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文檔簡介
1、子宮內膜異位癥是婦科常見病,累及10-50%的育齡女性,臨床表現為痛經、盆腔腫塊、不孕等,嚴重危及女性的生活質量和生育功能。藥物治療效果差,保守性手術復發(fā)率高。流行病學研究發(fā)現吸煙女性子宮內膜異位癥發(fā)病風險可以下降50%,具體原因不清,闡明其機制有助于進一步認識該疾病的病理生理機制,為預防和治療提供新思路。
為了在體內驗證尼古丁具有降低子宮內膜異位癥發(fā)病風險的作用,本文第一部分采用轉RFP小鼠子宮作為供體移植到去勢裸小鼠腹腔腹
2、膜上,設立對照組(C)、雌激素組(E)、雌激素加尼古丁組(E+N)及雌激素加孕激素組(E+P),分別給予苯甲酸雌二醇、尼古丁及己酸羥孕酮后測腹腔病灶的熒光強度及面積大小,同時用放射免疫法檢查血清雌二醇濃度。結果E+N組總病灶熒光強度低于E組,差別有統(tǒng)計學意義(P<0.05),但E+N組血清雌二醇水平未發(fā)現低于E組。表明尼古丁在體內試驗具有抑制子宮內膜異位癥樣病灶的生長作用且該模型尼古丁組血E2濃度未見降低。
為了證實尼古丁是否
3、通過雌激素受體通路實現降低子宮內膜異位癥發(fā)病風險的作用,本文第二部分在體外實驗研究了尼古丁處理后對ERE報告基因表達影響的影響,并用正常(NESC)和內異癥子宮內膜間質細胞(在位EuESC、異位EcESC)原代培養(yǎng)給予尼古丁和雌激素處理后對其生長、雌激素調控基因CCND1、MYC、PGR以及雌激素受體ESR1、ESR2及GPER表達水平的影響。未發(fā)現尼古丁具有抑制ERE報告基因表達水平、細胞生長以及雌激素調控基因和雌激素受體表達水平的作
4、用,尼古丁也沒有明顯抑制芳香化酶的表達水平,尼古丁可能不是通過抑制雌激素受體通路而降低子宮內膜異位癥的發(fā)病率。
為了證實尼古丁是否通過對子宮內膜間質細胞運動和遷移能力的影響表現降低子宮內膜異位癥發(fā)病風險的作用,本文第三部分在體外實驗用凝膠收縮實驗、細胞黏附實驗以及活細胞運動實驗研究了尼古丁和雌激素對NESC、EuESC和EcESC運動和遷移能力的影響。發(fā)現EuESC凝膠收縮能力強于NESC,EuESC及EcESC細胞運動能力強
5、于NESC,尼古丁可以抑制雌激素促NESC凝膠收縮作用及細胞黏附作用而在EuESC中不明顯,在細胞運動實驗中尼古丁對三種細胞的影響都不明顯。尼古丁對NESC遷移的抑制及黏附的促進可能抑制了ESC的轉移和侵襲從而影響了子宮內膜異位癥的發(fā)生和發(fā)展。
為了研究尼古丁抑制ESC運動和黏附的機制,本文第四部分在體外實驗用pull-down方法和免疫熒光方法檢測了尼古丁和雌激素對NESC、EuESC和EcESC5的RhoA活性的影響和對黏
6、著斑的影響。結果表明EuESC的RhoA活性明顯高于NESC,尼古丁可以抑制EuESC的RhoA活性而加雌激素后這種抑制作用不明顯。NESC、EuESC及EcES三者的張力纖維和黏著斑形成逐步升高,尼古丁處理對張力纖維影響不明顯而對黏著斑形成無論雌激素存在與否都有抑制作用。結論:NESC、EuESC和EcESC三種細胞運動能力逐漸升高,而尼古丁通過抑制RhoA的活性影響細胞的運動能力而降低子宮內膜異位癥的發(fā)病風險。
綜上所述,
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