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文檔簡介
1、研究背景: 三叉神經痛被稱為人類最大的痛苦之一,臨床治療手段雖然不少,但尚無一種公認的理想手段,其主要原因是三叉神經痛發(fā)病機制尚未闡明。目前已有的中樞性病源學說、周圍性病源學說、血管壓迫學說等都不能完整地解釋該病臨床現(xiàn)象。三叉神經痛機制的研究障礙之一是缺乏一個理想的動物模型,以往用于研究三叉神經痛的腦閂下蛛網膜下腔注射微量青霉素G-K引起大鼠三叉神經痛樣反應模型、慢性壓迫性損傷大鼠眶下神經模型及貓去牙髓模型等均有操作復雜、特異性不高等缺
2、點,為此建立一種簡便、易行且可靠的動物模型實屬必要。
目的: 建立一種簡便、易行、可靠的三叉神經痛動物模型。
方法:
實驗1選取Wistar大鼠20只,隨機分為兩組,沿眉弓上緣做弧形切口,顯露位于眶內側底部的眶下神經,予大鼠眶下神經干內注射蛇毒(濃度為0.1mg·l-1)或生理鹽水6ul。于術前3天以及術后3、6、9、12、15、20、25、30、40、50、60、70、80以及90天進行機械痛閾行為學測定
3、。觀察大鼠眶下神經支配區(qū)域對機械刺激的疼痛反應閾值及疼痛行為學表現(xiàn)。
實驗2選取Wistar大鼠30只,分別為蛇毒注射組20只和對照組10只,沿眉弓上緣做弧形切口,顯露位于眶內側底部的眶下神經,予大鼠眶下神經干內注射蛇毒(濃度為0.1mg·l-1)或生理鹽水6ul。于術前3天以及術后3、7、14天進行視頻行為學測定。攝像機放置在籠子前面1米處觀察大鼠探究行為、靜止行為、抓臉行為、搖頭行為、舔后肢行為和舔身體行為的次數(shù)和時間。<
4、br> 實驗3選取Wistar大鼠4只,分為蛇毒注射組和對照組各兩只。按照實驗1的方法制作蛇毒三叉神經痛模型。取大鼠延髓和眶下神經組織,制作電鏡切片,觀察電鏡下延髓和眶下神經組織。
實驗4選取Wistar大鼠2只,一側股靜脈推注5%伊文氏藍染料,待大鼠全身轉藍約幾分鐘后,予ION神經鞘膜內注入蛇毒毒液或生理鹽水,觀察ION支配區(qū)域血管通透性以伊文氏藍漏出量。
實驗5選取實驗2中制作完成蛇毒模型組大鼠16只,隨機分為
5、喂藥組和對照組,每組8只。普瑞巴林喂藥組采取灌胃法,藥物用生理鹽水溶解,每只灌注量為30mg/kg,連續(xù)灌注6天,對照組不做任何處理。喂藥前1天以及喂藥后第1、2、3、4、5、6、14天進行行為學測定。攝像機放置在籠子前面1米處觀察大鼠探究行為、靜止行為、抓臉行為、搖頭行為、舔后肢行為、舔身體行為的次數(shù)和時間。
結果:
1、實驗組大鼠于術后3天出現(xiàn)眶下神經支配區(qū)域機械痛反應閾值與術前及對照組相比明顯降低(P<0.01
6、),大鼠易激惹,具有搔抓面部或攻擊行為。機械痛閾值降低持續(xù)至術后60天,此后逐漸恢復,術后90天完全恢復同術前。
2、實驗組大鼠于術后3天出現(xiàn)探究行為、靜止行為、抓臉行為、搖頭行為的變化,與術前及對照組相比上述行為變化有統(tǒng)計學意義(P<0.01),舔后肢、舔身體行為無明顯變化。大鼠術后7天、14天探究行為、靜止行為、抓臉行為、搖頭行為變化進一步明顯,與術前及對照組相比上述行為變化均有統(tǒng)計學意義(P<0.01)。舔后肢、舔身體行
7、為與術前及對照組相比上述行為變化無統(tǒng)計學意義。
3、實驗組延髓神經細胞出現(xiàn)髓鞘松解、脫髓鞘改變,同時出現(xiàn)軸索密度分布不均勻改變。實驗組眶下神經細胞出現(xiàn)髓鞘松解、脫髓鞘改變。
4、予大鼠眶下神經干鞘膜內注射蛇毒15分鐘后,圍繞鼻區(qū)的口唇部出現(xiàn)藍色斑塊,伊文氏藍滲出明顯,對照組則幾乎無伊文氏藍滲出。
5、普瑞巴林組大鼠于喂藥后第1天出現(xiàn)抓臉行為、搖頭行為的變化,與術前及對照組相比上述行為變化有統(tǒng)計學意義,探究行
8、為、靜止行為、舔后肢、舔身體行為無顯著改變。普瑞巴林組大鼠于喂藥后第2天出現(xiàn)抓臉、搖頭、靜止行為的變化,與術前及對照組相比上述行為變化有統(tǒng)計學意義(P<0.01),探究行為、舔后肢、舔身體行為無明顯變化。普瑞巴林組大鼠于喂藥后第3天出現(xiàn)抓臉、搖頭、靜止行為、探究行為的變化,與術前及對照組相比上述行為變化有統(tǒng)計學意義(P<0.01),舔后肢、舔身體行為無顯著改變。普瑞巴林組大鼠于喂藥后第4、5、6、14天均出現(xiàn)抓臉、搖頭、靜止行為、探究行
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