長鏈非編碼RNA ATB對人腦膠質瘤細胞惡性生物學特征的影響.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、目的:
  采用重組質粒轉染技術(sh-RNA),敲減膠質瘤細胞內長鏈非編碼RNA ATB基因后,闡述長鏈非編碼RNA ATB對人腦膠質瘤細胞惡性生物學特征的影響。
  方法:
  采用Real-time PCR方法檢測79例不同惡性程度人膠質瘤組織、15例正常腦組織(來自顱腦損傷術后患者)、人腦膠質瘤細胞系中長鏈非編碼RNA ATB的表達情況。采用sh-RNA技術構建相關細胞模型,利用細胞增殖計數法(CCK-8)檢測

2、細胞增殖活力,克隆形成實驗檢測細胞克隆形成能力,劃痕實驗及Transwell方法檢測膠質瘤細胞的侵襲能力,我們進一步用體內實驗(即裸鼠成瘤實驗)來探究ATB基因在裸鼠體內的功能作用,用成瘤組織做Western blot法和免疫組化分別分析成瘤組織中PCNA蛋白和Ki-67蛋白的表達情況,進而檢測成瘤組織增殖能力的情況。觀察并探究長鏈非編碼RNA ATB基因對人膠質瘤細胞惡性生物學行為的影響。
  結果:
  與正常腦組織相比

3、,ATB基因在膠質瘤組織以及細胞中均是表達上調。敲減膠質瘤細胞內的長鏈非編碼RNA ATB基因后可抑制人腦膠質瘤細胞的增殖、遷移及侵襲能力。裸鼠成瘤實驗表明敲減膠質瘤細胞內的長鏈非編碼RNA ATB基因后,可明顯抑制裸鼠的成瘤能力,包括裸鼠成瘤體積和成瘤重量均小于實驗組,Western blot法和免疫組化結果表明實驗組中成瘤組織中的PCNA蛋白和Ki-67染色陽性數目明顯減少,表明實驗組裸鼠成瘤增殖能力明顯低于對照組。
  結論

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