硝普鈉對大鼠肝臟缺血再灌注損傷早期微粒體白三烯C4合成酶系及產物LTC4的影響.pdf

1、一段時間的缺血是許多肝臟外科手術所必需的,尤其涉及到較大范圍的肝損傷時更是如此。在恢復高血流供應后,肝臟遭受更進一步的損害,加重缺血導致的業(yè)已存在的損傷,稱為缺血再灌注(ischemia and reperfusion,I/R)損傷。肝臟I/R損傷是一個重大臨床問題,在創(chuàng)傷、熱損傷、血容量減少、內毒素休克、重建血管外科、肝移植和肝切除外科手術等情況下均有I/R參與其發(fā)生機制。許多實驗顯示I/R誘發(fā)的肝損傷分兩個時期發(fā)生。在再灌注早期,內

2、皮細胞腫脹,血管收縮,白細胞誘捕及血小板聚集在竇狀隙導致微循環(huán)衰竭,缺血導致能量缺乏,使膜轉運失效而致細胞內水腫,內皮和枯否細胞發(fā)生腫脹。NO/ET平衡失調導致血管進一步收縮,造成竇狀隙狹窄,隨之降低白細胞速度,白細胞和內皮細胞接觸的頻率升高,造成白細胞停滯。停滯的白細胞盡管不能完全阻塞竇狀隙腔,卻進一步造成肝微循環(huán)血流障礙,延長缺氧時間,使這一區(qū)域在再灌注開始后仍保持缺血,進而激活枯否細胞和中性白細胞。這些細胞產生炎癥細胞因子和氧起源

3、的自由基進一步加劇肝損傷。半胱氨酰白三烯(cysteinyl leukotrienes,Cys-LTs)是一類重要的前炎癥花生四烯酸類物質,它由肝臟代謝分泌到膽汁,該作用呈ATP依賴性,其母體復合物LTC4由肝微粒體白三烯C4合酶(leukotriene C4 synthase,LTC4S)、微粒體谷胱甘肽S轉移酶(microsomal glutathione S-transferase,mGST)2和mGST3催化LTA4和GSH結合

4、形成?，F已知人和鼠肝臟中均有LTC4S、mGST2和mGST3表達。有報道LTs關系到幾種肝損傷,如急性肝壞死,肝硬化和敗血癥,但有關肝臟I/R損傷與LTs關系的研究較少。有研究表明I/R損傷肝組織LTC4含量較對照組顯著升高，并伴隨肝臟水腫增強和血漿ALT上升。但肝臟I/R損傷過程中用GST2和mGST3基因和蛋白表達有無變化，肝臟I/RR損傷是否影響肝微粒體LTC、合成酶系的活性尚不得而知。
　　Larfars等研究首次表明花

5、生四烯酸代謝產物LTB4, LTC4和LTD4通過作用離體人多形核白細胞（PMN）表面受體，以G蛋白和[Ca2+]i依賴激活PMN釋放NO。NO供體硝普鈉（0.05mmo1/L,1mmol/L）灌流減弱了LTD4對膽汁流量、膽汁酸分泌及門靜脈流量的影響，而LTD4對葡萄糖排出的作用未受影響。給予LTD4后門脈流量減少和膽汁量減少之間密切相關，當給予SNP后相關性減弱。此外LTB4濃度依賴性方式減弱了肝細胞NO合成，當肝細胞被細胞因子聯合

6、刺激或IL-1單獨刺激時，降低的NO2-合成同降低的iNOS mRNA相關聯顯示iNOS的誘導被抑制，提示類花生酸類物質能調節(jié)離體肝細胞NO的合成。過去20多年的研究顯示NO是心血管、神經和免疫系統(tǒng)主要的信息分子，參與了機體的多項生理和病理過程。體內肝血管內皮、血小板、神經末稍、肥大細胞和枯否細胞在內毒素、I/R損傷及循環(huán)性休克等刺激下可產生NO，其中起作用的自體生物活性物質有組織胺、血管活性腸膚、腺苷、ATP, 5-HT, P物質、緩

7、激膚和降鈣素基因相關膚等。NO在肝I/R損傷中的作用各家報道不一。有關NO是否及如何在肝臟I/R損傷早期影響微粒體谷骯甘膚S轉移酶超家族成員(MAPEG)中LTC4合成酶(LTC4S, mGST2和mGST3)基因和蛋白表達、活性及其產物LTC4含量，其作用的分子機制如何尚未見報道。
　　本研究采用Pringle's法制作大鼠肝臟部分(70％左右)I/R損傷模型，觀察了肝臟I/R損傷過程中微粒體LTC4合成酶基因和蛋白表達、酶活性