多級(jí)超濾對(duì)黃連解毒湯提取物理化性質(zhì)、溶出度及對(duì)PC12細(xì)胞損傷的保護(hù)作用的影響.pdf

1、中藥復(fù)方是一個(gè)復(fù)雜的體系，成分多種多樣。我們借鑒國(guó)際醫(yī)藥界關(guān)于“植物藥的可比性評(píng)價(jià)”技術(shù)體系，提出：中藥提取物可分為基本活性物質(zhì)與伴生物質(zhì)，基本活性物質(zhì)與其制劑的治療特性完全或大體相關(guān)聯(lián)；伴生物質(zhì)可分為附加和無(wú)活性副產(chǎn)物。附加物質(zhì)可增強(qiáng)或減弱基本活性物質(zhì)的作用；無(wú)活性副產(chǎn)物無(wú)藥理作用，其存在往往是不期望的。對(duì)于同一研究體系而言，由于不同的提取精制方法的原理不同，往往會(huì)導(dǎo)致不同的精制提取物中基本活性物質(zhì)的保留率以及伴生物質(zhì)的除去率有較大的

2、差異；對(duì)于同一研究體系應(yīng)用同一種精制手段（不同的參數(shù)）對(duì)體系的基本物質(zhì)的保留率及伴生物質(zhì)的除去率也有可能不同，但是差異相對(duì)較小，能更大程度地說(shuō)明伴生物質(zhì)的作用。
　　 本課題以黃連解毒湯為研究對(duì)象，研究了離心及多級(jí)超濾對(duì)其有效成分（梔子苷、黃芩苷、鹽酸巴馬汀和鹽酸小檗堿）含量、溶出度、體系的物理化學(xué)參數(shù)(pH、濁度、黏度和電導(dǎo)率)、高分子物質(zhì)的含量（蛋白質(zhì)、果膠及淀粉）及藥效的影響，通過(guò)探討這些變化與方中有效成分及伴生物質(zhì)的改變

3、的關(guān)系從而為中藥復(fù)方分離精制技術(shù)（尤其是膜分離技術(shù)）建立合理的評(píng)價(jià)體系提供一定的理論依據(jù)。
　　 課題研究?jī)?nèi)容、方法及結(jié)果如下：
　　 (1)參照2010版藥典對(duì)黃連解毒湯離心及多級(jí)膜處理樣品進(jìn)行了固含率的測(cè)定。結(jié)果：離心液、pes-5w透過(guò)液、pes-3w透過(guò)液、pes-2w透過(guò)液、pes-1w透過(guò)液和pes-6k透過(guò)液的固含率依次為19.451、16.884、16.313、15.040、13.534、12.894。<

4、br>　　 (2)采用電化學(xué)法對(duì)黃連解毒湯離心及多級(jí)膜處理樣品理化性質(zhì)進(jìn)行了測(cè)定。結(jié)果：離心液、pes-5w透過(guò)液、pes-3w透過(guò)液、pes-2w透過(guò)液、pes-1w透過(guò)液和pes-6k透過(guò)液pH值分別為4.002、4.278、4.337、4.431、4.500、4.743;電導(dǎo)率值分別為1.943、2.540、2.630、2.800、3.040、3.740ms/cm;濁度值分別為288.0、73.2、56.9、47.1、40.2、

5、10.9NTU;黏度值無(wú)規(guī)律性，在8.0mpa/s左右；蛋白質(zhì)、果膠、淀粉則在超濾過(guò)程中含量不斷下降。
　　 (3)運(yùn)用HPLC法測(cè)定了黃連解毒湯離心及多級(jí)膜處理樣品中梔子苷、黃芩苷、鹽酸巴馬汀和鹽酸小檗堿的含量。結(jié)果：離心液、pes-5w透過(guò)液、pes-3w透過(guò)液、pes-2w透過(guò)液、pes-1w透過(guò)液和pes-6k透過(guò)液中梔子苷含量分別為0.463、0.518、0.511、0.522、0.560、0.622mg/mL，黃芩苷

6、含量分別為0.468、0.336、0.324、0.263、0.260、0.235mg/mL,鹽酸巴馬汀含量分別為0.194、0.201、0.198、0.200、0.202、0.212mg/mL，鹽酸鹽酸小檗堿含量分別為0.789、0.693、0.704、0.622、0.630、0.618mg/mL。
　　 (4)對(duì)黃連解毒湯離心及多級(jí)膜處理樣品的HPLC特征圖譜進(jìn)行了研究，比較了各樣品之間化學(xué)成分的組成和含量的變化。結(jié)果：經(jīng)過(guò)離

7、心及多級(jí)超濾后各樣品中有效成分含量雖然發(fā)生了一定的改變，但有效成分的組成變化較小。
　　 (5)采用小杯法研究了離心及多級(jí)超濾對(duì)黃連解毒湯中梔子苷、黃芩苷、鹽酸巴馬汀和鹽酸小檗堿的溶出度的影響。結(jié)果：這四種物質(zhì)的溶出度曲線變化趨勢(shì)各不相同。
　　 (6)研究了黃連解毒湯離心及多級(jí)膜處理樣品對(duì)PC12細(xì)胞損傷的影響。結(jié)果：pes-5w透過(guò)液樣品對(duì)損傷細(xì)胞的保護(hù)作用最好。
　　 本論文的創(chuàng)新之處：
　　 (1

8、)首次用濁度值這個(gè)物理參數(shù)來(lái)宏觀的衡量黃連解毒湯復(fù)方中的微粒的多少，并確定了超濾膜處理黃連解毒湯的過(guò)膜溫度。
　　 (2)首次采用某種超濾膜的5種不同的相對(duì)截留分子量處理復(fù)方，即首次用5種不同相對(duì)截留分子量的pes膜處理黃連解毒湯。
　　 (3)首次運(yùn)用HPLC特征圖譜研究了不同截留分子量pes膜對(duì)黃連解毒湯體系中化學(xué)成分含量及組成的影響。
　　 (4)首次同時(shí)以梔子苷、黃芩苷、鹽酸巴馬汀和鹽酸小檗堿為指標(biāo)，研究