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文檔簡介
1、目的:
RNA依賴性蛋白激酶PKR在先天免疫反應、細胞生長、細胞分化、信號傳導和細胞凋亡中起著重要的作用。PKR的激活過程已經被研究了很多年,但是仍然沒有統(tǒng)一的結論,為了進一步認識PKR的激活機制和亞基識別機制,我們進行了以下實驗。
方法:
應用PET-28a載體表達了不同長度及突變位點的RNA依賴性蛋白激酶PKR,對其進行純化,并用蛋白結晶的方法解析了突變形式的PKR激酶結構域PKR-KD的晶
2、體結構(分辨率達到了2.9(A)),通過超速離心實驗,電荷表面分布圖等方法解釋PKR-KD的二聚體狀態(tài)。
結果:
解析了突變形式的PKR激酶結構域PKR-KD的晶體結構(分辨率達到了2.9(A))。PKR-KD的整體結構與前邊他人報道的是大體一致的,這個晶體結構呈現(xiàn)了一種典型的背靠背式二聚體形式和一種新詮釋的面對面式二聚體形式,通過超速離心分析實驗,電荷表面分布圖以及PKR-KD和eIF2α復合物的結構模型都
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