VEGF、Ang-1-Ang-2及涼血化瘀中藥誘導脈絡膜新生血管成熟的實驗研究.pdf

1、目的:通過體內外實驗探討VEGF、Ang-1/Ang-2及活血化瘀中藥誘導CNV分化成熟的作用機制。
　　方法:在體外培養(yǎng)的RUVECs內加入VEGF、Ang-1及Ang-2因子后,通過倒置相差顯微鏡和MTT比色法觀察細胞形態(tài)和增殖能力的變化,通過掃描電鏡和透射電鏡分別觀察細胞表面結構、內部結構及細胞間連接的改變,探討VEGF、Ang-1/Ang-2誘導CNV分化成熟的作用機制:體內實驗通過激光光凝建立大鼠CNV模型,分別采用玻璃

2、體腔注射Ang-1和涼血化瘀中藥灌胃的方法來觀察對大鼠CNV的影響,研究它們對CNV的作用效果及機制。
　　結果:倒置相差顯微鏡下見:VEGF、VEGF+Ang-1、VEGF+Ang-2、VEGF+Ang-1+Ang-2組均能促進細胞增殖,與空白對照組在形態(tài)學上無明顯差別。MTT實驗結果表明:單純加入VEGF在一定范圍內能促進細胞增殖(濃度＜50ng/ml);但單獨的Ang-1或Ang-2卻不具備促增殖能力,即使是高濃度的(＞10

3、0ng/ml);當VEGF聯合Ang-1或Ang-2,都能起到有效促進內皮細胞增殖的作用。透射電鏡和掃描電鏡見:單獨的VEGF作用使細胞表面微絨毛增多,細胞器如線粒體、高爾基復合體等增大、增多,細胞功能活動旺盛;細胞間連接相對較少。聯合Ang-1見細胞器相對減少,表面微絨毛較多,細胞間連接相對單獨VEGF多。動物實驗發(fā)現通過半導體激光很好地建立了大鼠CNV模型,玻璃體腔注射Ang-1與涼血化瘀中藥灌胃均能減少大鼠CNV的滲漏,兩者作用效