蜚蠊共附生放線菌的分離、活性篩選和次級代謝產物研究.pdf

1、天然產物是藥物的重要來源。許多常用的臨床藥物均來自于微生物次級代謝產物。其中放線菌(Actinomycetes)在產生抗生素方面具有獨特的優(yōu)勢，大約75％的抗生素都是由放線菌產生。從動物共附生微生物可以分離到許多結構新穎，生物活性多樣的化合物。而昆蟲共附生放線菌及其次級代謝產物的研究是一個新的領域。有可能對新藥的研究及解決抗藥性問題起到巨大的推動作用。 本論文對采集自廈門大學學生宿舍的蜚蠊進行體內(分為腸道和其他內臟)共附生放線

2、菌的分離，共分離到50株放線菌。并對分離到的菌株進行了分子鑒定，通過16S rDNA的序列分析，結果表明所有菌株均屬于鏈霉菌屬。 以枯草芽孢桿菌(Bacillus subtilis)、大腸桿菌(Escherichia coli)、金黃色葡萄球菌(Staphlococcus aureus)、短小芽孢桿菌(Bacillus pumilus)、白色假絲酵母(Candida albicans)和黑曲霉(Aspergillus miger

3、)為指示菌，采用牛津杯法對這些菌株進行抗菌活性檢測，共篩選得到活性菌株15株，占總菌株數(shù)的30％，其中主要是抗革蘭氏陽性細菌的活性，但活性都較弱；采用MTT法對其體外抗腫瘤活性進行檢測，發(fā)現(xiàn)有39株放線菌對HeLa(人子宮癌細胞)具有抑制作用，占總菌株數(shù)的78％，其中有15株放線菌對HeLa(人子宮癌細胞)有很強的抑制作用，占總菌株數(shù)的30％。 本論文對兩株具有較強抗腫瘤活性的鏈霉菌菌株A2-7和AO-1的次級代謝產物進行了初步

4、研究。從菌株A2-7的液體發(fā)酵產物中分離并鑒定了9個化合物，其中4個為新化合物，Q7、Q19和Q27為雜合萜類，Q10為呋喃酸類。5個為已知化合物，Q1B和Q26為呋喃酮類物質，Q11為苯乙酸苯酯類物質，Q16為飽和脂肪酸類物質，Q17為吲哚類物質；另外，從菌株A2-7的固體發(fā)酵產物中分離到并鑒定了1個已知化合物Q31，為苯乙酰氨類物質。從菌株AO-1的固體發(fā)酵產物中分離并鑒定了4個已知化合物，其中Q42為氨基酸類物質，Q43和Q44為

5、蒽醌類物質-Q47為羥基苯乙酮類物質。 對新化合物Q7、Q10、Q19和Q27的抗菌活性及抗腫瘤活性進行了研究，在樣品濃度為100μg/ml時，用MIC法測定抗菌活性，對枯草芽孢桿菌(Bacillus subtilis)、大腸桿菌(Escherichia coli)、金黃色葡萄球菌(Staphlococcus aureus)、短小芽孢桿菌(Bacillus pumilus)、白色假絲酵母(Candida albicans)和黑曲