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文檔簡介
1、目的:隨著我國逐漸進入老齡化社會,老年人相關(guān)疾病呈增多趨勢。骨質(zhì)疏松癥(osteoporosis,OP)與骨性關(guān)節(jié)炎(osteoarthritis,OA)是老年人中最常見的骨與關(guān)節(jié)疾患,近年來人們對OA與OP之間的關(guān)系進行了大量的臨床調(diào)查和動物實驗研究。但是各種研究的結(jié)果報道不盡一致,目前國內(nèi)外醫(yī)學界對OA與OP之間的關(guān)系尚未形成統(tǒng)一的觀點。動物模型實驗已經(jīng)成為研究OA與OP之間關(guān)系的有效方法,手術(shù)是造成OA動物模型的常用手段,但是手術(shù)
2、引起的關(guān)節(jié)破壞與絕經(jīng)后引起的OA并不完全相同。卵巢切除大鼠是最常用來模擬絕經(jīng)后OP的動物模型,最近的研究指出成熟大鼠(5個月以后)卵巢切除后可以被用來制作非創(chuàng)傷性絕經(jīng)后OA模型。盡管我們已經(jīng)知道雌激素對骨和軟骨有著雙重保護作用,但是OP繼發(fā)的OA是否是由于體內(nèi)雌激素缺乏引起的,目前尚不清楚。本課題通過研究去勢后SD大鼠膝關(guān)節(jié)軟骨的病理變化,探討骨質(zhì)疏松與關(guān)節(jié)軟骨退變之間的關(guān)系。
方法:24只六月齡SD(Sprague-Dawl
3、ey)雌性大鼠隨機分為兩組,一組為假手術(shù)組(SHAM),一組為去勢組(OVX),OVX組大鼠用5%水合氯醛(7 ml/kg)腹腔注射麻醉后經(jīng)腹側(cè)手術(shù)入路行雙側(cè)卵巢切除手術(shù),SHAM組經(jīng)相同入路切除雙側(cè)卵巢周圍等量的脂肪組織。3個月后建立骨質(zhì)疏松模型。兩組分別于術(shù)后4、8、12周三個時間點各處死4只大鼠,切取大鼠股骨遠端關(guān)節(jié)面軟骨,剔除周圍韌帶、半月板及軟組織,肉眼下大體觀察關(guān)節(jié)軟骨的外觀,后將股骨外髁去除只保留內(nèi)髁并置于福爾馬林液固定,
4、EDTA液脫鈣,石蠟包埋,垂直軟骨關(guān)節(jié)面行5um病理切片,并行蘇木素-伊紅(HE)及番紅O染色,鏡下觀察股骨內(nèi)髁關(guān)節(jié)軟骨的組織形態(tài)學變化,雙盲法參照Mankin評分標準對軟骨退變程度進行分期,顯微鏡下人工測量關(guān)節(jié)軟骨的厚度、軟骨細胞和軟骨下骨小梁的數(shù)目,比較兩組大鼠在Mankin評分、關(guān)節(jié)軟骨厚度、軟骨細胞和軟骨下骨小梁的稀疏程度之間的差異。
結(jié)果:1.術(shù)后12周,運用雙能X線骨密度測量儀(DEXA)內(nèi)置小動物軟件分別測量兩組
5、大鼠骨密度(BMD),結(jié)果顯示OVX組大鼠股骨、脛骨骨密度分別為0.126±0.018 g/cm2、0.115±0.012 g/cm2,SHAM組大鼠股骨、脛骨骨密度分別為0.187±0.011 g/cm2、0.146±0.011 g/cm2,;與SHAM組比較,OVX組大鼠股骨及脛骨骨密度顯著降低,差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。
2.OVX組術(shù)后12周與1周時進行比較,體質(zhì)量明顯增加(P<0.01),SHAM組體質(zhì)量隨時
6、間沒有明顯變化。
3.大體觀察:4周、8周時,OVX組與SHAM組大鼠的股骨髁可見關(guān)節(jié)面清楚,平整光滑,有光澤,關(guān)節(jié)軟骨無破壞,軟骨表面無潰瘍及縱行裂隙形成,關(guān)節(jié)邊緣無骨贅形成,兩組大鼠的關(guān)節(jié)軟骨未見明顯差異;12周時SHAM組大鼠膝關(guān)節(jié)關(guān)節(jié)面光滑,有光澤,關(guān)節(jié)軟骨無破壞,OVX組關(guān)節(jié)軟骨面顏色變暗,失去光澤,軟骨變薄,顯示出軟骨下骨的顏色,表面粗糙欠平整,有纖維絮狀物生成,軟骨表面局部有潰瘍形成。
4.鏡下觀察:H
7、E及番紅O染色顯示4周時OVX組與SHAM組的軟骨厚度、軟骨細胞數(shù)量相近,關(guān)節(jié)面平整,潮線完整連續(xù),軟骨基質(zhì)著色及軟骨下骨小梁數(shù)目無明顯差異;8周時OVX組大鼠與SHAM組大鼠相比股骨內(nèi)髁關(guān)節(jié)面有局部破壞,不光滑,潮線欠完整連續(xù),軟骨細胞數(shù)量略有減少,軟骨下骨小梁稀疏,關(guān)節(jié)軟骨厚度變薄,軟骨Mankin評分增加;12周時,OVX組大鼠與SHAM組大鼠相比軟骨細胞數(shù)量明顯減少,關(guān)節(jié)面不光滑有剝脫,潮線明顯不連續(xù),軟骨下骨小梁明顯減少,關(guān)節(jié)
8、軟骨厚度明顯變薄,Mankin評分顯著高于SHAM組。
結(jié)論:1.去勢大鼠隨著體內(nèi)雌激素水平的降低,股骨及脛骨骨密度也為之下降,成功的復制了絕經(jīng)后婦女骨質(zhì)疏松癥模型。
2.大鼠去勢后隨著骨密度的降低,出現(xiàn)了股骨內(nèi)髁負重區(qū)軟骨的逐漸破壞,表明骨質(zhì)疏松能夠引起正常軟骨的退變,可能對骨性關(guān)節(jié)炎的發(fā)生起推動作用。
3.大鼠去勢后其膝關(guān)節(jié)軟骨和軟骨下骨在相同的時間點出現(xiàn)了各自的改變,并呈現(xiàn)相同的變化趨勢,由此說明關(guān)節(jié)
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