分泌多種細胞因子,促進神經(jīng)元的存活及軸突的生成,還可以形成細胞索支架引導(dǎo)軸突穿過瘢痕,與靶細胞形成新的突觸,從而重新建立損傷部位細胞間的聯(lián)系,為恢復(fù)功能重建提供基礎(chǔ).該實驗?zāi)康闹荚诙ㄏ蛘T導(dǎo)NSCs向神經(jīng)元分化,研究OECs作為NSCs的"伴侶細胞",對NSCs存活、分化的作用,為進一步的細胞移植提供實驗基礎(chǔ).一、硝普鈉對脊髓源性神經(jīng)干細胞增殖抑制及誘導(dǎo)分化作用實驗從孕14d胎鼠的脊髓中培養(yǎng)出原代脊

3、髓源性的NSCs,在無血清的基礎(chǔ)培養(yǎng)液中培養(yǎng)純化3-5代鑒定后,加入終濃度為60μ mol/L,80 u mol/L,100μ mol/L的硝普鈉(sodium nitroprusside,SNP)溶液,培養(yǎng)48h,觀察神經(jīng)NSCs的數(shù)量、形態(tài)變化.二、大鼠嗅神經(jīng)鞘細胞支持小鼠脊髓源性神經(jīng)干細胞的生長并誘導(dǎo)其分化采用原代培養(yǎng)方法從Sprague-Dawley大鼠嗅球分離培養(yǎng)OECs,接種于包被好的24孔板的12孔內(nèi),7d后,加入經(jīng)純化的