肝特異性miR-122負向調控IFN-alpha抗乙肝病毒活力.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、乙型肝炎病毒(HBV,Hepatitis B Virus)感染是常見的傳染性疾病之一,不僅能引起急、慢性病毒性肝炎,而且與肝纖維化、肝細胞癌的發(fā)生發(fā)展密切相關,嚴重威脅人類的健康。目前,治療乙肝的藥物主要有兩類:干擾素與核苷類似物。干擾素(IFN)是由干擾素誘生劑誘導生物細胞后所產生的一類高活性多功能的糖蛋白。1976年Greenberg等首先報道用人白細胞干擾素治療4例慢性活動性乙肝,治療后有2例HBeAg消失。此后,干擾素一直被視為

2、治療乙肝的首選藥物,且在歐洲取得了較滿意的治療效果。在亞洲,僅有20-30[%]的乙肝患者對干擾素治療敏感。前人報導干擾素可以調節(jié)肝細胞中microRNA-122的表達,且microRNA-122與HBV息息相關。本文通過Real-time PCR,Nanodrop等方法旨在于研究microRNA-122介導干擾素抗HBV復制的可能機制。
   首先,通過用IFN-α體外處理Huh7細胞,qRT-PCR檢測Huh7細胞中micr

3、oRNA-122表達量的變化,發(fā)現(xiàn)1000IU/ml IFN-α可以顯著下調細胞中microRNA-122的表達。
   其次,本文成功構建pSuper-miR-122真核表達載體。用pSuper-miR-122或miR-122-mimic與pHBV1.3轉染HepG2細胞,發(fā)現(xiàn)miR-122在體外可以抑制HBV的復制。同時,用miR-122-inhibitor與HBV1.3轉染Huh7細胞,結果表明miR-122-inhibi

4、tor在Huh7細胞中具有促進HBV復制的作用。兩項結果分別從正反面表明:miR-122在體外可抑制HBV的復制。
   再次,為了探求為什么miR-122能抑制HBV,HBV1.3-luci報告基因與miR-122共轉染Huh7細胞,發(fā)現(xiàn)miR-122可能作用于HBV-C的5‵非編碼區(qū)。
   最后,本研究對干擾素、HBV與miR-122進行了綜合實驗分析,得出miR-122負向調節(jié)IFN抗HBV復制的結論。這個結果對

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