20味沉香丸對低氧條件下大鼠HIF-1α及EPO的干預作用.pdf

1、研究背景及目的:
　　高原環(huán)境惡劣，其中低壓低氧、寒冷、干燥、紫外線輻射強和風速大等特點都對人的生理功能會產生明顯影響，易引起高原病的發(fā)生。當人進入高原地區(qū)后，由于大氣壓低，氧分壓隨之下降，氧供不足，機體就會出現代償性生理反應包括肺通氣增大，心率和心輸出量提高，氧傳遞速度和效率增大等，有利于機體攝取更多的氧[1]。其中血液系統(tǒng)的變化甚為明顯，主要表現為骨髓造血增強、紅細胞和血紅蛋白增多，氧解離曲線右移，從而增加氧的運輸和血紅蛋白釋

2、放氧。但是在高海拔地區(qū)時間越長，紅細胞數、血紅蛋白含量、紅細胞壓積就會增加過度，使得全血比黏度、血漿比黏度增大，血流速度減慢，反而影響氧的運輸，加重組織缺血、缺氧[,2]。這與低氧誘導因子-1α（hypoxia inducible factor-1α,HIF-1α）和促紅細胞生成素（erythropoietin,EPO）表達過高有關。
　　高原低氧可刺激HIF-1α和EPO的產生，從而提高紅細胞數量和血紅蛋白的濃度，以增加氧的運輸

3、與釋放，這在高原缺氧中具有重要意義[3][4]。作為調控氧穩(wěn)態(tài)的主要轉錄因子HIF-1α對維持機體氧平衡和適應低氧環(huán)境具有關鍵作用。在常氧環(huán)境條件下,HIF-1α蛋白持續(xù)合成并被不斷降解，在低氧環(huán)境條件下,HIF-1α蛋白降解受阻，并在HIF-1α和HIF-1β轉錄因子二聚化作用下形成HIF-1[5][6]。HIF-1能作用于其靶基因發(fā)揮氧調節(jié)作用,維持機體在低氧條件下的生存。EPO是一種糖蛋白激素，它主要作用于紅系定向祖細胞膜上的紅細

4、胞生成素受體，促進這些定向祖細胞加速增殖分化，加快紅細胞成熟，防止細胞凋亡(Apoptosis)。當腎臟氧感受器受到低氧刺激后，腎小管間質纖維細胞分泌EPO，并刺激骨髓的原始細胞，促使核紅細胞的分裂，加速紅細胞的成熟，因而血液中紅細胞數增多。其結果，一方面增加血紅蛋白的攜氧能力，提高氧傳遞，改善組織缺氧；另一方面如果血細胞比容超過60％時，則顯著增加血液黏滯度，血流緩慢，血液在微循環(huán)淤滯，甚至發(fā)生血栓，使氧的傳遞受阻，于是加重了組織缺氧

5、。
　　二十味沉香丸是在八味沉香丸的基礎上，通過添加十二味藥而成,在治療心腦血管疾病中成為首選的藏藥，但缺乏實驗依據[11][13]16][17]。本研究旨在探討二十味沉香丸對高原低氧大鼠血清中低氧誘導因子-1α（HIF-1α）和促紅細胞生成素（EPO）表達的影響，從而使機體能更好地適應低氧低壓環(huán)境。
　　材料和方法:
　　將165只雄性Wistar大鼠由成都(海拔540m)運至西寧(海拔2260m)，隨機分為平原對照

6、組、高原對照組和高原給藥組，平原對照組(n=15)到達西寧立刻從腹主動脈測定大鼠血液中血紅蛋白（Hb）和血細胞比容（Hct），全血經離心分離血清并于液氮儲存；將高原對照組(n=75)和高原給藥組(n=75)大鼠再運至青海果洛州花石峽鎮(zhèn)(海拔4500m)，分為5小組，每小組15只，分別于1、3、7、15、30日測定該兩組血紅蛋白和血細胞比容，采集外周血并分離血清液氮儲存。應用酶聯免疫吸附法(ELISA)檢測大鼠血清中HIF－1α和EPO含

7、量；應用蛋白質印跡法（Western blot）檢測大鼠腎組織中HIF-1α和EPO蛋白表達水平，應用SPSS10.0軟件包進行統(tǒng)計學處理，進行多組方差分析檢驗。
　　結果:
　　高原對照組大鼠血液中Hb和Hct含量明顯升高，于第3天起與平原對照組相比出現明顯差異，差異均具有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)，高原給藥組Hb和Hct上升不明顯，相比平原對照組，兩組無差異；高原對照組大鼠組血清HIF－1α和EPO表達較平原對照組明顯升