IGF-1基因轉染骨髓間質干細胞移植對糖尿病大鼠骨折愈合的影響.pdf

1、背景骨折愈合需多種細胞及生長因子參與，是骨折后機體自我修復的復雜過程。臨床上骨折患者較為常見，糖尿病骨折患者骨折延遲愈合相對較為常見，是臨床亟待解決的問題。我們以前的實驗研究發(fā)現(xiàn)糖尿病大鼠骨折愈合過程中局部骨痂組織及血清中胰島素樣生長因子-1（Insulin-like growth factor-1，IGF-1）表達減少是導致骨折延遲愈合的原因之一。我們通過后續(xù)的實驗證實，體外高糖環(huán)境下胰島素樣生長因子-1基因可成功轉染骨髓間質干細胞(

2、Bone Marrow Mesenchymal Stem Cells，BMSCs)，并促進轉染后骨髓間質干細胞向成骨細胞的分化，使IGF-1表達量增加，那么將基因轉染后的BMSCs移植入糖尿病大鼠骨折局部，能否增加IGF-1的表達及能否促進糖尿病大鼠骨折愈合，為驗證這一設想，我們設計了本實驗，將體外IGF-1基因轉染的BMSCs移植于糖尿病大鼠骨折局部，檢測糖尿病大鼠血清及骨痂中IGF-1的表達情況，并觀察骨折愈合情況。
　　

3、目的：觀察胰島素樣生長因子-1（IGF-1）基因轉染的骨髓間質干細胞(BMSCs)移植對糖尿病大鼠骨折愈合的影響，探討糖尿病骨折的基因療法。
　　 方法：Wistar雄性6周齡大鼠50只，隨機分為對照組、實驗組，鏈脲佐菌素(STZ)腹腔注射誘導為糖尿病模型，所有大鼠均造成右側脛骨骨折，體外高糖環(huán)境下Ad-IGF-1轉染BMSCs，然后將IGF-1基因轉染的BMSCs移植于實驗組大鼠骨折局部，將未行基因轉染的BMSCs移植于對照組

4、大鼠骨折局部，于術后第1、2、3、4、6周拍攝X線片，取骨折處局部骨痂行HE染色，并行免疫組化染色檢測骨痂中IGF-1的表達，酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)檢測血清IGF-1的量。
　　 結果：(1)X線示:實驗組第6周骨折線模糊不清，骨折基本愈合，而對照組仍可見透光骨折線影。(2)免疫組化示，第4周局部骨痂中IGF-1灰度值:實驗組為103±5，對照組為109±4（P＜0.05）。(3)酶聯(lián)免疫吸附試驗檢測，第4周血清IGF-