毒蕈堿受體在人角膜緣和角膜、結(jié)膜表達(dá)的研究.pdf_第1頁(yè)
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1、目的:研究人角膜緣和角膜、結(jié)膜是否表達(dá)毒蕈堿受體1-5亞型(m1-5).材料與方法:從人角膜緣組織分離上皮細(xì)胞并培養(yǎng)至第1-2代.RT-PCR分析培養(yǎng)人角膜緣上皮細(xì)胞中角蛋白3、12 mRNA的表達(dá).免疫熒光染色研究增殖細(xì)胞核抗原(PCNA)、p63和角膜上皮分化標(biāo)志-角蛋白3、12(K3、K12)、外皮蛋白、連接蛋白43在培養(yǎng)人角膜緣上皮細(xì)胞中的表達(dá).用植塊法培養(yǎng)角膜基質(zhì)成纖維細(xì)胞.從培養(yǎng)的角膜緣上皮細(xì)胞和角膜基質(zhì)成纖維細(xì)胞中提取總R

2、NA和蛋白質(zhì),行毒蕈堿受體1-5亞型RT-PCR和Western Blot.免疫熒光染色研究m1-5在人角膜緣和角膜組織和培養(yǎng)細(xì)胞的分布.從人結(jié)膜組織分離上皮細(xì)胞和成纖維細(xì)胞并培養(yǎng)至第1-2代,提取培養(yǎng)細(xì)胞的總RNA和蛋白質(zhì),行毒蕈堿受體1-5亞型RT-PCR和Western Blot.免疫熒光染色研究m1-5在人結(jié)膜組織和培養(yǎng)細(xì)胞的分布.Brdu酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)檢測(cè)毒蕈堿受體激動(dòng)劑carbachol對(duì)結(jié)膜成纖維細(xì)胞增殖的影響.結(jié)論:人

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