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文檔簡介
1、目的:瓜子金對支氣管哮喘小鼠模型的氣道炎癥和氣道重塑的治療作用以及作用機(jī)制。
方法:將體重約19-23g的BALB/C雄性小鼠60只隨機(jī)分四個組:分別為空白對照組、支氣管哮喘模型組、瓜子金治療組、糖皮質(zhì)激素陽性對照組,每組均15只。除空白對照組外,其余三組小鼠均在第1天、第14天給予致敏,腹腔注射混合液0.2ml/只,即OVA0.02mg/只、氫氧化鋁凝膠0.001g/只。之后在第21天起連續(xù)三天激發(fā)支氣管哮喘,即空白對照組給
2、予生理鹽水霧化吸入,其余三組每組給予配制好的3%OVA霧化吸入,每組每次約30分鐘。實(shí)驗(yàn)第17天至第23天,僅瓜子金治療組和糖皮質(zhì)激素陽性對照組給予相應(yīng)劑量的各組對應(yīng)藥物灌胃。同時,空白對照組和支氣管哮喘模型組給予生理鹽水灌胃。在最后一次霧化吸入結(jié)束24小時后把所有小鼠處死,分別取各組小鼠的BALF和肺組織等標(biāo)本。行ELISA測定各組小鼠的BALF中各種細(xì)胞因子變化。行Diff-Quick染色法觀察各組小鼠BALF中細(xì)胞總數(shù)和各種炎癥細(xì)
3、胞計(jì)數(shù)變化。行HE染色法、PAS染色法觀察各組小鼠支氣管、肺組織的形態(tài)結(jié)構(gòu)變化。用Western Blot法檢測各組小鼠肺組織內(nèi)細(xì)胞核及細(xì)胞漿內(nèi)的核轉(zhuǎn)錄因子NF-kB的表達(dá)情況。
結(jié)果:
(1)支氣管哮喘模型組與空白對照組比較BALF中的IL-4、IL-5、IL-13水平均顯著增高,且炎癥細(xì)胞總數(shù)、各個炎癥細(xì)胞分類計(jì)數(shù)和NF-kB蛋白的表達(dá)均明顯增多(P<0.05);
?。?)瓜子金治療組、糖皮質(zhì)激素陽性對照
4、組與支氣管哮喘模型組相比較上述各個指標(biāo)均可見顯著下降,有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05);
?。?)通過HE、PAS染色法觀察到支氣管哮喘模型組較空白對照組支氣管腔內(nèi)有大量粘液栓,氣道上皮細(xì)胞損壞、杯狀細(xì)胞增殖、基底膜增厚,氣道平滑肌肥大引起肌層增生,且支氣管周圍和管腔內(nèi)有大量炎癥細(xì)胞浸潤。而瓜子金治療組與糖皮質(zhì)激素陽性對照組較支氣管哮喘模型組支氣管腔內(nèi)無明顯粘液栓,浸潤的炎癥細(xì)胞數(shù)也明顯減少,氣道上皮細(xì)胞破壞、杯狀細(xì)胞增殖、基底膜增
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