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文檔簡介
1、目的:研究泛素特異肽酶22(USP22)在膀胱移行細胞癌組織及細胞中的基因及蛋白表達,并分析在膀胱癌組織和細胞中表達的差異情況,結合臨床資料,探討其可能的因果關系,進而得出相關性意義。
方法:分析收集自2008年12月至2009年7月華中科技大學附屬協(xié)和醫(yī)院泌尿外科膀胱癌手術切除的腫瘤標本43例,其惡性度及病理分期都經(jīng)過病理報告證實無誤,正常膀胱組織31例,取材于癌旁遠端的正常粘膜組織,其中男性患者30人,女性患者13人,
2、年齡約在41-77 歲之間,平均57.6 歲,取材均是肉眼明顯可分辨的癌組織,并遠離腫瘤的切緣,防止因電刀高溫引起的周圍組織變性,患者在接受手術前均未接受放療或者化療。通過免疫組織化學法檢測病例標本的usp22 蛋白表達;及該院中心實驗室保存低分化的EJ 膀胱癌細胞,用Trizol 抽提其RNA,蛋白裂解液獲得蛋白,并和膀胱癌組織一起做檢測,經(jīng)逆轉(zhuǎn)錄及實時定量聚合酶鏈反應檢測不同類型標本和細胞中usp22的表達;觀察不同類別標本的數(shù)據(jù)差
3、異并與臨床資料相結合,進行相關性分析;設計特異性siRNA 通過轉(zhuǎn)染沉默EJ細胞usp22基因,觀察對照組和實驗組的細胞生長傳代增值情況后做出分析。
結果:泛素特異肽酶22 mRNA在人正常膀胱組織中表達量很低,在膀胱移行細胞癌中表達明顯升高,具有顯著的差異性,在低度惡性的組織中其表達要低于中高度惡性組織中的表達。免疫組織化學顯示膀胱移行細胞癌組織泛素特異肽酶22 陽性率為87.5%(36/43),高于正常膀胱黏膜組織35
4、.4%(11/31),且隨著惡性度的增加,陽性率升高。在但是與性別年齡等因素無關;活的膀胱癌細胞株中有同樣類似的表達,惡性度較高的EJ細胞中mRNA表達也和3 期膀胱癌細胞相似。
結論:泛素特異肽酶22 作為一種潛在的腫瘤干細胞標記物,可能上調(diào)了膀胱組織中某些基因的表達,進而引起正常細胞的惡變,在膀胱癌的發(fā)生和發(fā)展過程中有可能起著重要的作用;它在膀胱組織中的表達同惡性度或分級成正相關,有望成為判斷病情發(fā)展的有用指標,同時很
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