五株內(nèi)生真菌的化學(xué)成分及其生物活性研究.pdf_第1頁(yè)
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1、真菌具有豐富的物種和生態(tài)多樣性,能產(chǎn)生結(jié)構(gòu)和活性多樣的次生代謝產(chǎn)物,是藥物先導(dǎo)化合物的重要來(lái)源之一。但是從常規(guī)真菌資源中發(fā)現(xiàn)具備開(kāi)發(fā)潛力的活性新物質(zhì)面臨著巨大的挑戰(zhàn),而那些生長(zhǎng)在自然環(huán)境惡劣、營(yíng)養(yǎng)條件匱乏地區(qū)的特殊生境真菌,為了生存,會(huì)逐步形成不同于普通土壤真菌的獨(dú)特生存策略,進(jìn)而代謝結(jié)構(gòu)新穎多樣且活性廣泛的化學(xué)成分。內(nèi)生真菌是指在寄主中度過(guò)全部或近乎全部的生活周期而不使寄主表現(xiàn)任何癥狀的一類(lèi)真菌,它們與寄主長(zhǎng)期協(xié)同進(jìn)化演變成一種特殊的

2、互惠共生關(guān)系,具有獨(dú)特的生存環(huán)境與生存方式。內(nèi)生真菌作為可持續(xù)的、活性多樣的和結(jié)構(gòu)新穎的先導(dǎo)化合物的重要來(lái)源受到人們的廣泛關(guān)注。而對(duì)于以一些特殊群體(如苔蘚和地衣)為宿主的內(nèi)生真菌的代謝產(chǎn)物研究則具有更大的開(kāi)發(fā)潛力。
  本研究選取來(lái)源于不同生存環(huán)境下的苔蘚和地農(nóng)內(nèi)生真菌為研究材料,采用PDA(Potato Dextrose Agar)培養(yǎng)基進(jìn)行小規(guī)模發(fā)酵并制備其代謝產(chǎn)物的粗提物,依據(jù)初步的活性與化學(xué)篩選結(jié)果選擇了五株內(nèi)生真菌(包

3、括一株苔蘚內(nèi)生真菌和四株地衣內(nèi)生真菌)進(jìn)行一定規(guī)模的放大發(fā)酵。采用硅膠柱色譜、ODS柱色譜、凝膠柱色譜以及高效液相柱色譜等多種分離純化技術(shù)對(duì)各菌株的乙酸乙酯提取物分別進(jìn)行系統(tǒng)的分離純化。從五株真菌的放大發(fā)酵產(chǎn)物中共分離得到83個(gè)化合物,其中28個(gè)為新化合物,應(yīng)用各種現(xiàn)代波譜技術(shù)(如質(zhì)譜、核磁共振、單晶衍射等),結(jié)合化學(xué)衍生化和圓二色譜等方法確定了化合物的平面結(jié)構(gòu)和立體構(gòu)型,并根據(jù)結(jié)構(gòu)特征推測(cè)了部分重要化合物的可能生物合成途徑與相互轉(zhuǎn)化關(guān)

4、系。對(duì)分離得到的化合物進(jìn)行抗真菌和細(xì)胞毒活性評(píng)價(jià),結(jié)果顯示部分代謝產(chǎn)物具有顯著的活性。對(duì)化合物進(jìn)一步的活性機(jī)制研究表明,化合物37可以通過(guò)損傷白色念珠菌的細(xì)胞膜,引起細(xì)胞內(nèi)活性氧(ROS)積累導(dǎo)致細(xì)胞死亡;化合物58則可以明顯誘導(dǎo)細(xì)胞周期阻滯在G0/G1期并誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞凋亡。另外,我們對(duì)苝醌類(lèi)化合物(化合物77和78)以及產(chǎn)生該類(lèi)化合物的菌株P(guān)haeosphaeria sp.的粗提物分別進(jìn)行可見(jiàn)光和紫外光下的光化反應(yīng),該反應(yīng)導(dǎo)致其抗真菌

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