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文檔簡介
1、 目的:(1)、制作SD大鼠腸粘連模型,通過免疫組化的方法檢測術后第2、5、8天酪氨酸羥化酶(Tyrosine Hydroxylase ,TH)、多巴胺脫羧酶(Dopamine Decarboxylase ,DDC)、多巴胺D2受體(Dopamine D2 Receptor DAD2R)在盲腸的表達,探討多巴胺與術后腸粘連的關系。(2)、通過分別抑制 SD 大鼠腸粘連模型術后的炎癥反應及多巴胺的作用,觀察多巴胺與炎癥介質(zhì)之間的相互作用
2、,探討多巴胺在術后腸粘連形成中的作用機制。方法:該實驗研究分兩部分:(1)、選取SD雄性大鼠96只,隨機分為3組:正常對照組(n=14),假手術組(n=42),腸粘連模型組(n=42)。正常對照組不予處理,假手術組行單純開關腹手術,模型組采用 Ellis 法制備腸粘連模型。假手術組及模型組分別在術后第2、5、8天分批處死,每次每組各14只,正常組動物飼養(yǎng)3天后一次性全部處死,動物處死之前禁食12小時。動物處死后取盲腸,經(jīng)固定、包埋后行免
3、疫組化染色。利用 IPP5.1軟件進行圖像分析,以平均光密度值(OD值)代表各組TH、DDC、DAD2R的表達。應用軟件spss17.0進行統(tǒng)計學分析,通過單因素方差分析檢驗各組間差異性,P<0.05 視為有統(tǒng)計學意義。(2)、將 42只SD雄性大鼠隨機分組3組:A組:生理鹽水組(n=14)、B組:多潘立酮組(n=14)、C組:保泰松組(n=14)。所有大鼠按Ellis法制備成腸粘連模型,術后第二天開始,各組予以相應藥物灌胃。各組藥物分
4、別為:A組予以0.9%的生理鹽水1ml,B組予以0.09%的多潘立酮混懸液1ml (臨床等效劑量),C組予以0.94%的保泰松混懸液1ml(臨床等效劑量)。術后第五天麻醉動物后采血,同時動物處死后取盲腸。各組動物盲腸應用免疫組化方法檢測TH、DDC、DAD2R的表達,并行HE染色觀察其病理變化,同時采用酶聯(lián)免疫法測定所采血液中腫瘤壞死因子-α(tumor necrosis factor-α, TNF-α)、轉(zhuǎn)化生長因子-β1(trans
5、forming growth factor-β1, TGF-β1)、前列腺素E2(prostaglandin E2,PGE2)含量,此外運用電阻法測定白細胞計數(shù)。各組圖像處理及數(shù)據(jù)統(tǒng)計學處理均同實驗第一部分。結果:(1)、模型組術后第2、5、8天所測得的代表 TH、DDC、DAD2R 表達的 OD 值,與正常對照組及假手術組比較均有顯著升高(p<0.05、p<0.01)。表達在術后第2天最高,到第8天基本接近正常對照組表達,呈逐漸降低的
6、過程。(2)、多潘立酮組所測 TGF-β1、TNFα、PGE2、白細胞值均較生理鹽水組低(P<0.05),同時HE染色結果可見相應的變化;保泰松組TH、DDC、DAD2R表達均較生理鹽水組低(P<0.05)。結論:(1)、術后腸粘連形成過程中,TH、 DDC、 DAD2R表達增高,提示多巴胺及其受體參與了術后早期腸粘連的形成。(2)、在術后腸粘連形成過程中,多巴胺與炎癥相互作用,一方面炎癥反應增加了胃腸道多巴胺及其受體表達,進而影響胃腸
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