有機殺蟲劑雙氫魚藤酮對人漿細胞的促凋亡作用及其機理研究.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、研究背景和目的:雙氫魚藤酮(DHR)是天然殺蟲劑魚藤酮的代謝產(chǎn)物,與魚藤酮一樣廣泛應用于農(nóng)業(yè)生產(chǎn),包括漁業(yè)、園藝和有機農(nóng)產(chǎn)品等。DHR是一個有效的線粒體抑制劑并可能引起帕金森樣綜合癥,然而DHR對其他系統(tǒng)的作用尚不清楚。因為漿細胞在免疫屏障系統(tǒng)中發(fā)揮重要作用,本課題擬研究DHR對人漿細胞的毒副作用,為DHR的安全性評價提供新的證據(jù)。
  研究方法:用噻唑藍(MTT)法檢測DHR是否抑制漿細胞增殖,流式細胞技術檢測DHR對漿細胞周期

2、、凋亡和線粒體膜電位的影響。免疫印跡檢測DHR對漿細胞的細胞周期蛋白、凋亡蛋白、內質網(wǎng)應激相關蛋白和p38有絲分裂原激活蛋白激酶表達的調控。
  研究結果:
 ?。?)MTT試驗表明了DHR能以濃度依耐性的方式抑制人漿細胞存活率,免疫印跡顯示DHR下調參與G1期調控點的周期調節(jié)劑cyclin D3、CDK4/6、cyclin E和p-Rb的表達以及上調抑癌因子p53的表達,且使?jié){細胞細胞周期滯止在G0/G1期。
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3、2)流式細胞技術表明DHR能引起漿細胞的凋亡,且免疫印跡證明caspase-3、8、9以及PARP均被剪切,抗凋亡蛋白Bcl-2和Mcl-1表達被下調,促凋亡蛋白Bim表達被上調。
 ?。?)利用四甲基羅丹明甲酯(TMRM)染色,經(jīng)流式細胞技術表明 DHR能降低漿細胞的線粒體膜電位。
 ?。?)用DHR處理漿細胞不同濃度或不同時間,內質網(wǎng)應激和未折疊蛋白反應的標志蛋白GRP78、ATF4和CHOP均被上調。
 ?。?)

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