山東部分地區(qū)灰飛虱Mariner類轉座子研究.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、近年來,水稻條紋葉枯病等病毒性農業(yè)病害在我國大范圍發(fā)生,已成為我國分布最廣、危害最大的一類農業(yè)病害。該病害來勢猛、危害重、損失大,嚴重威脅水稻、玉米、小麥等主要農作物的經(jīng)濟收入,因此防治此類病害勢在必行。這些病害是出水稻條紋葉枯病毒、水稻黑條矮縮病毒和玉米粗縮病毒等病毒所致。研究發(fā)現(xiàn)水稻條紋葉枯病病毒等不會通過作物間的機械接觸而感染,只能借助介體昆蟲吮吸作物汁液來達到病害傳播的目的?;绎w虱(Laodelphax striatellus)

2、是這些病毒的主要介體和傳播者??梢?,病毒性農業(yè)病害的表征是病,實質是蟲,內在核心是病毒,外在關鍵是灰飛虱,因此要想控制水稻條紋葉枯病等病毒性病害必須有效控制灰飛虱,“治蟲防治”是關鍵。 mariner類轉座子屬于DNA轉座子中的Tc1/mariner超家族成員,廣泛存在于細菌、昆蟲、植物等各種生物體內。研究發(fā)現(xiàn)mariner類轉座子結構簡單,轉化穩(wěn)定、高效,且轉座過程與宿主無關,其中轉座過程的宿主無關性使其成為轉基因載體研究的焦

3、點,目前已利用mariner類轉座子成功構建了多個轉基因載體。若把這類載體應用于轉基因昆蟲生產,將為灰飛虱的防治開辟新的思路。本研究通過對山東省5個地區(qū)灰飛虱體內的mariner類轉座子結構與組成的研究,分析它們與毛里塔尼亞果蠅mariner轉座子的同源性,進而探討其作為轉基因載體的可能性,期望能為這類轉座子在病蟲害防治中的應用提供一些理論依據(jù)。主要內容如下: 1、根據(jù)mariner類轉座子的轉座酶保守序列設計簡并引物,以山東省

4、5個地區(qū)不同灰飛虱種群的基因組DNA為模板,通過PCR擴增分別擴增出了9個不同的mariner類轉座子拷貝,初步證實在灰飛虱中存在mariner類轉座子。通過片段回收、克隆和測序,獲得其核苷酸序列,提交Genbank數(shù)據(jù)庫,注冊號為EU542020-EU542028。 2、利用相關軟件對所獲得的序列進行分析,發(fā)現(xiàn)序列長度集中于430bp、500bp和800bp左右,且各拷貝之間同源性差異較大,從34%到99%不等。這表明灰飛虱體

5、內的mariner類轉座子具有序列組成的高度多樣性。 3、將測得的9個mariner類轉座子拷貝與核酸數(shù)據(jù)庫的mariner類轉座子7個亞族中的19個常見序列進行系統(tǒng)學分析,顯示L5QFclone493拷貝屬于mauritiana亞族,而其他8個拷貝沒有明顯同源的亞族,可能屬于新亞族,其具體情況尚待進一步研究。 4、進一步分析L5QFclone493序列,并對其作為轉基因載體的可能性進行預測,以期為mariner類轉座子

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