臭氧水對兔膝骨性關節(jié)炎作用的實驗研究.pdf

1、研究背景：骨性關節(jié)炎(Osteoarthritis，OA)作為中老年人群中發(fā)病率較高的一種慢性、退行性疾病，最常累及膝關節(jié)，致殘率高，給患者帶來極大痛苦。其發(fā)病機制相當復雜，由于機械性、生物性等多方面因素的影響，OA以關節(jié)軟骨的病變最為突出。而滑膜炎是OA諸多炎癥反應的主要表現之一，可引起骨性關節(jié)炎早期的臨床癥狀，進而影響關節(jié)軟骨的改變。目前針對膝骨性關節(jié)炎的治療方法多種多樣，臨床上主要應用非阿片類消炎止痛藥或阿片類藥物緩解疼痛，關節(jié)腔

2、內注射玻璃酸鈉或臭氧改善骨關節(jié)炎癥狀，手術治療用于晚期及嚴重疼痛的骨關節(jié)炎患者，其他各種治療方法，包括中醫(yī)療法也常被應用于該疾病。盡管臨床上臭氧水用于膝骨性關節(jié)炎效果明確，但與其相應的實驗研究未見報道。本實驗通過關節(jié)腔注射臭氧水對兔膝骨性關節(jié)炎模型進行干預，對比實驗動物關節(jié)活動度的變化，觀察關節(jié)軟骨及滑膜的病理變化，利用酶聯免疫吸附測定法檢測各組實驗動物關節(jié)滑膜中IL-6、TNF-α和VEGF的含量，評價臭氧水對兔膝骨性關節(jié)炎的影響，對

3、其作用機制進行探討。
　　目的：觀察臭氧水對兔膝關節(jié)軟骨和滑膜的作用，及對滑膜中 IL-6、TNF-α和VEGF的影響，分析臭氧水治療膝骨性關節(jié)炎的相關機制。
　　方法：
　　1.動物模型建立與干預新西蘭兔32只，雌雄各半，采用隨機數字表法分為4組,A組：空白對照組，B組：模型對照組，C組：臭氧水對照組，D組：臭氧水治療組，每組8只。A組不予任何處理；B組僅造兔骨關節(jié)炎模型；C組僅關節(jié)腔注射20μg/ml臭氧水2ml,

4、每周1次,共3次；D組造模成功后，臭氧水注射方法同C組。
　　2.軟骨和滑膜標本 HE染色觀察軟骨和滑膜標本制作成病理切片,分別在光鏡下觀察軟骨組織學形態(tài)以及滑膜組織有無細胞增生及組織變性、結構是否完整、是否有炎性細胞浸入、有無細胞壞死。
　　3.ELISA法檢測兔膝關節(jié)滑膜中IL-6、TNF-α及VEGF在不同分組中表達含量有無差異。
　　4.統計學處理相關實驗數據采用SPSS17.0統計學軟件處理，檢驗水準α=0.

5、05，P≤0.05表示差異有統計學意義。
　　結果：
　　1.膝關節(jié)活動度觀察 B、D組造模后關節(jié)活動度均小于A組（P<0.05)；B組處死時與造模后比較差異無統計學意義（P>0.05）；D組處死時較B組處死時關節(jié)活動度大（P<0.05)；D組處死時較造模后關節(jié)活動度增大（P<0.05)。
　　2.膝關節(jié)滑膜厚度觀察與A組相比，B、D組滑膜明顯更厚(P<0.05)；C組與A組差別無統計學意義；D組滑膜較B組薄(P<0.

6、05）。
　　3.軟骨和滑膜標本HE染色觀察 A組軟骨表面完整，四層結構清晰，細胞排列整齊，潮線完整；B組軟骨表面粗糙不規(guī)則，可見明顯裂隙，軟骨層變薄，細胞數量減少,排列紊亂；C組軟骨各層結構清晰，軟骨細胞排列較整齊，軟骨纖維細胞未見增多；D組軟骨表面不規(guī)則缺損較B組為輕，軟骨細胞數量減少，散在分布，結構排列尚整齊。A組滑膜組織未見充血水腫，滑膜細胞無增生現象，滑膜組織結構正常；B組滑膜組織失去正常結構，細胞增生明顯,炎性細胞浸潤

7、嚴重,血管增生充血，滑膜厚度較A組顯著增加；C組滑膜無炎癥表現；D組滑膜組織炎癥細胞減少，充血水腫減輕，滑膜厚度較B組明顯降低。
　　4. ELISA法檢測結果與A組相比,C組滑膜組織IL-6、TNF-α和VEGF表達增高不明顯（P>0.05），B、D兩組滑膜組織IL-6、TNF-α和VEGF表達增高(P<0.05)；D組較B組滑膜中IL-6、TNF-α、VEGF表達降低(P<0.05）。
　　結論：
　　1.關節(jié)腔注