尿液中DD3mRNA檢測對前列腺癌早期診斷意義的研究.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、目的:我國前列腺癌的發(fā)病率呈顯著增長態(tài)勢。PSA是目前診斷前列腺癌最重要的腫瘤標記物,但PSA只具有前列腺組織特異性,而無腫瘤特異性,其檢測假陽性率比較高,且PSA正常者也不能排除前列腺癌。DD3基因特異性地高表達于人類前列腺癌組織和轉移壞死灶中,本研究旨在論證它是否是一種可替代PSA的、早期診斷前列腺癌以及判斷預后的標志物。 材料和方法 收集非前列腺疾病病人、前列腺良性增生和前列腺癌患者的尿液標本沉淀;提取其中的總RN

2、A后進行逆轉錄聚合酶鏈反應;用β-actin作為看家基因,進行瓊脂糖凝膠電泳,確認DD3的PCR產物,同時對DD3mRNA進行半定量測定:用熒光定量聚合酶鏈反應對DD3mRNA進行相對定量測定:最后用SPSSl3.0分析相關數(shù)據(jù)。 結果 一、對于指標DD3灰度比值,非前列腺疾病病人與前列腺良性增生患者之間的比較無差異,與前列腺癌患者比較有差異。而對于指標DD3相對定量值,三類患者的比較均有顯著性差異,前列腺癌患者DD3m

3、RNA相對定量值是前列腺良性增生患者14.1倍、非前列腺疾病病人的24.1倍。 二、各個血清PSA水平級別之間,DD3mRNA相對定量值有差異。對PSA位于4-10 ng/ml檢測灰區(qū)的兩類患者進行比較,tPSA、fPSA、DD3mRNA灰度比值的比較均無明顯差異,而DD3mRNA相對定量值的比較則有顯著性差異。 三、各個Gleason評分/分化程度中,DD3mRNA灰度比值和DD3mRNA相對定量值均有明顯差異,分化程

4、度越低,DD3mRNA灰度比值和DD3mRNA相對定量值越高。DD3灰度比值、相對定量值與Gleason評分均呈顯著性正相關;DD3灰度比值與前列腺體積呈正相關,但相關性不明顯。 四、運用受試者工作特征曲線分析可得,各指標PSA、F/T、DD3灰度比值、DD3相對定量值的曲線下面積分別為:0.744、0.788、0.921、0.942。DD3相對定量值的檢驗效能最大,灰度比值次之。 討論 研究表明,PSA在0-4

5、ng/ml其假陽性率為25%,而假陰性率可達38%-48%;此外,幾個多中心臨床試驗顯示,DRE能夠發(fā)現(xiàn)10%-21%經(jīng)PSA測定PSA<4.0ng/ml的PCa患者:在血清PSA>4.0ng/ml的人群中,穿刺活檢診斷為前列腺癌者只有25%-30%。 de Kok等研究發(fā)現(xiàn),與良性組織相比,前列腺癌組織中DD3的含量增加了34倍,即使組織中前列腺癌細胞的含量較少(≤10%),DD3也能夠清晰準確地表達。臨床上,RISH法、RT

6、-PCR技術可在前列腺組織穿刺細胞學活檢和體液(如血液、精液、尿液和前列腺按摩液)檢測中應用。運用實時定量的RT-PCR技術,能準確量化地檢測DD3,它具有診斷前列腺癌和判斷其預后的價值。相比較而言,尿液中DD3的檢測標本更易獲得、更容易為患者接受。 前列腺癌患者尿液中DD3mRNA相對定量值是前列腺良性增生患者14.1倍、非前列腺疾病病人的24.1倍,在三類患者中的差別遠比血清PSA明顯。運用ROC分析發(fā)現(xiàn),DD3mRNA相對

7、定量值的曲線下面積最大(0.942),也就是說在綜合考慮靈敏度和特異度的情況下,DD3mRNA相對定量值這一指標在鑒別前列腺良性增生患者和前列腺癌方面的能力最強。這些結果說明,DD3mRNA相對定量值可以在前列腺癌的篩檢和早期鑒別診斷中發(fā)揮作用。Gleason評分是西方國家中應用最為普遍的病理分級,研究發(fā)現(xiàn)Gleason分級能很好的預測患者的預后情況。 本研究發(fā)現(xiàn),24例前列腺癌患者中,各個Gleason分級之間DD3mRNA灰

8、度比值和相對定量值比較均有顯著性差異,且Gleason分數(shù)與DD3mRNA灰度比值和相對定量值呈明顯的正相關,由此推斷對DD3mRNA的定量測定可能起到指導前列腺癌患者預后的作用。此外,在前列腺癌患者中,各個tPSA分級之間DD3mRNA相對定量值有明顯差異;對PSA位于4-10 ng/ml檢測灰區(qū)的前列腺良性增生和前列腺癌患者進行分析得到,tPSA、fPSA、DD3mRNA灰度比值的比較均無明顯差異,而DD3mRNA相對定量值的比較有

9、顯著性差異;這說明DD3mRNA相對定量值的測定能在前列腺良性增生和前列腺癌患鑒別診斷中發(fā)揮作用。對于DD3mRNA的分子生物學特性和功能還未完全了解;將尿液中DD3mRNA的檢測應用于篩查和早期鑒別診斷時,檢測方法沒有規(guī)范化,界值還未確定;如何將DD3基因檢測與前列腺癌的臨床分期和病理分級相聯(lián)系,以提高其判斷治療后轉歸的能力。還都有待于將來基于大規(guī)模人群的進一步深入研究。 結論 尿液中DD3mRNA的定量檢測可應用于前

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