

版權說明:本文檔由用戶提供并上傳,收益歸屬內容提供方,若內容存在侵權,請進行舉報或認領
文檔簡介
1、植物體內存在復雜的信號傳導系統,能感知、傳遞逆境脅迫信號,并引起各種生理生化反應以適應不利環(huán)境造成的傷害。蛋白激酶在信號傳遞、生長發(fā)育和功能基因的表達調控中起重要的作用。 蛋白激酶存在于絕大部分真核生物和少數原生生物中,由250~300個氨基酸殘基構成蛋白激酶的功能域,折疊成一個催化核心結構。蛋白激酶有11個保守的功能亞域,根據底物特異性將蛋白激酶分為絲氨酸/蘇氨酸蛋白激酶和酪氨酸蛋白激酶,還有一類有雙底物特異性。另外,Hank
2、s和Hunter把蛋白激酶分為AGC組、CaMK組、CMGC組、保守的PTK組和其它組。我們從干旱處理的小麥cDNA文庫中獲得了兩個蛋白激酶MAPK1和W55a。序列分析顯示,這兩個基因為新發(fā)現的蛋白激酶,其中MAPK1屬于CMGC組,W55a屬于CaMK組。本研究通過多種脅迫處理應用RT-PCR技術對兩個蛋白激酶基因MAPK1、W55a進行了表達特性分析,同時構建兩個小麥蛋白激酶基因表達載體,通過分別轉化煙草和擬南芥,研究煙草轉小麥蛋
3、白激酶基因MAPK1T0代個體和擬南芥轉小麥蛋白激酶基因W55a T3代個體的抗逆特性,獲得了以下主要結果: (1)蛋白激酶基因MAPK1、W55a和內參USP基因W1的表達特性分析:對小麥材料小白麥進行不同種類脅迫處理(干旱、低溫、高鹽、ABA、SA、MeJA、ET),提取總RNA,反轉錄成cDNA,運用RT-PCR技術對蛋白激酶基因進行表達特性分析。結果表明MAPK1的表達既受非生物脅迫誘導也受與生物脅迫相關植物激素的誘導;
4、W55a的表達受干旱、高鹽、ABA誘導,也受與生物脅迫相關植物激素的誘導,但不受低溫誘導,對各種脅迫響應的時間不一樣;為確保結果可靠性,引入內參uSP基因W1,W1的表達受干旱、低溫、ABA與生物脅迫相關植物激素的誘導,但不受高鹽與MeJA誘導。表明MAPK1、W55a、W1可能參與多種信號途徑,且在不同脅迫信號途徑中發(fā)揮不同的作用,它們可能是非生物脅迫和生物脅迫信號的交叉點。 (2)蛋白激酶MAPK1的煙草轉化及抗鹽性鑒定:構
5、建小麥蛋白激酶MAPK1的轉基因表達載體,通過農桿菌侵染法轉化煙草,對轉MAPK1基因煙草無性繁殖的T0代株系葉片進行鹽處理試驗,發(fā)現轉MAPK1基因能夠明顯增強轉基因煙草的耐鹽性。 (3)蛋白激酶W55a.的擬南芥轉化和抗旱性鑒定:構建小麥蛋白激酶W55a的轉基因表達載體,通過農桿菌侵染法轉化擬南芥,對轉W55a基因擬南芥T3代株系進行模擬干旱處理試驗,發(fā)現轉W55a基因能夠明顯增強轉基因擬南芥的抗旱性。 (4)蛋白激
6、酶MAPK1與轉錄因子W17酵母雙雜實驗:將轉錄因子W17根據不同的功能域分段構建誘餌載體,通過在缺陷型培養(yǎng)基上顯藍情況,發(fā)現與MAPK1互作的W17區(qū)域,證明MAPK1能夠與W17互作。綜上所述,本研究對蛋白激酶MAPK1、W55a和內參基因W1進行了初步的功能驗證,確認MAPK1、W55a和W1參與非生物信號傳導,并且參與了與生物脅迫相關的植物激素信號傳導;生物學特性分析初步表明MAPK1的過表達提高了轉基因煙草的耐鹽性,W55a的
溫馨提示
- 1. 本站所有資源如無特殊說明,都需要本地電腦安裝OFFICE2007和PDF閱讀器。圖紙軟件為CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.壓縮文件請下載最新的WinRAR軟件解壓。
- 2. 本站的文檔不包含任何第三方提供的附件圖紙等,如果需要附件,請聯系上傳者。文件的所有權益歸上傳用戶所有。
- 3. 本站RAR壓縮包中若帶圖紙,網頁內容里面會有圖紙預覽,若沒有圖紙預覽就沒有圖紙。
- 4. 未經權益所有人同意不得將文件中的內容挪作商業(yè)或盈利用途。
- 5. 眾賞文庫僅提供信息存儲空間,僅對用戶上傳內容的表現方式做保護處理,對用戶上傳分享的文檔內容本身不做任何修改或編輯,并不能對任何下載內容負責。
- 6. 下載文件中如有侵權或不適當內容,請與我們聯系,我們立即糾正。
- 7. 本站不保證下載資源的準確性、安全性和完整性, 同時也不承擔用戶因使用這些下載資源對自己和他人造成任何形式的傷害或損失。
最新文檔
- 柞蠶蛋白激酶C受體1基因的鑒定與表達分析.pdf
- 錦鯉皰疹病毒兩個類蛋白激酶蛋白的研究.pdf
- 水稻WNK蛋白激酶基因OsBIWNK1的分子鑒定.pdf
- 兩個油菜NAC基因的鑒定及其表達和功能的初步研究.pdf
- 葡萄果實中ACPK1蛋白激酶的基因克隆和功能的初步鑒定.pdf
- 棉花絲裂原活化蛋白激酶基因GbMPK3的功能鑒定.pdf
- 葡萄蛋白激酶組的鑒定、分類和表達分析.pdf
- 兩個棉花AP2-EREBP基因的鑒定及功能研究.pdf
- 蘋果周期蛋白依賴性蛋白激酶基因MdCDKB1的克隆及表達分析.pdf
- 棉花促絲裂原活化蛋白激酶激酶基因(GhMKK1)的分離及功能分析.pdf
- 兩個小麥MBD基因的克隆、植物表達載體的構建及遺傳轉化.pdf
- 田鼠巴貝斯蟲兩個硫氧還蛋白基因的克隆及鑒定.pdf
- 擬南芥中一個新蛋白激酶的功能研究.pdf
- 水稻蛋白激酶的克隆及體外表達.pdf
- 睪丸特異蛋白激酶TSSK4的基因克隆及功能初探.pdf
- 兩個水稻抗病相關基因的分離克隆與功能鑒定.pdf
- 兩個棉花GhPRP基因的表達及轉基因研究.pdf
- 水稻類受體蛋白激酶OsRLK381轉基因植株表型鑒定及功能初探.pdf
- 蘋果周期蛋白依賴性蛋白激酶亞基基因MdCKS的克隆及表達.pdf
- 棉花中兩個膜聯蛋白基因功能初步分析.pdf
評論
0/150
提交評論