產(chǎn)抑菌活性物質(zhì)微生物的篩選、鑒定及抑菌活性研究.pdf

1、放線菌由于其代謝產(chǎn)物的多樣性，尤其是抗生素類代謝產(chǎn)物在疾病治療中的應(yīng)用而備受關(guān)注，本文旨從不同生境中篩選分離放線菌，并對篩選獲得的放線菌的代謝產(chǎn)物進行初步抗菌活性和細胞毒性研究。
　　本文對不同生態(tài)環(huán)境（土壤、海洋）采用相應(yīng)的篩選方法和分離培養(yǎng)基，并以50 ug/ml重鉻酸鉀等作為細菌、真菌抑制劑，共分離得到34株放線菌。實驗中采用瓊脂塊擴散對峙法對得到放線菌進行初步篩選，最終選出3株具有一定抗菌活性的放線菌，通過分子生物學(xué)16S

2、 rDNA測序法對分離得到部分放線菌進行測序，將測序結(jié)果在NCBI網(wǎng)絡(luò)上進行序列BLAST比對，結(jié)果顯示篩選到的這3株放線菌類屬于分別屬于 Nocardia asteroides X1、Micromonospora inyonensis X2和Micromonospora agamiensis X3。對其中一株屬于星狀諾卡氏菌屬的菌株活性較好，并通過鑒定其分離地位命名為Nocardia asteroids X1。對Nocardia as

3、teroids X1進行不同培養(yǎng)基配方發(fā)酵，以研究該菌胞外和胞內(nèi)的抑菌活性物質(zhì)的抑菌效果，結(jié)果表明：Nocardia asteroids X1胞外和胞內(nèi)物質(zhì)對Staphylococous，Bacillus和Candia Albicans都有一定的抑菌效果。
　　實驗中除采用瓊脂塊對峙法測定所得放線菌對病原菌的抑菌活性，另運用CCK-8法測定放線菌發(fā)酵粗產(chǎn)物對腫瘤細胞A549的毒性，結(jié)果得到3株具有抗菌活性的放線菌。
　　最后