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文檔簡介
1、中國醫(yī)科大學博士學位論文先天性肛門直腸畸形胚胎發(fā)育、基因表達及遠期生活質量的研究姓名:白玉作申請學位級別:博士專業(yè):兒科學指導教師:王維林2002.4.1腸畸形的致病基因提供線索。③生活質量調查:從身體、心理和社會等方面,調查和評估肛門直腸畸形病人術后30年以上生活質量狀況。(實驗材料動物:Wistar大鼠由中國醫(yī)科大學第二臨床學院醫(yī)學實驗動物中心提供。病例:①標本來源:19例經我科手術治療的先天性肛門直腸畸形患兒,男10例,女9例。年
2、齡2天~3歲。術中無菌條件下取直腸末端后壁腸組織,置于液氮中保存。術中收集后天性肛瘺、直腸外傷等5例無畸形患兒直腸齒狀線上約lon以內水平處腸組織做對照,標本處理同前。②隨訪的8例病人為30年前經我科手術治療的肛門直腸畸形病人。試劑:①原位末端標記細胞凋亡檢測試劑盒購于武漢博士德公司。②逆轉錄試劑盒購于大連寶生物工程公司。③2張芯片由上海博星基因芯片有限責任公司提供的發(fā)育相關基因表達譜芯片,型號:GCs。方法①胚胎發(fā)育:用乙烯硫脲致畸孕
3、鼠產生泄殖腔畸形和無肛畸形胎鼠。胎齡125天一20天的正常及泄殖腔發(fā)育畸形的胎鼠正中矢狀面連續(xù)切片,HE染色,連續(xù)動態(tài)對比觀察泄殖腔及肛門直腸的發(fā)育過程。部分切片TUNEL染色,觀察細胞凋亡的分布。②基因表達:應用RT。PCR方法檢測Hoxdl3基因在16例肛門直腸畸形病人和5例無畸形兒直腸末端的表達水平。應用基因表達譜芯片技術對3例先天性肛門直腸畸形患兒的直腸末端組織和無畸形兒直腸末端組織的基因表達譜進行檢測。③生活質量調查:隨訪8例
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