維醫(yī)異常黏液質型陽痿病證模型大鼠性腺軸與NO-cGMP通路改變的實驗研究.pdf

1、目的:研究維醫(yī)異常黏液質型陽痿病證大鼠性腺軸的形態(tài)學改變，以及陰莖組織中NO-cGMP通路關鍵指標的變化，探索維醫(yī)異常黏液質型陽痿病證的生殖生物學基礎。
　　方法:取70只性功能正常的雄性SD大鼠，從中隨機取10只為正常對照組，余60只為造模組，以濕寒性飼料+濕寒性環(huán)境進行符合干預，動態(tài)觀測大鼠生物學表征，證侯模型建立后，以APO勃起實驗結合交配實驗方法篩選陽痿病證模型，并將病證組隨機分為病證模型組(A1)和病證藥物干預組(A3)

2、;證候組分為證侯模型組(B1)和證侯藥物干預組(B3)，對證維藥干預3周，全程動態(tài)觀測其生物學表征、勃起功能和性行為能力。實驗終結時，分別取小丘腦、垂體、睪丸和陰莖組織，光鏡和電鏡下對性腺軸進行形態(tài)學觀察;對陰莖組織進行特殊染色及NO-cGMP通路關鍵指標的免疫組化染色后，進行光鏡下觀測。
　　結果:
　　(1)生物學表征觀測結果:模型組隨著造模時間延長逐漸出現少動，毛發(fā)亂無光澤，小便清、淡，大便軟不成形，舌苔白膩舌質暗，體

3、重增長緩慢，飲食量顯著增多，飲水量顯著減少，尿和大便量顯著增多等表現。經伊木薩克片對證干預后得到有效調整。
　　(2) APO實驗與交配實驗結果:模型組造模因素干預后，隨著時間延長，勃起潛伏期顯著增加，勃起次數顯著減少。同時爬背潛伏期、插入潛伏期、射精潛伏期顯著增加，而爬背次數、插入次數、射精次數顯著減少，逐漸出現ED，ED率為48.33％;經對證維藥伊木薩克片干預后，其勃起潛伏期顯著減少，勃起次數顯著增加，爬背潛伏期、插入潛伏期

4、、射精潛伏期顯著減少，而爬背次數、插入次數、射精次數顯著增加。
　　(3)性腺軸形態(tài)學觀察結果:光鏡下可見，A1、B1組下丘腦、垂體出現明顯水腫，睪丸生精細胞與精子數量明顯減少，A3、B3組水腫明顯減輕，睪丸生精細胞與精子數量明顯增多，與N組無明顯差異。電鏡下，A1、B1組下丘腦神經元與神經膠質細胞有明顯形態(tài)改變，垂體間隙增寬，睪丸各級生精細胞細胞形態(tài)改變、數量減少。A3、 B3組下丘腦、垂體和睪丸均有不同程度的修復。
　　

5、(4)陰莖組織形態(tài)學結果，A1、B1組陰莖組織出現明顯水腫，A3、B3組則明顯減輕;VG染色與Masson染色結果顯示，陰莖組織平滑肌/膠原纖維比值A1、B1組均顯著低于N組(P＜0.05)，A3、B3組顯著高于A1、B1組(P＜0.05)，低于N組(P＜0.05)。
　　(5)免疫組化結果，eNOS、nNOS表達在A1、B1組均顯著低于N組(P＜0.05)，A3、B3組顯著高于A1、B1組(P＜0.05)，與N組間比較，nNOS

6、的表達存在顯著差異(P＜0.05)，eNOS的表達則無顯著性差異(P＞0.05);iNOS表達A1、B1組顯著高于N組(P＜0.05)，A3、B3組顯著低于A1、B1組(P＜0.05)，同時可見，A3組iNOS表達高于N組(P＜0.05)，而B3組與N組見無顯著性差異(P＞0.05)。cGMP的表達A1、B1組低于N組(P＜0.05)，A3、B3組則顯著高于A1、B1組(P＜0.05)，與N組比較，A3組表達低于N組(P＜0.05)，B

7、3組與N組間無顯著性差異（P＞0.05）。PDE5的表達在A1、B1組顯著高于N組(P＜0.05)，A3、B3組則顯著低于A1、B1組(P＜0.05)，但高于N組(P＜0.05)。
　　結論:
　　(1)維醫(yī)異常黏液質型陽痿病證與證侯大鼠模型，其生物學表征高度與維醫(yī)臨床證侯特點相吻合，經證藥物伊木薩克片干預結果表明，該病證動物模型具有較好的科學性、可靠性和穩(wěn)定性。
　　(2)維醫(yī)異常黏液質型陽痿病證與證候下丘腦、垂體和

8、睪丸發(fā)生的水腫等病理性改變可能是該病證性腺軸相關激素紊亂的組織病理學基礎。
　　(3) NO-cGMP通路的下調可能是異常黏液質型陽痿病證發(fā)生發(fā)展的關鍵環(huán)節(jié)，其中eNOS、nNOS、cGMP等功能因子的變化發(fā)揮著關鍵作用，同時PDE5的變化亦是其關鍵因素。
　　(4)對證維藥伊木薩克片對異常黏液質型陽痿病證的治療作用可能和促進性腺軸病理學改變的修復作用有關。
　　(5)伊木薩克片治療異常黏液質型陽痿病證的作用機制可能和