腺苷信號通路在大鼠單側(cè)輸尿管梗阻后腎纖維化作用機制研究.pdf

1、目的:缺血和缺氧是導(dǎo)致慢性腎臟疾病的重要原因。腺苷作為缺血、缺氧性腎臟纖維化的重要信號分子，也可能是慢性腎臟疾病的一個重要致病因子。本研究檢測了單側(cè)輸尿管梗阻后腎臟腺苷濃度的變化及其相關(guān)致纖維化因子的表達，探索了腺苷信號通路與腎纖維化的相關(guān)性，旨在進一步闡述慢性腎臟發(fā)病機制。
　　方法:選擇清潔級健康雄性SD大鼠32只，隨機分為兩組:假手術(shù)組（對照組）和單側(cè)輸尿管梗阻組（UUO組），每組各16只，分別于手術(shù)后第1、2、3、4周分批

2、處死前抽血，處死后取腎臟樣本，每個時間點在兩組中各取4只。分別用蘇木素伊紅（HE）、Masson染色觀察各時間點大鼠腎組織病理變化以及腎間質(zhì)膠原纖維沉積情況，應(yīng)用圖像分析系統(tǒng)進行半定量分析。采用高效液相色譜法(HPLC)檢測腎組織腺苷水平，Elisa測定試劑盒檢測血肌酐水平，實時定量PCR測定腎間質(zhì)TGF-β1和Ⅰ型前膠原基因mRNA的表達量，免疫組織化學(xué)方法測定腎間質(zhì)TGF-β1的蛋白表達，圖像分析系統(tǒng)對免疫組化結(jié)果進行半定量分析。<

3、br>　　結(jié)果:1、單側(cè)輸尿管梗阻后，實驗組腺苷濃度相比對照組顯著升高（P＜0.05），并且在實驗后第一周達到高峰(P＜0.01)，H&E和Masson染色結(jié)果顯示隨著腺苷濃度顯著增加，腎單位破壞逐漸增多，腎間質(zhì)膠原沉積逐漸增加。2、在單側(cè)輸尿管梗阻后的四個時間點，未見血肌酐水平顯著(P＞0.05)增加。3、實時PCR數(shù)據(jù)和免疫組化分析顯示，在單側(cè)輸尿管梗阻后的四個時間點的TGF-β1和Ⅰ型前膠原的mRNA顯著增加（P＜0.05），免疫

4、組化分析表明在UUO后第二周，其在腎小管上皮細胞表達最多，然后隨著時間推移，其表達逐漸下降，并且隨著UUO時間的延長，TGF-β1的分布從腎小管上皮細胞向腎間質(zhì)轉(zhuǎn)移，進而蔓延至腎小球。
　　結(jié)論:1、腎間質(zhì)纖維化過程中可能存在腎組織持續(xù)低氧，并導(dǎo)致組織內(nèi)腺苷水平升高;2、腺苷含量增高，加速了腎小管損傷、腎間質(zhì)纖維化的發(fā)生、發(fā)展;3、腺苷信號通路可能通過調(diào)節(jié)TGF-β1、α1(Ⅰ)procollagen mRNA表達，干預(yù)RIF的發(fā)