利用茶堿誘導(dǎo)性RNA干擾開(kāi)關(guān)定量研究lncRNA TINCR在膀胱癌的表達(dá)及功能.pdf_第1頁(yè)
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1、背景及目的:
  膀胱癌是常見(jiàn)且復(fù)雜的惡性腫瘤,盡管近年膀胱癌預(yù)測(cè)及研究模型已經(jīng)取得巨大進(jìn)展,但為了進(jìn)一步提高檢測(cè)工具的特異性及可信性,更多全新的生物標(biāo)記急需被補(bǔ)充。研究顯示lncRNAs與多種癌癥的發(fā)生發(fā)展密切相關(guān),其中l(wèi)ncRNA TINCR是引導(dǎo)上皮細(xì)胞分化過(guò)程中重要的調(diào)節(jié)性非編碼RNA,同時(shí)其被發(fā)現(xiàn)與消化道腫瘤發(fā)生發(fā)展相關(guān),能夠影響相關(guān)癌癥惡性表型。因此本實(shí)驗(yàn)研究將探討TINCR在膀胱癌組織及細(xì)胞的表達(dá)水平,分析其在膀胱癌

2、細(xì)胞中的潛在功能。為了全面且準(zhǔn)確地研究TINCR相關(guān)功能,我們利用合成生物學(xué)技術(shù)構(gòu)建了茶堿誘導(dǎo)性RNA干擾開(kāi)關(guān)系統(tǒng),定量調(diào)控TINCR基因水平后驗(yàn)證起其在膀胱癌細(xì)胞的作用機(jī)制。從而進(jìn)一步認(rèn)識(shí)膀胱癌的分子網(wǎng)絡(luò),為膀胱癌精準(zhǔn)醫(yī)療提供新的研究基礎(chǔ)。
  方法:
  利用實(shí)時(shí)熒光定量PCR檢測(cè)TINCR在49對(duì)膀胱癌組織樣本及2個(gè)膀胱癌細(xì)胞系中的相對(duì)表達(dá)量,分析其與臨床病理特征的關(guān)聯(lián)。利用siRNA干擾技術(shù)下調(diào)膀胱癌細(xì)胞的TINCR

3、表達(dá)水平后,分別檢測(cè)細(xì)胞增殖和凋亡功能的改變。進(jìn)一步通過(guò)茶堿誘導(dǎo)性RNA干擾開(kāi)關(guān)系統(tǒng)調(diào)控膀胱癌細(xì)胞的TINCR表達(dá)水平,分別檢測(cè)開(kāi)關(guān)系統(tǒng)對(duì)細(xì)胞增殖和凋亡功能的改變。
  結(jié)果:
  膀胱癌組織中的TINCR表達(dá)水平高于癌旁組織(P=0.023),且其與腫瘤原發(fā)灶有關(guān)(P=0.035),同時(shí)膀胱癌細(xì)胞5637(P=0.026)及SW780(P<0.01)的TINCR表達(dá)水平高于永生化膀胱上皮細(xì)胞SV-HUC-1。si-TINC

4、R能夠有效下調(diào)TINCR表達(dá)水平,且能夠抑制膀胱癌細(xì)胞的增殖并促進(jìn)膀胱癌細(xì)胞的凋亡。茶堿誘導(dǎo)性 RNA干擾開(kāi)關(guān)系統(tǒng)能夠定量下調(diào)TINCR表達(dá)水平,并且利用開(kāi)或關(guān)元件可“打開(kāi)”或者“關(guān)閉”TINCR的下調(diào)引起的膀胱癌惡性表型改變。
  結(jié)論:
  LncRNA TINCR在膀胱癌中可能發(fā)揮著促癌基因的作用,利用茶堿誘導(dǎo)性RNA干擾開(kāi)關(guān)系統(tǒng)能夠定量調(diào)控TINCR的表達(dá)水平,精確地驗(yàn)證其在膀胱癌的功能,充分說(shuō)明TINCR或許能夠作

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