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文檔簡介
1、目的:本實驗采用醋酸鉛溶液誘導建立PC-12細胞鉛中毒的模型,觀察不同濃度醋酸鉛對具有神經元特性的PC-12細胞的影響,和鉛中毒神經系統(tǒng)損傷進展中氧化應激相關指標的變化,以及驅鉛扶正方含藥血清對其的干預效應,以探討驅鉛扶正方防治鉛中毒神經系統(tǒng)損傷的作用機制。
方法:將PC-12細胞設置為不同的分組:空白組、陰性對照組、陽性對照組、醋酸鉛染毒組以及含藥血清組。用不同濃度的醋酸鉛溶液分別對PC-12細胞進行刺激,通過MTT法檢測醋
2、酸鉛染毒組細胞生存率。用采血時間為末次給藥后2小時,10%濃度的驅鉛扶正方含藥血清對醋酸鉛溶液誘導之PC-12細胞進行干預,用MTT法進行檢測,觀察陽性對照組和含藥血清組PC-12細胞生存率的變化,用黃嘌呤氧化酶法和硫巴比妥酸鹽法分別檢測各組PC-12細胞SOD活性和MDA含量的變化。
結果:1.醋酸鉛溶液對PC-12細胞生存率的影響:濃度越高的醋酸鉛溶液對PC-12細胞的刺激作用越大,其細胞的生存率越低。醋酸鉛染毒組用100
3、?l濃度為100?mol/L的醋酸鉛溶液對PC-12細胞進行24小時的刺激,其細胞生存率接近50%(46.7%);2.驅鉛扶正方含藥血清對PC-12細胞的影響:驅鉛扶正方之含藥血清的采血時間點為最末次給藥后2小時,且濃度為10%時,其能對染鉛之PC-12細胞產生最明顯的增殖作用;3.與氧化應激相關的指標在染鉛細胞中的變化:醋酸鉛染毒組的PC-12細胞經醋酸鉛溶液的刺激后,SOD活性出現(xiàn)明顯的下降趨勢,MDA的含量出現(xiàn)明顯的增多;含藥血清
4、組的SOD活性出現(xiàn)很明顯的提高,MDA的含量開始顯著下降;陽性對照組中SOD活性、MDA含量均有一定的變化;4.氧化應激與神經系統(tǒng)損傷的關系:與陰性對照組相比,醋酸鉛染毒組的SOD活性有了明顯的降低,其MDA的含量有了很明顯的升高,具有顯著的差異(P<0.01);相較于醋酸鉛染毒組,陽性對照組的SOD的活性明表現(xiàn)出上升趨勢,MDA含量有顯著的下降(P<0.01),而與醋酸鉛染毒組相比較,含藥血清組的SOD活力出現(xiàn)明顯上升,MDA的含量出
5、現(xiàn)很明顯的上升(P<0.01),且與陽性對照組相比,含藥血清組的SOD活力出現(xiàn)更加顯著的上升,MDA含量出現(xiàn)更加顯著的降低(P<0.01)。
結論:1.建立PC-12細胞鉛中毒模型,可選用100?l濃度為100?mol/L醋酸鉛刺激24h的標準,達到細胞半數抑制率;2.驅鉛扶正方含藥血清在濃度為10%時,并且于末次給藥后2 h采血,使染鉛PC-12細胞增殖最為明顯;3.對鉛中毒所引起的神經系統(tǒng)的損傷,驅鉛扶正方能起到有效的治療
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