意向性運動對局灶性腦缺血大鼠神經功能的影響及其機制研究.pdf

1、目的:
　　通過觀察意向性運動對局灶性腦缺血大鼠神經功能及缺血半暗帶ERK-CREB通路表達及GluR2與PICK1共定位表達比率的影響，初步探討意向性運動對局灶性腦缺血后神經功能的影響及其可能的作用機制。
　　方法:
　　雄性Sprague-Dawley(SD)大鼠144只，隨機均分為大腦中動脈栓塞模型(MCAO)組、游泳運動(SE)組、飼養(yǎng)環(huán)境改變(EM)組和意向性運動(WM)組，各組又分7d、15d、30d三個亞

2、組。采用線栓法制備MCAO大鼠模型，動態(tài)觀察各組大鼠行為學變化，TTC染色觀察不同運動方式對15d組大鼠腦梗死體積的影響，RT-PCR及免疫熒光單標染色動態(tài)檢測缺血半暗帶腦組織ERK、CREB、GluR2 mRNA及pERK、pCREB蛋白的表達水平，免疫熒光雙標染色檢測15d組GluR2與PICK1的共定位表達比率。
　　結果:
　　1.各組大鼠在腦缺血再灌注2h時的神經功能評分最高，1d后略下降，第3d略有回升，以后隨時

3、間推移各組評分均呈下降趨勢，各組評分差別無統(tǒng)計學意義(P＞0.05)。SE組評分在再灌7d較MCAO組升高(P＜0.05)，而再灌15、30d下降(P＜0.05); EM組及WM組評分在再灌7、15、30d，均較MCAO組下降(P＜0.05)，以WM組下降更明顯。EM組及WM組大鼠的爬梯頻率均呈逐漸增加趨勢，且WM組較EM組顯著增加(P＜0.05)。
　　2.TTC染色結果顯示:腦缺血再灌注15d時，與MCAO組比較，SE組梗死體

4、積差異無統(tǒng)計學意義(P＞0.05); EM組及WM組腦梗死體積減小(P＜0.05)，以WM組更明顯(P＜0.05)。
　　3.RT-PCR結果顯示:與MCAO組比較，SE組腦缺血再灌注7d時ERK、CREB mRNA的表達減少(P＜0.05)，15、30d后的表達明顯增加(P＜0.05)，而GluR2 mRNA的表達在7d、15d、30d時均明顯增加(P＜0.05);EM組及WM組各實驗點ERK、CREB、GluR2 mRNA的表

5、達較MCAO組均增加(P＜0.05)，以WM組更明顯(P＜0.05)。
　　4.免疫熒光單標染色結果顯示:pERK在胞核、胞漿、胞膜均有表達，pCREB主要表達于胞核。MCAO組在腦缺血再灌注15d時，pERK、pCREB表達較7d時上調，隨后基本保持恒定;SE組、EM組、WM組在再灌注7、15、30d，兩蛋白的表達隨時間呈上升趨勢;但SE組與MCAO組比較，兩蛋白表達在再灌7d時減少(P＜0.05)，15、30d明顯增加(P＜0

6、.05);EM組在各時間點兩蛋白的表達均較MCAO組增多(P＜0.05);WM組兩蛋白的表達在各時間點均較其他三組明顯增多(P＜0.05)。
　　5.免疫熒光雙標結果顯示:GluR2與PICK1蛋白均表達于胞漿和胞膜，且兩者的分布情況及變化趨勢存在高度一致性。腦缺血再灌注15d，SE組、EM組及WM組GluR2、PICK1的陽性細胞數均較MCAO組明顯增加，而WM組雙標陽性細胞數較其他三組明顯增加(P＜0.05)
　　結論: