實驗高壓電燒傷肺臟組織ICAM-1、VCAM-1、PECAM-1動態(tài)變化及已酮可可堿的干預作用.pdf

1、目的:根據前期所做的實驗研究工作,觀察到實驗高壓電燒傷后動物的大體標本腸系膜、肝臟、深筋膜、腸黏膜、胃黏膜、腎皮質、軟腦膜等的微循環(huán)變化,發(fā)現高壓電不僅引起遠隔器官的微循環(huán)紊亂,而且還引起外周組織微循環(huán)紊亂,從而導致全身性微循環(huán)障礙,進一步引起機體損傷,微觀的表現可以觀察到白細胞沿壁翻滾及黏附、白色微小血栓流動及紅細胞聚集現象等。已有實驗證明黏附分子免疫球蛋白超家族在白細胞沿壁翻滾及早期黏附中起著重要作用。我們設計本實驗旨在通過觀察高壓

2、電燒傷大鼠免疫球蛋白超家族黏附分子ICAM-1、VCAM-1、PECAM-1在肺臟組織的連續(xù)變化,進一步探討高壓電燒傷微循環(huán)紊亂的機制,及己酮可可堿對肺臟組織免疫球蛋白超家族表達的干預,為高壓電燒傷后微循環(huán)障礙防治提供理論依據,盡最大可能的降低病人的死亡率,提高生存率,為臨床用藥提供一定的實驗基礎。
　　 方法:
　　 1實驗動物分組:成年健康雄性SD大鼠(河北醫(yī)科大學動物實驗中心提供,合格證編號(1010160)180

3、只,隨機分成三組,分別為高壓電燒傷實驗組(簡稱實驗組)、高壓電燒傷己酮可可堿(PTX)治療組(簡稱治療組)與假高壓電燒傷組(簡稱對照組),每組各60只。對照組、高壓電燒傷實驗組和PTX治療組又分別分為電擊前、電擊即刻(15min內)(T1)、傷后1小時(T2)、2小時(T3)、4小時(T4)、8小時(T5)6個不同的時相,并有空白對照組,為非電擊非治療組(T0),每組10只。各組分別編號后分籠飼養(yǎng)。
　　 2實驗前準備:大鼠稱重

4、,按大鼠編號記錄在冊。將實驗藥品按實驗需要配成所需濃度。
　　 3高壓電燒傷模型復制:將變壓器及調壓器正確連接待用,用1％戊巴比妥鈉按40mg/kg給藥麻醉大鼠,待麻醉成功后,給予大鼠左上肢、右下肢及胸部備皮,然后將大鼠仰臥于動物絕緣臺上,四肢伸展固定于高壓輸出電路之間,并分別固定1cm2圓形銅制電極片于大鼠的左上肢、右下肢脫毛區(qū),左上肢為入口,右下肢為出口。接通電源調整變壓器輸出電壓10千伏,給予實驗組與治療組實驗動物分別電擊

5、三秒鐘,對照組給予假電,整個過程中無電流通過,其他條件各組均相同。治療組在電擊后即刻腹腔注射1％PTX(按50mg/kg即5ml/kg給藥),對照組及電擊組電擊后立即腹腔給予注射5ml/kg生理鹽水。
　　 4標本采集與保存:將復制成功高壓電燒傷大鼠模型麻醉后開胸,直視下采左上肺,以肺尖組織為代表,收集0.5cm×0.5cm×0.5cm大小心尖組織,做成石蠟切片,保存待用。
　　 5指標檢測:采用免疫組織化學方法分別檢測

6、電燒傷早期不同時相肺臟組織中ICAM-1、VCAM-1、PECAM-1表達情況,及己酮可可堿對三項指標的干預效果。
　　 6實驗數據處理:所有計量資料用SPSS13.0統(tǒng)計軟件進行統(tǒng)計學分析處理,實驗數據均以均數±標準差((X)±s)表示,采用兩因素析因設計的方差分析(ANOVA)對實驗得到數據進行分析,以p＜0.05為有顯著性差異。
　　 結果:肺臟組織中ICAM-1、VCAM-1、PECAM-1的變化;
　　

7、 1對照組組內比較無顯著性差異(p＞0.05)。
　　 2高壓電燒傷后早期實驗組不同時相肺臟組織ICAM-1、VCAM-1、PECAM-1水平高于對照組及電前ICAM-1、VCAM-1、PECAM-1的水平(p＜0.05);其中ICAM-1表達水平是從電擊后15分鐘開始增高,并持續(xù)到8小時;VCAM-1傷后15分鐘開始增多,電擊傷后2小時表達明顯升高,傷后4小時即達到峰值,到傷后8小時有所降低,但仍未恢復電擊前水平;PECA-1

8、傷后4小時表達量達高峰,以后隨時間下降,但到傷后8小時仍高于對照組。
　　 3高壓電燒傷后早期PTX治療組不同時相肺臟組織ICAM-1、VCAM-1、PECAM-1高于對照組及電前肺臟組織ICAM-1、VCAM-1、PECAM-1的水平(p＜0.05),但同一時相較電擊組肺臟組織ICAM-1、VCAM-1、PECAM-1的水平有不同程度下降;其中VCAM-1的表達水平傷后8小時下降明顯,PECAM-1的表達水平在傷后2小時下降明

9、顯;大鼠肺臟組織ICAM-1、VCAM-1、PECAM-1的表達水平在8小時時相治療組與電擊組組間比較有所降低,有顯著性差異(p＞0.05)。
　　 結論:
　　 1實驗高壓電燒傷早期大鼠肺臟組織ICAM-1、VCAM-1、PECAM-1表達均有不同程度升高,在造成微循環(huán)障礙方面有重要作用。
　　 2高壓電燒傷早期PTX治療組ICAM-1、VCAM-1、PECAM-1與實驗組比較明顯降低,但仍高于對照組,PTX治