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文檔簡介
1、目的:在細胞水平明確白花丹素對舌癌SCC9細胞放射增敏效應的作用及主要機制。
方法:1.體外培養(yǎng)舌癌SCC9細胞,采用臨床上X線直線加速器分別以五種不同劑量(0 Gy、2 Gy、4 Gy、6 Gy、8Gy)照射舌癌SCC9細胞,放射后繼續(xù)培養(yǎng)6h、12h、24h、48h。2、應用流式細胞術檢測各組細胞周期,選取最佳實驗時間及劑量作為實驗中放射處理條件。3.運用MTT法檢測不同濃度的白花丹素(0.5、1.0、2.0、4.0、8.
2、00μm/L)對舌癌SCC9細胞的毒性作用,并計算最佳實驗濃度IC10。4.設空白組、放射組、白花丹素組、聯(lián)合組(白花丹素+放射),同時設平行組加 ATM抑制劑 KU-55933作比較;5.流式細胞術檢測各組舌癌SCC9細胞的凋亡率。6. Western Blot檢測舌癌SCC9細胞中ATM、p-ATM、NF-κB的表達變化。
結果:1.流式細胞術確定實驗條件為:放射劑量為4Gy,放射后培養(yǎng)時間為24h。2.MTT檢測表明:白
3、花丹素對舌癌 SCC9細胞增殖抑制濃度 IC10為1.34μm/L(24h)。3.流式細胞術檢測凋亡結果為:白花丹素聯(lián)合放療后,舌癌SCC9細胞的凋亡率明顯增高(P<0.05)。4.Western Blot檢測顯示,白花丹素能夠抑制放射激活ATM、NF-κB蛋白表達,加入KU-55933有效抑制ATM蛋白的活化時,各組中NF-κB蛋白表達無明顯變化。
結論:抑制ATM/NF-κB信號通路是白花丹素提高舌癌細胞的放療敏感性的主要
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