含S-S聚合物的設(shè)計(jì)、合成及基因轉(zhuǎn)染性能研究.pdf

1、作為病毒載體的替代品，陽離子聚合物型基因載體在基因治療方面顯現(xiàn)出了很大的潛力，它可以與特定基因結(jié)合形成基因復(fù)合物，在內(nèi)吞作用下進(jìn)入細(xì)胞從而實(shí)現(xiàn)基因運(yùn)送。在本論文中，我們設(shè)計(jì)了兩種陽離子聚合物型基因載體:含二硫鍵的聚（β-氨基酯）(PBAE)和羥基化聚乙烯亞胺(PEI)。
　　二硫鍵在細(xì)胞外相對穩(wěn)定，而在細(xì)胞質(zhì)內(nèi)由于存在較高濃度的谷胱甘肽，二硫鍵能夠快速的裂開表現(xiàn)出一種響應(yīng)機(jī)制。據(jù)此我們在設(shè)計(jì)聚（β-氨基酯）時(shí)，首先將二硫鍵引入雙丙

2、烯酸酯單體中，然后通過其與氨基醇的交聯(lián)，制備出64種含有二硫鍵的聚(β-氨基酯)。在進(jìn)行了基因轉(zhuǎn)染和細(xì)胞毒性等相關(guān)實(shí)驗(yàn)后，我們篩選出四個(gè)轉(zhuǎn)染表現(xiàn)很好的樣品:SF7-1、SF7-2、SF7-3和SF7-4。結(jié)果顯示，在A549細(xì)胞中和COS7細(xì)胞中，它們的最高轉(zhuǎn)染效率分別達(dá)到48％、43％、52％、47％和56％、60％、52％、49％，與對照樣品PEI25kDa相比，它們在擁有較高轉(zhuǎn)染效率的同時(shí)具有較低的細(xì)胞毒性，在基因運(yùn)送方面具有很好

3、的應(yīng)用前景。
　　聚乙烯亞胺是目前最有效的陽離子非病毒基因載體之一，通常情況下，分子量較大的PEI的基因轉(zhuǎn)染效率相對較高，但與此同時(shí)它的細(xì)胞毒性也會隨之增大，在一定程度上限制PEI作為基因運(yùn)送載體的應(yīng)用。在本論文中我們將不同比例的N-(2-羥乙基)丙烯酰胺修飾到PEI1800上實(shí)現(xiàn)PEI羥基化，然后將羥基化的PEI1800與具有生物降解性的交聯(lián)劑N，N'-雙（丙烯酰）胱胺反應(yīng)，實(shí)現(xiàn)兩者的交聯(lián)聚合，制備得到一系列羥基化的PEI聚合物