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文檔簡介
1、目的:體外實驗觀察不同濃度核因子κB受體活化因子配體(RANKL)對大鼠破骨細胞活化T細胞核因子1(NFATc1)、原癌基因c-Src、核因子κB受體活化因子(RANK)mRNA表達的影響;研究破骨細胞中活化T細胞核因子1、原癌基因c-src和核因子κB受體活化因子在骨質疏松中的發(fā)病過程中基因的表達是否與核因子κB受體活化因子配體的濃度存在相關性。
方法:實驗采用5周齡SD大鼠獲取骨髓基質細胞(BMSC),加入集落刺激因子(M
2、-CSF)及RANKL體外誘導培養(yǎng)破骨細胞,在實驗過程中每組分別加入低、中、高(50ng/ml、75ng/ml、100ng/ml)3種濃度的RANKL及均加入M-CSF(25ng/ml),實驗對照組加入RANKL(0ng/ml)及M-CSF(25ng/ml);培養(yǎng)7天后,采用實時熒光定量PCR法檢測NFATc1、c-Src、RANKmRNA的表達。
結果:NFATc1、c-Src、RANK基因表達與RANKL的濃度呈依賴性,與
3、實驗對照組M-CSF(25ng/ml)+RANKL(0ng/ml)組相比,中、高濃度的RANKL均促進了NFATc1及c-SrcmRNA(p<0.01,p<0.01)的表達;與M-CSF(25ng/ml)+RANKL(0ng/ml)組相比,低、中、高濃度的RANKL均促進了RANKmRNA(p<0.01,p<0.01和p<0.01)的表達;與M-CSF(25ng/ml)+RANKL(50ng/ml)組相比,中、高濃度的RANKL均促進了
4、NFATc1mRNA(p=0.013,p<0.01)的表達;與M-CSF(25ng/ml)+RANKL(50ng/ml)組相比,中、高濃度的RANKL促進了c-SrcmRNA(p<0.01,p<0.01)的表達;與M-CSF(25ng/ml)+RANKL(75ng/ml)組相比,高濃度的RANKL均促進了NFATc1,c-Src和RANK(p<0.01,p<0.01和p<0.01)的基因表達。
結論:RANKL可通過促進了NF
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