IFN-γ和IL-17在新生期接種卡介苗抗哮喘中作用及其機制研究.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、本研究分為二部分:
  第一部分、IFN-γ和IL-17在新生期接種BCG抗哮喘中的作用
  目的:建立小鼠哮喘模型、BCG新生期接種、BCG新生期接種后IFN-γ單抗或重組IL-17細胞因子干預模型,分別探討IFN-γ和IL-17在BCG抗哮喘中的作用。
  方法:(1)新生清潔級BALB/c小鼠分為:對照組(control)組,卵白蛋白(OVA)組,BCG/OVA組,BCG/OVA/anti-IFN-γ Ab組和B

2、CG/OVA/rIL-17組,BCG新生期接種后,于第4周和第6周除對照組外分別用OVA致敏,第7周用1%的OVA連續(xù)霧化7天,并于末次霧化后的24小時內(nèi)作相關檢查;(2)觀察BALF中的細胞總數(shù)及其分類計數(shù),用ELISA方法檢測BALF中的細胞因子含量;(3)用HE方法染色并評估肺組織的病理炎癥;(4)用小鼠肺功能儀器檢測它的氣道高反應性。
  結(jié)果:(1)OVA組BALF中細胞總數(shù)、嗜酸性粒細胞、中性粒細胞、淋巴細胞絕對值計數(shù)

3、、炎癥病理評分均明顯高于對照組,BCG/OVA組的上述指標均顯著低于OVA組;(2) BCG新生期接種能顯著降低哮喘小鼠模型的氣道高反應性;(3)OVA組BALF中IL-17明顯高于對照組,BCG新生期接種后能顯著抑制OVA誘導的IL-17,促進IFN-γ產(chǎn)生;(4) BCG/OVA/anti-IFN-γ Ab組的細胞總數(shù),中性粒細胞和淋巴細胞以及嗜酸性粒細胞絕對計數(shù),炎癥病理評分和氣道高反應性較BCG/OVA組顯著降低;(5) BCG

4、/OVA/rIL-17組的中性粒細胞、淋巴細胞絕對計數(shù)和炎癥病理評分和氣道高反應性較BCG/OVA組均明顯升高。
  結(jié)論:(1)新生期BCG接種能抑制哮喘小鼠模型氣道炎癥和,并氣道高反應性誘導IFN-γ產(chǎn)生和抑制IL-17的分泌。(2) BCG新生期接種不能完全抑制氣道炎癥和氣道高反應性與其誘導的IFN-γ產(chǎn)生有關,進一步降低IFN-γ水平可顯著抑制哮喘小鼠模型的氣道炎癥和氣道高反應性。(3) BCG新生期接種抗哮喘作用與其抑制

5、IL-17相關,經(jīng)氣道給重組IL-17后哮喘小鼠模型的氣道炎癥和氣道高反應性增加。
  第二部分、IFN-γ和IL-17在新生期接種BCG抗哮喘中的機制研究
  目的:建立小鼠哮喘模型、BCG新生期接種干預模型、IL-17-/-小鼠哮喘模型、IL-17-/-小鼠新生期接種BCG的干預模型、IFN-γ-/-小鼠哮喘模型,深入探討IFN-γ和IL-17在BCG抗哮喘中的機制。
  方法:(1)新生清潔級C57小鼠分為:對照

6、組(control),卵白蛋白(OVA)組,BCG/OVA組,IL-17-/-對照組(IL-17-/-control)IL-17-/-卵白蛋白(IL-17-/-OVA)組、IL-17-/-BCG/OVA組,IFN-γ-/-對照組(IFN-γ-/-control)、IFN-γ-/-卵白蛋白(IFN-γ-/-OVA)組,BCG新生期接種后,于第4周和第6周除對照組外分別用OVA致敏,第7周用1%的OVA連續(xù)霧化7天,并于末次霧化后的24小時

7、內(nèi)作相關檢查;(2)觀察BALF中的細胞總數(shù)及其分類計數(shù),用ELISA方法檢測BALF中的細胞因子含量;(3)用HE方法染色并評估肺組織的病理炎癥;(4)用小鼠肺功能儀器檢測它的氣道高反應性。
  結(jié)果:(1) OVA組BALF中細胞總數(shù)、嗜酸性粒細胞、中性粒細胞、淋巴細胞絕對計數(shù)、炎癥病理評分和氣道高反應性均明顯高于對照組,BCG/OVA組的上述指標均顯著降低;(2) BCG新生期接種顯著抑制OVA組的IL-17,促進IFN-γ

8、分泌;(3) IL-17-/-OVA組的淋巴細胞、炎癥病理評分和氣道高反應性較IL-17-/-control組顯著升高;接種BCG后氣道炎癥明顯減輕,且IFN-γ水平被顯著抑制;(4)IL-17-/-OVA組的淋巴細胞絕對計數(shù)、炎癥病理評分和氣道高反應性較OVA組顯著降低;(5) IFN-γ-/-OVA組的酸性粒細胞、中性粒細胞、淋巴細胞絕對計數(shù)、炎癥病理評分和氣道高反應性與IFN-γ-/-control相比無顯著差異。
  結(jié)論

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