簡介：目的研究免疫耐受期、抗病毒治療和停藥復發(fā)的慢性乙型病毒性肝炎患者外周血中HBV特異性CD8T細胞的水平及免疫功能，探討停藥復發(fā)患者短時間內出現(xiàn)嚴重肝損害的可能原因。方法1研究對象收集2014年5月至2014年12月就診于南昌大學第一附屬醫(yī)院傳染科的CHB患者111例，經(jīng)HLAA2組織分型得到HLAA249例，分成三組免疫耐受組15例，男11例，女4例，平均288±83歲，均為免疫耐受期患者（即ALT正常、HBEAG陽性、HBVDNA持續(xù)高水平、肝組織沒有或僅有輕微炎癥）；抗病毒治療組20例，男14例，女6例，平均410±143歲，為經(jīng)過抗病毒治療后HBVDNA持續(xù)陰性6個月以上；停藥復發(fā)組14例，男10例，女4例，平均449±112歲，為經(jīng)過核苷（酸）類似物抗病毒治療HBVDNA轉陰至少6個月以上而停藥復發(fā)者。所有患者均符合2010年版慢性乙型肝炎防治指南中確定的診斷標準；均排外合并藥物、毒物、酒精、其他病毒、遺傳代謝性疾病等所致肝損者。收集健康者25例，經(jīng)分型得到HLAA2者8例，男5例，女3例，平均年齡359±92歲，作為陰性對照組；排除HAV、HBV、HCV、HDV、HEV及HIV等感染。2實驗方法收集受試者HBVDNA、HBEAG、丙氨酸氨基轉移酶（ALT）等臨床指標。HBVDNA的檢測采用實時熒光定量PCR法，血清HBEAG采用雅培AXSYM全自動化學發(fā)光免疫分析儀檢測，ALT采用日立7600型全自動生化分析檢測；采用流式細胞術進行HLAA2分型；采用MHC五聚體流式細胞術檢測HLAA2陽性患者HBCAG1827特異性CD8T細胞的數(shù)量；分離外周血單個核細胞（PBMC），采用ELISPOT檢測HBV特異性CTL分泌IFNΓ、TNFΑ等細胞因子功能。分析各組特異性T細胞數(shù)量及分泌功能之間的差異，及它們與HBVDNA、HBEAG之間的相關性。結果（1）免疫耐受組患者HBV特異性CD8T細胞數(shù)量及免疫功能明顯低于抗病毒治療組，差異有統(tǒng)計學意義（P（2）在免疫耐受組患者，HBV特異性CD8T細胞的數(shù)量與血清HBVDNA滴度、HBEAG之間呈明顯的負相關（R－0882，P（3）在抗病毒治療組患者，HBV特異性CD8T細胞的數(shù)量增多，且隨HBVDNA陰轉時間延長、HBEAG水平的下降而增強，恢復峰值出現(xiàn)在HBVDNA轉陰1年左右，之后隨陰轉時間延長而表現(xiàn)出降低趨勢，并維持在較低水平。（4）停藥復發(fā)組患者HBV特異性CD8T細胞數(shù)量及免疫功能均高于抗病毒治療組（P（5）三組患者HBV特異性CD8T細胞的數(shù)量及免疫功能均高于健康對照組，差異有統(tǒng)計學意義（P結論CHB患者HBV特異性CD8T細胞的數(shù)量減少及免疫功能受損，可能與T細胞長期暴露在大量HBV抗原環(huán)境中導致T細胞耗竭有關；抗病毒治療能使HBV特異性T細胞的水平及功能得到恢復，但一味的抗病毒治療可能不利于機體特異性抗病毒免疫的維持；停藥復發(fā)患者短時間內出現(xiàn)肝損害，并且肝損害往往較重，可能與HBV特異性T細胞功能恢復和記憶性T淋巴細胞受反彈的HBV的刺激短時間內產生大量效應性T淋巴細胞導致肝細胞大量損傷壞死有關。

簡介：湖南醫(yī)科大學博士學位論文EB病毒LMP1通過核轉錄因子NFKB在鼻咽癌變中的意義姓名廖偉申請學位級別博士專業(yè)病理生理腫瘤學指導教師曹亞200061廖偉博士學位論支湖南醫(yī)科走學中文蜘I要助病毒LMPL通過核轉錄因子NFKB在鼻咽癌變中的意義博士生廖偉指導老師蕾亞教授W毪知竄㈡目前認為，鼻咽癌是遺傳和環(huán)境因素多方面共同作用的疾病盡管對其發(fā)病的分子機制進行了很多的研究，但至今尚未發(fā)現(xiàn)與鼻咽癌癌變特異相關的基因而在環(huán)境影響因素方面，髓病毒E爭STEINB塒VIRUS，EBV已被肯定與鼻咽癌的發(fā)病具有相關性EB病毒是一種DNA致瘤病毒在它犏碼的基因中，LMPL被確證唯一具有瘤基因功能LMPI是一個由386個氮基破殘基組成的跨膜蛋白，與信號傳導有密切聯(lián)系的是該蛋白由2∞個氨基蕞殘基構成的羧基靖胞漿域LMPI的生舶學功能涉及到細胞轉化、細胞凋亡和細胞分化的各個方面目前認為，這些功能的發(fā)揮都可能與LMP所介導的信號傳導途徑相關，其中LMPL通過NFKB調控其靶基因的研究近年來取得了奪人注目的進展NFKB處于LMPL所介導的轉錄調控網(wǎng)絡的樞紐LMPL蛋白至少可以通過兩條途徑磷酸化LKBA，而活化NFKB一條為腫瘤壞死因子相關受體蛋白TUMORNECRESISFA咖RFCFPTORASSOCIATEDFACTOES，TRAFS途徑，另一條為腫瘤壞死因子受體相關死亡結構城TUMORNEC聘SISF∞TORRECEPTORASSOCMTEDDE砒HDOMAINPROTEINTRADD途徑其中TRAFS與CTAR1結合，澈活大約25％的NFKB活性；TRADD與CTAR2結合，75％的NFLCB的活化與此相關當LMPL的六個跨膜結構蛾聚合后，TRAFS和TRADD與LMPI上各自的結構城結合，教活IK激酶，IK激■活化后，促使IKBA磷酸化，活化NFKBNFKB的活化可能與許鄉(xiāng)腫瘤的發(fā)生有關含有VM的逆轉錄病毒具有高度的致瘤性，能誘發(fā)幼鳥的慢襲性腫瘤‘1毪PH65△，一個P65的剪切變異體，當過度表達時，能引起鼠纖維母細胞的瘤性轉化；體內實驗證實，與腫瘤有關的P52蛋白常常C螬有異常，將發(fā)生改變的P52蛋白轉染入鼠纖維母細胞，然后注射入黨疫缺陷小鼠，可觀察到腫瘤的發(fā)生；而在多種實體瘤來源的腫瘤細胞系中發(fā)現(xiàn)有NFLCB高水平活化所有這

簡介：點擊查看更多腺病毒載體介導的HSV-tk基因治療前列腺癌的實驗研究.pdf精彩內容。

簡介：本文對輪狀病毒檢測技術進行了研究。文章以實驗室保存的PCDNA31VP6為模板，進行PCR擴增，以自行構建的包含靶序列的重組質粒PCDNAⅡ220為標準品，梯度系列稀釋后，用于建立縱軸為閾循環(huán)數(shù)，橫軸為模板起始拷貝數(shù)對數(shù)值的外標準曲線。通過實時監(jiān)測各樣本PCR過程中熒光信號的累積，根據(jù)其CT值，對不同樣本中病毒拷貝數(shù)進行定量。分別使用自行建立的熒光定量PCR方法和商售ELISA雙抗體夾心法平行檢測，對熒光定量PCR體系的檢測范圍、靈敏度、特異性以及可重復性等參數(shù)進行了評價。研究表明使用改進的TAQMAN探針技術，成功建立了輪狀病毒VP6特異的熒光定量RTPCR體系，該體系靈敏、特異、重復性好，可用于RV檢測。

簡介：點擊查看更多MicroRNAs在病毒性心肌炎發(fā)病中調控作用的初步研究和新型柯薩奇病毒CVB3減毒株的構建與篩選.pdf精彩內容。

簡介：西北大學碩士學位論文大學生視覺空間認知能力與工作記憶廣度的實驗研究姓名呂長超申請學位級別碩士專業(yè)應用心理學指導教師張富昌20080525ANEXPERIMENTAISTUDYONTHERELATIONSHIPSBETWEENVISUOSPA“AIABILITYANDWORL‘INGMEMORYSPANOFCONEGESTUDENTSABSTRACT11IISSTUDYTESTED514HIGHSCBOOLSTUDENTSWITHVISUOSPATIALWORKINGMEMORYSPAN，DI舀TALWORKINGMEMORYSPAN，LOCALIZATION，F(xiàn)OMCOMPLETION，MENTALMTATION一3DANDTOUCHJNGBLOCKSTESTSNR01L曲RESEARCHINGTHEJFTELATIONSHIPS，WEHOPETOEXPLOREWHETHETTHEWORKINGMEMORYCAPACITYHASDOMAINGENERALITY1MERESULTSSHOWTHAT1_RHEREARCSIGNIFJCANTDIFFERENCESAMONGTHESTUDENTS仃OMDIFFERENTSUBJECTSINTOUCHINGBIOCKS、FO珊COMPIETIONANDVISUOSPATIALWORKINGMEMORYSPANTESTS；THESCORESOFBOYSINLOCALIZATION，TOUCHJNGBLOCKSANDVISUOSPATIALWORKINGMEMORYSPANTESTSARESIGNIFICANTLYHIGHERTHANTHATOFGIDS；T1LEFO腫COMPLETIONSCORESOFSTUDENTSLIVINGJNCITYAFESIGNIFICANTJYHIGHERTHANWHOLIVJNGJNCOUNTRY，ANDTHEREARENOSIGNIFICANTDIH℃RENCESAMONGTHESTUDENTSFMMD餉EFENTPLACESINWORKINGMEMORYSPANTESTS2THELOCALIZATIONANDFO帥COMPLETIONTESLSFOCUSONSPA“AJORIENTATIONABILITY’WHEREASTHEMENTALIOTATION一3DANDTOUCHJNGBLOCKSTESTSATTENDTOSPATIALVISUALIZATIONABILJTY3THEWORKINGMEMORYCAPACITYHASDOMAJNGENEFALITY，BUTINSPECIALASPECTITSHOWSDOMAINSPECJFJCJTY1HELOCALIZATION、MENTALMTATION一3D，TOUCHINGBLOCKSTESTSANDVISUOSPATIALWORKINGMEMORYSPANARESIGNJFICANTLYREJATED；THELOCALIZATION，TOUCHJNGBLOCKSTESTSANDDJ百TALWORKINGMEMORYSPANSUGGESTASIGILMCANTRELATIONTHEVISUOSPATIALWORKINGMEMORYSPANCANPREDICTSCORESOFLOCALZATION，TILENTALMTATJON一3D，TOUCHINGB】OCKSTESTS；THEDIGJTALWORKINGMEMOTYSPAILISFOUNDTOBEABLETOPIEDICTS。凸RCSOFLOCALIZATIONANDTOUCHINGBLOCKSTESTSKEYWORDSVISUOSPATIALABILITYVISUOSPATIALWORKINGMEMORYSPAN，DI昏TALWORKINGMEMOFYSPAN，DOMAINGENERAL“YII

簡介：點擊查看更多SYBR GREENⅠ實時熒光定量PCR檢測多價輪狀病毒疫苗滴度方法的建立及初步驗證.pdf精彩內容。

簡介：目錄中文摘要IABSTRACTABSTRACTVI英文縮略詞表英文縮略詞表XIV第一部分理論研究111認知功能障礙的中醫(yī)發(fā)病機制認知功能障礙的中醫(yī)發(fā)病機制122銅毒致病在肝豆狀核變性的發(fā)病機制銅毒致病在肝豆狀核變性的發(fā)病機制433肝豆狀核變性的中醫(yī)病因病機研究肝豆狀核變性的中醫(yī)病因病機研究744肝豆狀核變性的細胞凋亡的實驗研究肝豆狀核變性的細胞凋亡的實驗研究105通腑解毒法干預神經(jīng)認知功能的理論基礎及中藥組方依據(jù)通腑解毒法干預神經(jīng)認知功能的理論基礎及中藥組方依據(jù)1266肝豆靈的臨床及實驗研究肝豆靈的臨床及實驗研究13第二部分實驗研究17實驗一肝豆靈對銅負荷大鼠神經(jīng)認知功能的影響17前言171材料與方法1811實驗材料182實驗結果2233討論討論2331WD31WD的認知障礙及通腑解毒中藥的干預作用的認知障礙及通腑解毒中藥的干預作用233232神經(jīng)認知功能指標測試神經(jīng)認知功能指標測試MRISMRIS水迷宮的原理水迷宮的原理253333通腑解毒中藥對銅負荷大鼠認知功能的干預作用通腑解毒中藥對銅負荷大鼠認知功能的干預作用26實驗二通腑解毒方肝豆靈對銅負荷大鼠海馬病理及TUNEL細胞凋亡的影響281材料與方法292實驗結果333小結334討論34實驗三通腑解毒中藥肝豆靈對銅負荷大鼠海馬組織NOTCH信號通路蛋白表達及神經(jīng)細胞凋亡的影響37前言371材料與方法372結果433討論44結語48綜述61肝豆狀核變性的病理改變及超微結構研究進展61基于NOTCH信號通路通腑解毒法干預銅負荷大鼠的認知障礙及海馬細胞凋亡的實驗研究I中文摘要11研究背景及目的研究背景及目的肝豆狀核變性HEPATOLENTICULARDEGENERATION，HLD又稱威爾遜氏病WILSONDISEASE，WD是一種常染色體隱性遺傳性銅代謝紊亂導致的肝臟和神經(jīng)功能受損的疾病，也是少數(shù)幾種可以治療的神經(jīng)系統(tǒng)遺傳性疾病之一。WD起病隱匿，是由于ATP7B基因突變引起的銅代謝障礙性疾病，在我國患病率高于西方國家。近年來發(fā)現(xiàn)WD患者的非運動障礙嚴重影響患者的生活質量，非運動癥狀包括認知功能障礙、精神障礙、睡眠障礙和自主神經(jīng)功能障礙等。其中的認知功能屬于人和動物中樞神經(jīng)系統(tǒng)高級活動的范疇，海馬的功能起重要作用，是學習和記憶的重要神經(jīng)中樞。大量研究表明認知功能障礙與海馬神經(jīng)細胞凋亡密切相關而銅可能是誘導海馬神經(jīng)細胞凋亡的重要原因之一。目前主要以青霉胺PENICILLAMINEPCA為代表的金屬絡合劑驅銅治療對已存在嚴重神經(jīng)癥狀的WD患者往往難以奏效，究其原因，驅銅治療雖可糾正WD銅代謝障礙引起的體內銅的正平衡，但不能終止銅誘導的腦內神經(jīng)元的損傷。因此，研究WD銅誘導的神經(jīng)元損傷機制及其治療的分子靶點，是腦型WD患者的診療亟待解決的難題。我們通過長期大量的臨床研究證實，根據(jù)通腑解毒治療方法制成的中藥復方肝豆靈對WD患者的神經(jīng)和智商減退等癥狀有改善作用，銅是強氧化劑，能激活自由基活性促進細胞內活性氧的產生，誘發(fā)氧化應激反應，導致神經(jīng)細胞的凋亡，我們先前的實驗也證實了肝豆靈具有干預銅過量負荷大鼠的學習記憶障礙的作用。NOTCH信號通路和海馬神經(jīng)細胞再生具有密切關系。NOTCH信號是一個高度保守的信號通路它通過受體和配體的相互作用以及變化影響相鄰細胞的分化、增殖和凋亡。既往的研究顯示NOTCH信號轉導通路具有在神經(jīng)干細胞分化、血管的新生及神經(jīng)元凋亡等方面的調節(jié)作用。近年來

簡介：識別并抵抗微生物的感染對于多細胞生物的生存是必須的。天然免疫應答是機體防御感染性疾病的第一防線在天然免疫中由于病原體不斷地進化、突變會使識別的有效性逐步減弱。所以對于宿主而言最大的挑戰(zhàn)在于通過有限的受體迅速識別大量不同的病原體并作出應答。對TOLL樣受體TLRS及病原相關的分子模式PAMPS的發(fā)現(xiàn)徹底改變了這一看法。作為最具有代表性的模式識別受體TLRS對PAMPS進行識別引發(fā)的信號傳導導致炎癥介質的釋放在天然免疫防御中起重要作用并且最終激活獲得性免疫系統(tǒng)因此TLRS控制著天然免疫和獲得性免疫。近年來越來越多的證據(jù)表明TLRS參與了天然免疫系統(tǒng)對病毒的識別在抗病毒感染中發(fā)揮了重要的作用。病毒是一種相對簡單的生物由衣殼蛋白包裹核酸DNA或RNA組成。TLR4首先被發(fā)現(xiàn)可識別呼吸道合胞體病毒RSV的F蛋白并介導激活單核細胞。特別是最近的研究發(fā)現(xiàn)對于病毒的核酸成分除了提供遺傳信息以外還能夠被TLR3、TLR9、TLR78這一類表達于細胞內體的TLRS所識別誘導天然免疫反應并通過分泌的細胞因子控制獲得性免疫的生成。TLR3識別病毒的雙鏈RNA介導激活樹突狀細胞DC、巨噬細胞和B細胞導致了IIFN的產生。TLR3缺失小鼠則喪失了這種功能容易遭受病毒的感染。TLR9識別病毒非甲基化的CPG序列特別是發(fā)現(xiàn)單純皰疹病毒HSV2感染骨髓細胞誘導了TLR9依賴性的IFNA的產生相似的結果也在HSV1中發(fā)現(xiàn)。另一個確鑿的證據(jù)是TLR9介導的抗鼠巨細胞病毒MCMV免疫。TLR9缺失小鼠則產生了較高的病毒滴度并且死亡率大大增加。TLR7與TLR8在序列上的高度同源性使得它們識別的配體相同均為單鏈RNA病毒。最初鑒定的TLR7TLR8配體為咪唑喹啉家族該合成物具有很強的抗病毒活性這也許是因為它與核糖核酸在結構上的相似性。隨后的研究證實了單鏈RNA為TLR7TLR8的天然配體?；蛉笔∈蟮难芯勘砻鱐LR7對于識別包括流感病毒IV和水泡性口炎病毒VSV在內的一些單鏈RNA病毒是必須的。對于IV或是HIV1這些單鏈RNA病毒即使在滅活的情況下也能激活PDCS這似乎說明識別過程中并不要求活病毒的存在不需要病毒復制過程只要內體里存在病毒基因組的核酸成分就可以激活。然而另外一些單鏈RNA病毒如RSV、VSV滅活后就不能激活PDCS需要活病毒的感染感染后復制過程中產生的中間產物RNA通過自體吞噬作用進入內體才能激活PDCS。合成的一些單鏈RNA寡核苷酸N可以模擬病毒RNA的作用用脂質體包裹轉染可以激活效應細胞誘導分泌細胞因子。RNA40GCCCGUCUGUUGUGUGACUC是第一條從單鏈RNA病毒HIV1中篩選并確認的RNA寡核苷酸脂質體包裹后可刺激激活PBMC、PDCS和NK細胞等。能夠誘導產生了TH1型細胞因子細胞因子的產生導致T和B細胞的旁激活并且N能夠促進抗原特異性的CTL和IGG2A型抗體反應。有些研究指出RNA寡核苷酸的免疫活性依賴于其堿基組成和結構特異性目前關于免疫刺激性RNA的序列特點沒有明確的說法不過似乎U堿基對于RNA的活性是必須的所以另一部分研究認為U的數(shù)量越多免疫刺激活性越強。TLR7識別病毒的另一個研究方向在于這種識別使得病毒在進化過程中調整它們的基因組組成以逃避這種識別一些滅活的單鏈RNA病毒就不能激活免疫反應病毒逃避TLR7識別的另一個機制也許在其基因組中存在抑制性的序列。我們首先研究的是TLR7在丙肝病毒HCV感染中所起的作用。機體被HCV感染后5585％的人發(fā)展成為慢性感染大多數(shù)病人遭受了長期的肝臟炎癥從而導致肝纖維化或肝硬化。雖然誘導肝細胞死亡的任何因素都會建立NFKB相關的炎癥反應但是確切的參與分子還不清楚。有研究顯示TLR7單核苷酸多態(tài)性SNP與HCV感染后引起的炎癥反應密切相關特殊位點的SNP對于肝纖維化的形成有顯著的影響。我們的研究發(fā)現(xiàn)與未感染者相比HCV病染者外周血中促炎癥因子TNFA水平明顯升高并且檢測發(fā)現(xiàn)TLR7在PBMC和PDC中的表達量顯著上調。鑒于HCV是一種單鏈RNA病毒我們猜測很有可能TLR7介導了HCV的免疫反應。在體外我們用HCV的RNA與PDCS共孵育發(fā)現(xiàn)PDCS被激活并在培養(yǎng)上清中檢測到IFNA的分泌。為了說明HCV的核酸物質通過TLR7的介導激活了PDCS我們從HCV基因組中篩選了一些RNA寡核苷酸用脂質體包裹后刺激PDCS發(fā)現(xiàn)在HCV核心區(qū)域上的一個RNA片段具有免疫活性特別是HCV特有的POLYU尾具有很強的免疫刺激性誘導了大量的IFNA產生。TLR7的抑制物破壞了RNA的免疫活性說明了TLR7參與HCVRNA刺激PDCS的介導作用。肝癌細胞系HUH7細胞上表達有TLR7免疫刺激性的HCVRNA與HUH7作用誘導了轉錄因子NFKB的核轉移這些結果說明HCVRNA在HCV持續(xù)感染期通過TLR7的介導作用誘導了炎癥反應。適當?shù)奶烊幻庖叻磻獙τ诘挚共≡w的感染是必須的但是如果這種反應過度將會導致長期的炎癥紊亂造成病理性損傷。過度分泌的促炎癥因子尤其是TNFA在慢性HCV感染中很常見因此TLR7在HCV感染中的激活是一把雙刃劍。那么這種多余信號的清除就顯得非常重要了。機體有很多手段來實現(xiàn)這種抑制例如在蛋白水平TIR8SIGIRR通過與TLR受體競爭結合干擾下游信號從而限制過度炎癥反應例如在基因轉錄水平BC13與P50形成的同型二聚體與TLR信號激活的基因結合可以阻止其轉錄。我們的研究發(fā)現(xiàn)HCVRNA與效應細胞作用誘導了MIR155的表達。MICRNASMIRNAS是一種進化上保守、大小約2123個堿基的非編碼RNA在轉錄后水平調控細胞的形成與發(fā)育因此異常的MIRNA水平與惡性腫瘤的形成有關。以前的研究提示MIR155在天然免疫、炎癥反應和腫瘤間發(fā)揮非常重要的作用。對于免疫反應的形成MIR155也是必不可少并研究已經(jīng)發(fā)現(xiàn)MIR155的靶基因MIR155在炎癥反應中表達上調也已有報道只是在調節(jié)炎癥反應中的靶基因還沒有找到我們的研究發(fā)現(xiàn)MIR155可以與TLR7通路中的TAB2分子結合從而抑制了TAB2的表達進而對整個炎癥反應起負調控作用。為了說明TLR7識別單鏈RNA病毒在不同物種間和不同病毒間具有廣泛性我們研究的第二個病毒是口蹄疫病毒FMDV。我們從FMDV基因組篩選得到了具有免疫活性的RNA序列與PBMC作用誘導了IFNA和IL12P40的分泌。說明FMDV的核酸物質也能與免疫系統(tǒng)的效應細胞作用并激活這些細胞。接著克隆了FMDV的宿主豬TLR7基因PTLR7將PTLR7轉染HEK293細胞構建細胞株用FMDVRNA刺激也能激活該細胞并誘導NFKB的核轉移和細胞因子的產生。FMDVRNA與PBMC作用也導致了獲得性免疫相關細胞的激活。這些結果說明PTLR7也能夠介導FMDV這種單鏈RNA病毒的免疫激活。綜上所述本研究首次證明了在HCV感染中TLR7介導HCV的單鏈RNA激活免疫系統(tǒng)的效應細胞誘導了炎癥因子的表達并且在肝癌細胞上也表達有TLR7HCV單鏈RNA也能通過其TLR7的介導誘導NFKB的核轉移活化生成炎癥反應的信號通路HCVSSRNA的免疫刺激使得MIR155的表達上調實驗證明了MIR155可以與TLR7通路中TAB2分子作用抑制TAB2蛋白的表達從而負向調控了炎癥因子的分泌。TLR7對單鏈RNA病毒的識別在各物種間是普遍的實驗證明了FMDV的單鏈RNA能夠通過其宿主TLR7激活天然免疫反應。在抗病毒的疫苗研究上我們構建了以乙肝病毒的核心蛋白病毒樣顆粒HBCVLP為載體在適當位點連有FMDV兩個主要抗原表位用柔性接頭連接的重組多肽疫苗。這種VLP疫苗在體內誘導了增強的免疫應答反應這主要是由于VLP易于被DC、巨噬細胞吞噬同時VLP刺激DC也誘導了一些參與免疫激活分子的變化增強了DC的活性。

簡介：目的觀察病毒性心肌炎BALBC小鼠心臟組織中Γ干擾素（IFNΓ）、白介素6IL6、MCMVDNA水平的變化，結合心臟組織病理學結構，探討鹽酸法舒地爾對巨細胞病毒性心肌炎小鼠的影響。方法60只成年BALBC小鼠（68周，MCMV檢測陰為性）隨機分7組A空白對照組B環(huán)磷酰胺組C環(huán)磷酰胺MCMV組D環(huán)磷酰胺MCMV生理鹽水組E環(huán)磷酰胺MCMV法舒地爾治療組F環(huán)磷酰胺MCMV更昔洛韋治療組G環(huán)磷酰胺MCMV熱毒寧治療組。各組又按照不同的時間點分為感染病毒后第一天開始治療與感染病后第五天開始治療兩個亞組，在各時間點取心臟組織行實時定量聚合酶鏈反應PCR檢測病毒DNA的表達，采用酶聯(lián)免疫吸附試驗ELASA法測定心臟組織中IL6、IFNΓ的濃度實驗結束后統(tǒng)一取小鼠的心臟組織做病理切片HE染色，觀察不同組小鼠心臟組織其病理改變。結果1A、B兩組的IFNΓ、IL6無統(tǒng)計學意義，P＞005C、D兩組的IFNΓ、IL6無統(tǒng)計學意義，（P＞005）C、D組的IFNΓ水平較A組下降了3486％、3069％（P＜005），IL6升高了近128倍、127倍P＜005，說明在感染巨細胞病毒后，心肌細胞的IFNΓ的表達量下調，IL6表達量升高，差異均有統(tǒng)計學意義E、F、G組IFNΓ有上升，提示經(jīng)治療后IFNΓ都有上調E、F、G組的IL6較C組降低，提示經(jīng)治療后IL6有下降。E、F、G組各亞組的IFNΓ、IL6相比較差異無統(tǒng)計學意義P＞005。2閾值循環(huán)THRESHOLDCYCLE，△CT是擴增曲線和閾值線的交叉點，它是PCR反應中模板濃度的相對測量，△CT值與模板濃度負相關。C組的△CT值最小，說明MCMVDNA的模板濃度最大，提示病毒復制最活躍與C組比較，E、F、G組的△CT值有所增加，差別有顯著性P＜005，提示經(jīng)治療后，MCMVDNA的濃度顯著下降兩個亞組間進行比較（P＜005），提示第一天進行治療比第五天進行治療MCMVDNA的濃度顯著下降。3病理組織學改變正常的心肌細胞排列組未見明顯病理改變MCMV模型組（C組）為心肌炎癥表現(xiàn)，心肌細胞腫脹，細胞橫紋不清，周圍出現(xiàn)單核細胞及淋巴細胞為主的炎性細胞浸潤，上述病理改變符合MCMV病毒性心肌炎的表現(xiàn)，結合小鼠的行為學表現(xiàn)，模型建立成功E、F、G及其亞組心肌細胞炎癥（單核細胞數(shù)減少）較C組有減輕。結論巨細胞病毒性心肌炎小鼠心臟組織MCMVDNA水平、L6、IFNΓ濃度升高，法舒地爾能降低其升高的幅度，對巨細胞病毒性心肌炎小鼠可能有保護作用。病理其機制還需進一步研究。

簡介：隨著時代的發(fā)展，國家地區(qū)間在經(jīng)濟文化各個層面的交流日益深化。社會的高度商業(yè)化，也決定了行業(yè)企業(yè)間的跨界合作必將日漸頻繁和普遍。在這樣的背景下，產品特征關聯(lián)設計作為一種日趨主流的設計現(xiàn)象和設計方法，進入人們的視線。另一方面，行業(yè)發(fā)展的快節(jié)奏和浮躁的氛圍，加上相關的系統(tǒng)分析的缺乏，導致現(xiàn)階段的設計中普遍存在對產品特征關聯(lián)設計方法的誤讀和膚淺應用，設計效果也差強人意。本文旨在將產品特征關聯(lián)設計獨立出來做完整的課題研究，從現(xiàn)象到原理進行全面系統(tǒng)的分析，并試圖構建科學合理的設計方法體系，用以指導具體的設計實踐。本文首先著眼于產品特征關聯(lián)設計的表征層面，即現(xiàn)象。通過明晰產品特征關聯(lián)設計的概念，結合認知心理學關于認知加工的層次劃分理論，對產品特征關聯(lián)設計現(xiàn)象作詳細而有條理的分類和解讀。文章進而深度地分析產品特征關聯(lián)設計的內在層面，即問題。首先發(fā)掘現(xiàn)有設計中存在的問題，接著研究認知心理學的相關理論，探討理論在實際設計中的應用，并在此基礎上構建系統(tǒng)的產品特征關聯(lián)設計方法體系，最后通過設計案例的分析，探討產品特征關聯(lián)設計方法在實踐中的具體應用。

簡介：點擊查看更多雙自殺基因復制缺陷型慢病毒載體的構建及其在異基因骨髓移植中的應用研究.pdf精彩內容。

簡介：肝纖維化HEPATICFIBROSIS，HF是一組非常常見的慢性肝疾病的病理學綜合征。在整個肝纖維化的發(fā)生發(fā)展過程中，肝細胞內會發(fā)現(xiàn)許多基因的發(fā)生異常表達，并增加發(fā)展為肝細胞性癌的危險性。在肝纖維化的發(fā)生過程中，肝星狀細胞HEPATICSTELLATECELLS，HSCS的活化增殖是其中的一個重要環(huán)節(jié)。肝星狀細胞位于竇周DISSE間隙內，在正常狀態(tài)下，HSC主要儲存和代謝維生素A，合成與分泌少量的細胞外基質（EXTRACELLULARMATRIX，ECM）。當HSC受刺激過度激活時，轉變成具有增生活性的、產生纖維的具收縮特性的肌成纖維細胞并表達Α平滑肌肌動蛋白ALPHASMOOTHMUSCLEACTIN，ΑSMA合成異常增多的ECM超過肝清除能力導致其在肝內聚集是肝纖維化形成的重要機制。有研究表明適當濃度的脂多糖LIPOPOLYSACIDE，LPS可刺激HSC，使其提高增殖率和表達細胞內膠原增強。LPS誘導的細胞模型能夠較好地模擬出肝纖維化形成過程中HSC在數(shù)量和功能方面的主要改變，為HSC活化的研究提供了一個較為全面的細胞模型。小泛素相關修飾物（SMALLUBIQUITINLIKEMODIFIERSUMO）基因家族有四個家庭成員，其通過共價連接修飾靶蛋白，并參與蛋白質間的相互作用，調控細胞內靶蛋白分布及其功能。我們研究發(fā)現(xiàn)隨著肝纖維化程度的加深，SUMO1的表達增強。SUMO1可能通過大量增強TGFΒ1以及PDGF的表達，進而促進HSC的增殖和活化，促進其分泌大量膠原，并減少膠原降解而導致大量膠原異常沉積，表現(xiàn)出的作用是促進肝纖維化。SUMO1可可以修飾其他生長因子，維持相關蛋白質的穩(wěn)定性，從而調控肝纖維化甚至的肝癌的發(fā)展過程。因此，我們設計該實驗進一步研究SUMOS在肝纖維化過程中的作用及其機制，為肝纖維化的治療提供新的思路。本實驗首先利用WESTERNBLOT及定量PCR檢測LPS刺激HSCT6模擬肝纖維化的過程中SUMO1表達水平的變化，進一步了解SUMO1在肝纖維化中的作用。然后我們通過針對SUMO1慢病毒轉染LPS激活后的HSCT6，利用WESTERNBLOT及定量PCR證實SUMO1的表達水平的確得到干擾及上調，再利用流式細胞儀檢測轉染后各組細胞株的細胞周期及凋亡，以期闡明SUMO1在肝纖維化中的作用機制。第一部分不同濃度LPS刺激HSCT6SUMO1的表達水平變化目的探討能模擬肝纖維化時LPS刺激大鼠肝星狀細胞的最佳濃度方法分別用終濃度為0，1UGML，10UGML，100UGML，200UGML的LPS刺激HSCT624小時后分別提取RNA及蛋白質，后利用定量PCR及WESTERNBLOTTING檢測SUMO1的表達水平及利用WESTERNBLOTTING檢測ΑSMA的表達水平。結果定量PCR發(fā)現(xiàn)濃度為的10UGMLLPS刺激HSCT6其SUMO1的表達水平最高，各組差異具有統(tǒng)計學意義P＜005。WESTERNBLOT驗證SUMO1上述規(guī)律并且與ΑSMA的表達規(guī)律一致，各組差異具有統(tǒng)計學意義P＜005。結論LPS能夠有效激活HSCT6，在濃度為的10UGMLLPS可最好模擬肝纖維化，與SMUO1的表達規(guī)律一致。結果說明SMUO1可能在LPS激活HSCT6過程中取到一定作用。第二部分SUMO1表達變化后對HSCT6增殖的影響及其機制研究目的初步探索SUMOS在HSCT6激活過程中的作用及其機制方法將人工合成的針對SUMO1基因的SIRNA慢病毒及SUMO1過表達慢病毒載體轉染HSCT6，采用定量PCR和WESTERNBLOT方法檢測轉染后HSCT6中SUMO1的表達變化，并利用流式細胞儀檢測HSCT6的周期及凋亡。后用REALTIMEPCR檢測SUMO2及SUMO3的表達水平。結果人工合成的針對SUMO1基因的SIRNA慢病毒能抑制肝星狀細胞中SUMO1基因的表達但SUMO2及SUMO3的表達上調，而SUMO1過表達慢病毒載體轉染肝星狀細胞后SUMO1表達增強但SUMO2及SUMO3的表達水平下調，與對照組相比差異有統(tǒng)計學意義P＜005。轉染后HSCT6的周期及凋亡，各組差異無統(tǒng)計學意義P＞005。結論SUMO1SIRNA沉默肝星狀細胞中SUMO1基因效果良好但與SUMO2和SUMO3的表達水平呈現(xiàn)相反的趨勢，HSCT6的周期及凋亡均未出現(xiàn)明顯變化。本部分結果說明SUMOS中各族基因在功能上可互補并共同導致HSCT6的激活。

簡介：目的通過臨床觀察針刺對中風后輕度認知功能障礙MILDCOGNITIVEIMPAIRMENT，MCI患者的療效及治療前后血清白細胞介素6INTERLEUKIN，IL6、腫瘤壞死因子ΑTUMNECROSISFACTΑ，TNFΑ水平的變化情況，使我們進一步了解針刺治療MCI可能的作用機理，同時為患者提供更有效的治療該疾病的方法。方法160例符合入選標準的患者，按隨機數(shù)字表法分為實驗組30例、對照組30例。2對照組采用常規(guī)治療尼莫地平NIMODIPINE干預，實驗組予常規(guī)治療針刺干預，療程均為28天。3觀察兩組治療前后簡易精神狀態(tài)量表MINIMENTALSTATEEXAMINATION，MMSE、蒙特利爾認知評估量表MONTREALCOGNITIVEASSESSMENT，MOCA北京中文版、日常生活活動能力量表ACTIVITIESOFDAILYLIVINGSCALE，ADL、中醫(yī)證候積分的變化情況及血清IL6、TNFΑ水平的改變。結果1治療前兩組患者的血清IL6、TNFΑ，神經(jīng)心理學量表MOCA、MMSE、ADL評分，中醫(yī)證候積分，年齡，教育程度之間的差異均無統(tǒng)計學意義P＞005，均具有可比性。2對臨床觀察變量進行相關性分析發(fā)現(xiàn)MMSE、MOCA量表評分與ADL量表評分、中醫(yī)證候積分呈負向相關P＜001），ADL量表評分與中醫(yī)證候積分呈正向相關P＜001）血清IL6、TNFΑ濃度與MMSE、MOCA量表評分呈負相關P＜001），與ADL量表評分、中醫(yī)證候積分呈正相關P＜001。3治療后兩組患者觀察指標變化情況神經(jīng)心理學量表評分MMSE、MOCA量表評分升高，ADL量表評分降低血液指標血清IL6、TNFΑ濃度降低中醫(yī)證候積分降低其中血清IL6、TNFΑ濃度，MMSE、MOCA量表評分，中醫(yī)證候積分組間比較差異均具有統(tǒng)計學意義P＜001）。4組內臨床療效比較兩組患者治療前后組內神經(jīng)心理學量表MMSE、MOCA、ADL）評分，中醫(yī)證候積分，血清IL6、TNFΑ濃度均明顯改變，差異具有統(tǒng)計學意義P＜001），即兩組的治療均導致MMSE、MOCA評分升高和IL6、TNFΑ濃度、ADL評分、中醫(yī)證候積分降低，說明兩組“治療”均有效。5實驗組中醫(yī)證候療效總有效率9333％，對照組中醫(yī)證候療效總有效率為6333％，兩組比較差異有統(tǒng)計學意義P＜001）。6實驗組臨床療效總有效率為9333％，對照組臨床療效總有效率6000％，兩組之間差異有統(tǒng)計學意義P＜001）。結論1針刺能夠在一定程度上改善患者認知功能，值得臨床推廣與應用2MCI嚴重程度與炎癥反應密切相關，炎癥反應越激烈，患者認知障礙越嚴重3認知障礙越嚴重，血清IL6、TNFΑ濃度越高。

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