非小細胞肺癌對表皮生長因子受體酪氨酸激酶抑制劑繼發(fā)耐藥的機制研究.pdf_第1頁
已閱讀1頁,還剩113頁未讀 繼續(xù)免費閱讀

下載本文檔

版權說明:本文檔由用戶提供并上傳,收益歸屬內(nèi)容提供方,若內(nèi)容存在侵權,請進行舉報或認領

文檔簡介

1、背景與目的:非小細胞肺癌(Non—small cell lung cancer,NSCLC)位居癌癥死亡的首位,在發(fā)達國家的5年生存率約15%,發(fā)展中國家的5年生存率約9%。表皮生長因子受體酪氨酸激酶抑制劑(Epidermal growth factor receptor tyrosine kinase inhibitor,EGFR TKI)是繼手術、放療和化療之后出現(xiàn)的又一治療手段。EGFR TKI對部分NSCLC十分有效,但這部分病

2、例最終都會出現(xiàn)繼發(fā)耐藥。明確的耐藥機制仍未闡明。本研究為了探討中國NSCLC人群對EGFR TKI的耐藥機制,對EGFR、KRAS、c—MET以及肝細胞生長因子(Hepatocyte growth factor,HGF)等四個靶點進行研究,分析它們的特點與在耐藥中的意義。 材料與方法:以沒有TKI治療過的NSCLC手術后病例作為基線人群,對一組共31例EGFR TKI治療耐藥后的NSCLC進行研究。分別用直接測序法(Direct

3、 sequencing)與蝎形探針擴增阻滯突變系統(tǒng)(Scorpions amplification refractory mutation system,ARMS)檢測EGFR基因酪氨酸激酶區(qū)(18~21外顯子)的敏感突變及耐藥突變,分析突變與療效預后的關系;用Affymetrix Human Genome U133 Plus2.0 Array基因芯片比較3例含T790M突變NSCLC與6例EGFR敏感突變NSCLC之間的全基因組表達變

4、化;用直接測序法與KRAS突變試劑盒(KRAS mutation test kit)檢測KRAS基因第12、13、59和61位密碼子的突變;用實時熒光定量PCR TaqMan探針法檢測c—MET基因的拷貝數(shù);用四甲基偶氮唑鹽(MTT)法檢測HGF對Gefitinib細胞毒作用的影響;用免疫組化方法檢測肝細胞生長因子在耐藥后NSCLC中的表達水平。 結果:在耐藥病例中直接測序法共檢測到48.4%有EGFR敏感突變(15/31)與2

5、5.8%有T790M突變(8/31)。ARMS方法檢測出85.7%有敏感突變(24/28),51.6%有T790M突變(16/31)。兩種方法在EGFR敏感突變檢出率上差別有統(tǒng)計學意義(Fisher精確概率法,P=0.0029);在檢測T790M突變時ARMS方法也比直接測序法敏感(卡方檢驗,P=0.037)。所有T790M突變都在耐藥后的標本中檢出,其中1例為單獨存在的T790M突變。EGFR敏感突變豐度高的病例(僅在直接測序法檢測到

6、)對TKI的無進展生存期(Progression free survival,PFS)長于敏感突變豐度低的病例(直接測序未能檢出,但被ARMS法檢出)(P=0.012)。與高豐度T790M突變的病例相比,低豐度T790M突變的PFS較短(P=0.0028)。 EGFR T790M突變與敏感突變之間的全基因組表達差異主要有細胞凋亡、細胞增殖與腫瘤轉移三個方面,包括XAF1、BCL2、BCL2L12、HSP60、HSP10、ADA

7、M9與MET等基因。在沒有TKI治療過的NSCLC病例中KRAS基因突變率為7.6%(10/132),在吸煙人群中突變率高于非吸煙者。在TKI耐藥后NSCLC中,直接測序法與ARMS方法均未發(fā)現(xiàn)KRAS基因突變。 在基線人群中3.8%(2/53)有c—Met基因擴增;耐藥后的NSCLC中16.1%(5/31)有c—Met基因擴增。兩組之間差異接近有統(tǒng)計學意義(Fisher精確概率法,P=0.095)。治療前或治療后檢出的c—Me

8、t基因擴增在臨床病理因素方面沒有明顯差異。c—Met基因擴增在EGFR敏感突變或野生型NSCLC中均可出現(xiàn),有2份耐藥后的標本被證實c—Met基因擴增合并EGFR T790M突變。 外源性HGF沒有影響Gefitinib對EGFR野生型NSCLC細胞的殺傷作用。17.4%(4/23)耐藥后NSCLC為HGF陽性表達。陽性病例均為EGFR19外顯子缺失突變NSCLC,其中3例同時合并T790M突變。HGF高表達的病例沒有合并c—M

9、et基因擴增。所有HGF陽性病例對TKI耐藥后的進一步治療均無反應。 結論: 1、51.6%(ARMS法)對TKI耐藥的中國非小細胞肺癌與繼發(fā)EGFR T790M突變有關。 2、繼發(fā)性EGFR T790M突變可能獨立于敏感突變而存在。 3、EGFR基因突變豐度不同的NSCLC其無進展生存期不同。 4、EGFR T790M突變引起與細胞凋亡、細胞增殖及轉移相關的分子出現(xiàn)變化。 5、中國NSC

溫馨提示

  • 1. 本站所有資源如無特殊說明,都需要本地電腦安裝OFFICE2007和PDF閱讀器。圖紙軟件為CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.壓縮文件請下載最新的WinRAR軟件解壓。
  • 2. 本站的文檔不包含任何第三方提供的附件圖紙等,如果需要附件,請聯(lián)系上傳者。文件的所有權益歸上傳用戶所有。
  • 3. 本站RAR壓縮包中若帶圖紙,網(wǎng)頁內(nèi)容里面會有圖紙預覽,若沒有圖紙預覽就沒有圖紙。
  • 4. 未經(jīng)權益所有人同意不得將文件中的內(nèi)容挪作商業(yè)或盈利用途。
  • 5. 眾賞文庫僅提供信息存儲空間,僅對用戶上傳內(nèi)容的表現(xiàn)方式做保護處理,對用戶上傳分享的文檔內(nèi)容本身不做任何修改或編輯,并不能對任何下載內(nèi)容負責。
  • 6. 下載文件中如有侵權或不適當內(nèi)容,請與我們聯(lián)系,我們立即糾正。
  • 7. 本站不保證下載資源的準確性、安全性和完整性, 同時也不承擔用戶因使用這些下載資源對自己和他人造成任何形式的傷害或損失。

最新文檔

評論

0/150

提交評論