簡介：目的評價更昔洛韋GANCICLOVIR，GCV治療嬰兒巨細(xì)胞病毒性黃疸型肝炎的療效及安全性。方法檢索PUBMED和CHKD期刊全文數(shù)據(jù)庫，并追查所有納入研究的參考文獻(xiàn)。檢索PUBMED年限從建庫到2008年12月，檢索CHKD年限從1997年1月到2008年12月。納入用英文或中文發(fā)表的比較更昔洛韋常規(guī)護(hù)肝退黃藥物更昔洛韋組與常規(guī)護(hù)肝退黃藥物對照組治療嬰兒巨細(xì)胞病毒性黃疸型肝炎的隨機對照試驗。納入研究的療程至少2周。由兩名評價員獨立篩查文獻(xiàn)，評價質(zhì)量和提取資料。采用JADAD量表及隨機分配方案隱藏方法評估納入試驗的方法學(xué)質(zhì)量。采用X2檢驗鑒定研究間異質(zhì)性，使用隨機效應(yīng)或固定效應(yīng)模型合并研究。若X2檢驗結(jié)果P結(jié)果共納入國內(nèi)10個隨機對照試驗，包括537個嬰兒巨細(xì)胞病毒性黃疸型肝炎患兒，其中更昔洛韋組279例，對照組258例。薈萃分析結(jié)果顯示，治療結(jié)束時，更昔洛韋組血或尿CMVDNA轉(zhuǎn)陰率7045％明顯高于對照組1467％；142，95％CI638，3160，Z650，P結(jié)論對于嬰兒巨細(xì)胞病毒性黃疸型肝炎，更昔洛韋治療有使CMVDNA轉(zhuǎn)陰、CMVIGM轉(zhuǎn)陰、ALT、STB和DB值降低的治療效應(yīng)。受原研究質(zhì)量和不同研究干預(yù)措施差異的影響，更昔洛韋療效還需更多高質(zhì)量隨機對照試驗予以證實。

簡介：復(fù)發(fā)性病毒性腦炎非常少見，其復(fù)發(fā)機制尚不十分清楚。本文報告6例復(fù)發(fā)性病毒性腦炎，其中5例臨床高度懷疑為單純皰疹性腦炎，并且其中2例得到病理結(jié)果的證實。6例患者在癥狀緩解后1月至2年2月，再次出現(xiàn)神經(jīng)系統(tǒng)損害的表現(xiàn)，癥狀加重。并且6例患者中5例復(fù)發(fā)時，MRI或CT出現(xiàn)以額、顳灰質(zhì)損害為主的新病灶；除1例患者死亡，其余5例患者重新給予阿昔洛韋抗病毒治療后，病情均明顯好轉(zhuǎn)；例3腦組織HSV免疫組化染色陽性，例6尸檢腦組織內(nèi)可見細(xì)胞內(nèi)包涵體，HSV免疫組化陽性，提供了病毒感染的直接病理依據(jù)。所以本文認(rèn)為這6例復(fù)發(fā)性病毒性腦炎復(fù)發(fā)的機制與病毒活化直接侵犯中樞神經(jīng)系統(tǒng)有關(guān)。復(fù)發(fā)的原因仍不是十分清楚，可能與阿昔洛韋劑量不足有關(guān)。結(jié)合文獻(xiàn)，我們認(rèn)為阿昔洛韋抗病毒治療應(yīng)遵循早期、足量、個體化的治療原則，將有助于改善預(yù)后。

簡介：中山大學(xué)碩士學(xué)位論文EB病毒與細(xì)胞因子HGF協(xié)同影響鼻咽癌血管生成和細(xì)胞黏附的研究姓名解麗瓊申請學(xué)位級別碩士專業(yè)病理學(xué)指導(dǎo)教師李智20080516中山大學(xué)碩士學(xué)位論文EB病毒與細(xì)胞因了HGF協(xié)同影響鼻咽癌JNL管生成和細(xì)胞黏附的研究發(fā)生、演進(jìn)是一個非常復(fù)雜的過程，目前還有很多機制不明。細(xì)胞因子是由免疫細(xì)胞和某些非免疫細(xì)胞經(jīng)刺激而合成并分泌的一類具有廣泛生物學(xué)活性的小分子蛋白質(zhì)，它們介導(dǎo)細(xì)胞之間的信息交換與相互調(diào)節(jié)，參與免疫應(yīng)答與炎癥反應(yīng)過程。細(xì)胞因子的作用具有多功能性和通用性，細(xì)胞因子之間可相互協(xié)同或拮抗。近年來發(fā)現(xiàn)，很多腫瘤，如鼻咽癌、BURKITT’S淋巴瘤、胃癌、肺癌、肝癌、乳腺癌等均有細(xì)胞因子表達(dá)水平的改變。在腫瘤發(fā)生、組織修復(fù)、細(xì)胞分化和增殖中起重要作用。鼻咽癌細(xì)胞和間質(zhì)中的淋巴細(xì)胞均可以分泌多種細(xì)胞因子，這些細(xì)胞因子對鼻咽癌的發(fā)生發(fā)展是否有重要作用，目LJI『尚未明確。肝細(xì)胞生長因子HEPATOCYTEGROⅢHFACTOR，HGF是一種多肽生長因子，具有促進(jìn)細(xì)胞分裂、組織成形，誘導(dǎo)上皮細(xì)胞遷移、侵襲以及誘導(dǎo)血管生成等作用。原癌基因MET編碼的CMET蛋白屬于生長因子受體類，是至今唯一被認(rèn)識的HGF高親和力受體，并可在多種腫瘤細(xì)胞中過表達(dá)。HGF／CMET的過表達(dá)與腫瘤不良預(yù)后、侵襲深度和淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移密切相關(guān)，可作為腫瘤的危險因素指標(biāo)。HGF／CMET對鼻咽癌的發(fā)生發(fā)展是否有重要作用，正是值得注意但又尚未研究的問題。血管生成是腫瘤細(xì)胞獲得營養(yǎng)的自『提條件，淋巴管和微血管數(shù)量增加也加大了腫瘤細(xì)胞進(jìn)入循環(huán)系統(tǒng)的機會，導(dǎo)致腫瘤轉(zhuǎn)移機率增加。腫瘤微血管生成與多種血管生成因子包括VEGF、BFGF、IL6和IL一8等的表達(dá)相關(guān)。IL一8是一類中性粒細(xì)胞趨化因子，具有多種功能促進(jìn)血管生成，誘導(dǎo)某些腫瘤細(xì)胞移動、增殖，促使細(xì)胞表達(dá)黏附分子，從而促進(jìn)腫瘤的發(fā)生、發(fā)展與轉(zhuǎn)移。但在鼻咽癌組織中，IL8表達(dá)上調(diào)的機制至今尚未明了。惡性腫瘤的侵襲和轉(zhuǎn)移是腫瘤細(xì)胞與細(xì)胞外基質(zhì)，以及腫瘤細(xì)胞之間相互作用的結(jié)果。細(xì)胞黏附在腫瘤細(xì)胞的侵襲和轉(zhuǎn)移中起作用。鼻咽癌早期發(fā)生組織侵襲和淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的特點一直受到關(guān)注，但其機制至今仍不清楚。在與腫瘤細(xì)胞浸潤轉(zhuǎn)移相關(guān)的諸多因素中，上皮型鈣黏素E。CADHERIN，ECD的作用越來越顯示出重要性。在人類多種腫瘤組織中，ECD表達(dá)缺失或降低都表明其與腫瘤細(xì)胞的浸潤和轉(zhuǎn)移有關(guān)，但其作用和調(diào)控的分子機制尚未完全明確。盡管有線索提示EBV與HGF／CMET系統(tǒng)在多種人類腫的發(fā)生、演進(jìn)過程中

簡介：分類號學(xué)號學(xué)號M201175554學(xué)校代碼學(xué)校代碼10487密級密級碩士學(xué)位論文碩士學(xué)位論文慢病毒介導(dǎo)的靶向慢病毒介導(dǎo)的靶向CTHRC1小干擾小干擾RNA對人黑素瘤細(xì)胞人黑素瘤細(xì)胞A375凋亡、增殖及遷移的影響凋亡、增殖及遷移的影響學(xué)位申請人學(xué)位申請人王明學(xué)科專業(yè)學(xué)科專業(yè)皮膚性病學(xué)皮膚性病學(xué)指導(dǎo)教師指導(dǎo)教師黃長征黃長征教授教授答辯日期答辯日期2014年5月獨創(chuàng)性聲明獨創(chuàng)性聲明本人鄭重聲明，本學(xué)位論文是本人在導(dǎo)師指導(dǎo)下進(jìn)行的研究工作及取得的研究成果的總結(jié)。盡我所知，除文中已經(jīng)標(biāo)明引用的內(nèi)容外，本論文不包含任何其他個人或集體已經(jīng)發(fā)表或撰寫過的研究成果。對本文的研究做出貢獻(xiàn)的個人和集體，均已在文中以明確方式標(biāo)明。本人完全意識到本人將承擔(dān)本聲明引起的一切法律后果。學(xué)位論文作者簽名日期年月日學(xué)位論文版權(quán)使用授權(quán)書學(xué)位論文版權(quán)使用授權(quán)書本學(xué)位論文作者完全了解學(xué)校有關(guān)保留、使用學(xué)位論文的規(guī)定，即學(xué)校有權(quán)保留并向國家有關(guān)部門或機構(gòu)送交論文的復(fù)印件和電子版，允許論文被查閱和借閱。本人授權(quán)華中科技大學(xué)可以將本學(xué)位論文的全部或部分內(nèi)容編入有關(guān)數(shù)據(jù)庫進(jìn)行檢索，可以采用影印、縮印或掃描等復(fù)制手段保存和匯編本學(xué)位論文。保密□，在_____年解密后適用本授權(quán)書。本論文屬于不保密□。（請在以上方框內(nèi)打“√”）學(xué)位論文作者簽名指導(dǎo)教師簽名日期年月日日期年月日

簡介：點擊查看更多馬尾口岸蠅類生物多樣性和攜帶病毒的狀況研究.pdf精彩內(nèi)容。

簡介：丙型肝炎是一種全球性流行的傳染病，目前全球患病率約3％，約有18億人感染丙型肝炎病毒HEPATISCVIRUS，HCV，而高度慢性化是該病的最大特征。一般來說，急性HCV感染會顯示亞臨床狀態(tài)，并導(dǎo)致慢性的肝臟疾病，患者常在無意識的情況下延誤治療，從而導(dǎo)致肝硬化和肝細(xì)胞癌的發(fā)生。目前國內(nèi)尚無HCV抗病毒特效藥物和相關(guān)疫苗。因此，控制HCV感染的形勢十分嚴(yán)峻。目前主要靠早發(fā)現(xiàn)、早診斷和早治療來防控HCV傳染源、阻斷傳播途徑，這對HCV的診斷提出較高要求?，F(xiàn)在HCV的前期篩檢主要為檢測血清中的抗體，主要方法包括酶聯(lián)免疫法、聚合酶鏈反應(yīng)、重組免疫印跡等。膠體金免疫層析方法與之相比，操作簡單、攜帶方便、快速、特異，不需要任何設(shè)備和特殊試劑即可得到檢測結(jié)果，特別適用于現(xiàn)場檢測和診斷。本課題基于膠體金的性質(zhì)及免疫學(xué)原理，研制了一種能夠快速診斷HCV抗體的膠體金免疫層析試紙條。即利用免疫膠體金技術(shù)，選擇使用檸檬酸三鈉還原法制備膠體金，然后用其標(biāo)記HCV重組抗原制備成金墊，同時將包被抗原與HCV單抗分別作為檢測線與質(zhì)控線蛋白包被硝酸纖維素膜，用于血清中HCV抗體的檢測。為制備出特異性、靈敏度、穩(wěn)定性俱佳的試紙條，在研究過程中，充分考慮了各種影響因素對試紙條品質(zhì)的影響。通過對膠體金制備用水、重組抗原的標(biāo)記濃度、標(biāo)記PH值、包被抗原抗體濃度、不同硝酸纖維素膜、不同濕度環(huán)境下對包被的影響、不同粒徑大小的膠體金的靈敏度差異等因素進(jìn)行摸索與探究，最終確定選擇超純水制備粒徑大小約40NM的膠體金，標(biāo)記蛋白濃度為20ΜGML，采用SARTIUSSTEDIMCN140無背襯膜在40％60％的環(huán)境濕度下，質(zhì)控線和檢測線分別包被HCV單抗1MGML和HCV重組抗原15MGML，建立HCV膠體金雙抗原夾心法。對制備的試紙條進(jìn)行特異性、靈敏度、穩(wěn)定性等方面系統(tǒng)檢測，并與ELISA檢測方法進(jìn)行臨床比較。結(jié)果表明該免疫膠體金試紙條特異性、靈敏度、穩(wěn)定性較好，并方便、快捷，與ELISA法檢測對比陽性率與陰性率俱佳?？捎糜诒尾《靖腥镜脑缙谠\斷，具有一定的臨床使用價值。

簡介：J793289學(xué)校代碼10023學(xué)號200201063染及16亞型載量姓名李源北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院臨床醫(yī)學(xué)專業(yè)02級導(dǎo)師姓名向陽教授北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院臨床學(xué)院婦產(chǎn)科朱寶利教授中國科學(xué)院微生物研究所病原微生物與免疫學(xué)重點實驗室完成日期20LO年6月HPLCHPVHSILHTERTICCLSILMRNAPAGEPBSPCRQPCRRNARPMTAETBSTCT英文縮略詞表QU鋤OUSCELLSHOLDUCLEICACIDUCLEOSIDETRIPHOSPHATEROMIDEHIGHPERFORMANCELIQUIDCHROMATOGRAPHYHUMANPAPILLOMAVIRUSHIGHGRADESQUAMOUSINTRAEPITHELIAL1ESIONHUMANTELOMERASEREVERSETRANSCRIDTASEINVASIVECERVICALCARCINOMALOWGRADESQUAMOUSINTRAEPITHELIALLESIONMESSENGERRIBONUCLEICACIDP01YACRYLAMIDEGELELECTROPHORESISPHOSDHATEBUFFEREDSALINEPOLVMERASECHAINREACTIONAUANTITATIVEREALTIMEPCRRIBONUCLEICACIDREVOLUTIONSDERMINUTETRISACETATE／EDTABUFFEREDSALINETHEBETHESDASVSTEMTHINPREPCYT0109YTEST2中文譯名不典型鱗狀上皮細(xì)胞堿基對循環(huán)閾值脫氧核糖核酸脫氧核糖核苷三磷酸溴化乙啶高效液相色譜法人乳頭瘤病毒高度鱗狀上皮內(nèi)病變?nèi)硕肆Ｃ改孓D(zhuǎn)錄酶浸潤性宮頸癌低度鱗狀上皮內(nèi)病變信使核糖核酸聚丙烯酰胺凝膠電泳磷酸鹽緩沖液聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)實時定量聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)核糖核酸轉(zhuǎn)每分鐘TRIS一醋酸／EDTA緩沖液伯塞斯達(dá)分類系統(tǒng)新柏氏液基細(xì)胞學(xué)技術(shù)

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簡介：上海交通大學(xué)碩士學(xué)位論文輕度認(rèn)知功能損害神經(jīng)心理學(xué)相關(guān)研究姓名錢時興申請學(xué)位級別碩士專業(yè)精神病與精神衛(wèi)生學(xué)指導(dǎo)教師張新凱肖世富20090416上海交通大學(xué)醫(yī)學(xué)院碩士學(xué)位論文2上海交通大學(xué)學(xué)位論文原創(chuàng)性聲明上海交通大學(xué)學(xué)位論文原創(chuàng)性聲明本人鄭重聲明所呈交的學(xué)位論文，是本人在導(dǎo)師組的指導(dǎo)下，獨立進(jìn)行研究工作所取得的成果。除文中已經(jīng)注明引用的內(nèi)容外，本論文不包含任何其他個人或集體已經(jīng)發(fā)表或撰寫過的作品成果。對本文的研究做出重要貢獻(xiàn)的個人和集體，均已在文中以明確方式標(biāo)明。本人完全意識到本聲明的法律結(jié)果由本人承擔(dān)。學(xué)位論文作者簽名日期年月日

簡介：點擊查看更多2010-2012年社區(qū)獲得性肺炎住院患兒流感病毒感染的臨床分析.pdf精彩內(nèi)容。

簡介：本研究分為二部分第一部分HIV1病毒蛋白在不同年齡HIV1轉(zhuǎn)基因大鼠中表達(dá)水平的研究研究背景2001年美國馬里蘭大學(xué)醫(yī)學(xué)院建立了能出現(xiàn)AIDS相關(guān)的病理和免疫缺陷癥狀的HIV1轉(zhuǎn)基因大鼠模型。最近，該大鼠已經(jīng)被證明可以作為研究正在接受高效抗逆轉(zhuǎn)錄病毒治療（HAART）的HIV1感染病人的病理表現(xiàn)的有效模型，在接受該治療的病人體內(nèi)，盡管HIV病毒復(fù)制被抑制，但HIV1病毒蛋白還在持續(xù)表達(dá)。多項研究表明，HIV1感染者表現(xiàn)出來的癥狀，除了由病毒直接作用于靶細(xì)胞引起，HIV1相關(guān)的病毒蛋白本身以及它的表達(dá)水平的變化也會引起器官功能的紊亂。HIV1轉(zhuǎn)基因大鼠出現(xiàn)隨著年齡的增長HIV1相關(guān)的病理表現(xiàn)越明顯的現(xiàn)象。我們實驗室觀察到發(fā)育中的HIV1轉(zhuǎn)基因大鼠的體重明顯低于正常對照大鼠F344，并且隨著年齡的增長這種差異更加明顯。目的深入研究HIV1病毒蛋白在轉(zhuǎn)基因大鼠外周器官及腦區(qū)各部位表達(dá)譜；比較不同年齡的轉(zhuǎn)基因大鼠HIV1病毒蛋白表達(dá)水平的改變與年齡的相關(guān)性，對于進(jìn)一步理解HIV1病毒蛋白的累積效應(yīng)在HIV病程中所發(fā)揮的作用具有重要的理論和實際意義。方法我們建立了高特異性的適時熒光定量PCR方法，來評價年幼（23個月）的HIV1轉(zhuǎn)基因大鼠和成熟（1011個月）的HIV1轉(zhuǎn)基因大鼠的免疫及神經(jīng)系統(tǒng)中的HIV1病毒蛋白（TAT、GP120、NEF、VIF）的表達(dá)是否存在區(qū)別。結(jié)果在23個月大的HIV1轉(zhuǎn)基因大鼠中，這4種蛋白MRNA在脾臟中表達(dá)水平最高；而對于1011個月大的HIV1轉(zhuǎn)基因大鼠，HIV1病毒蛋白的MRNA水平在小腦和脊髓中最高。通過比較這兩個年齡組的TAT、GP120、NEF、VIFMRNA的水平，我們發(fā)現(xiàn)23個月大的HIV1轉(zhuǎn)基因大鼠的脾臟中的HIV1病毒蛋白的水平明顯高于1011個月大的，與此相反，在小腦、脊髓和紋狀體中，1011個月大的HIV1轉(zhuǎn)基因大鼠明顯高于23個月大的（P結(jié)論各種HIV病毒蛋白的表達(dá)水平隨著年齡的變化而改變，而且在AIDS癥狀出現(xiàn)之前，其分布就表現(xiàn)出從外周免疫器官轉(zhuǎn)向中樞神經(jīng)系統(tǒng)的現(xiàn)象。因此，我們的研究也證明這種處于非感染狀態(tài)下的大鼠是用來模擬正在接受高效抗逆轉(zhuǎn)錄病毒治療的HIV1感染者的最有用的模型。第二部分細(xì)胞因子在不同年齡HIV1轉(zhuǎn)基因大鼠血漿的表達(dá)變化研究背景HIV轉(zhuǎn)基因動物能夠表現(xiàn)出類似于HIV1AIDS病人所具有的癥狀，因此，將它們做為研究HIV1相關(guān)病癥的模型，即具有重現(xiàn)性，又經(jīng)濟實用。最近，該大鼠已經(jīng)被證明可以作為研究正在接受高效抗逆轉(zhuǎn)錄病毒治療（HAART）的HIV1感染病人的病理表現(xiàn)的有效模型，在接受該治療的病人體內(nèi)，盡管HIV病毒復(fù)制被抑制，但HIV1病毒蛋白還在持續(xù)表達(dá)。已經(jīng)證實HIV1病毒蛋白TAT、NEF、REV、GP120可以直接誘導(dǎo)細(xì)胞因子產(chǎn)生。此外，在HIV感染的長期控制中，又表現(xiàn)出要將TH1TH2細(xì)胞因子的表達(dá)水平調(diào)整到正常人的水平的現(xiàn)象。但是，假如病毒復(fù)制并沒被HAART控制，這種HIV和宿主免疫系統(tǒng)之間復(fù)雜的相互作用將導(dǎo)致嚴(yán)重的后果。有報導(dǎo)證實HIV1轉(zhuǎn)基因大鼠在淋巴結(jié)、脾臟、胸腺及外周血細(xì)胞中都表達(dá)HIV1病毒蛋白。但是，有關(guān)該大鼠中TH1TH2細(xì)胞因子的表達(dá)還沒有人研究。已經(jīng)觀察到隨著年齡的增長，HIV1大鼠所表現(xiàn)出的AIDS相關(guān)的癥狀越明顯。目的深入研究HIV1轉(zhuǎn)基因大鼠血漿中TH1TH2細(xì)胞因子的表達(dá)水平，并與正常對照大鼠FISCHERF344比較；觀察這兩種大鼠血漿中的TH1TH2細(xì)胞因子的表達(dá)水平隨著年齡的變化而發(fā)生改變的規(guī)律。方法我們應(yīng)用MSD公司開發(fā)的大鼠細(xì)胞因子多重測定試劑盒來檢測23個月和1011個月HIV1轉(zhuǎn)基因大鼠及正常對照FISCHERF344大鼠的血漿中TH1TH2細(xì)胞因子（IL4，IL5，KCGRO，IFNΓ，TNFΑ，IL1Β，IL13的表達(dá)譜。結(jié)果KCGRO在23個月大的HIV1轉(zhuǎn)基因大鼠血漿中的表達(dá)水平明顯高于年齡相當(dāng)?shù)腇344大鼠，而對于1011個月HIV1轉(zhuǎn)基因大鼠其KCGRO的表達(dá)水平高于F344大鼠，但沒有顯著性差異。IFNΓ在1011個月HIV1轉(zhuǎn)基因大鼠血漿中的表達(dá)水平明顯低于F344大鼠。除了IFNΓ外大多數(shù)細(xì)胞因子在血漿中的表達(dá)呈現(xiàn)出年齡的相關(guān)性。結(jié)論結(jié)合本研究第一部分和第二部分的結(jié)果，我們認(rèn)為年齡因素和HIV1病毒蛋白的協(xié)同作用決定了1011個月HIV1轉(zhuǎn)基因大鼠血漿中的細(xì)胞因子的表達(dá)譜。因此，進(jìn)一步研究HIV1轉(zhuǎn)基因大鼠的與衰老有關(guān)的細(xì)胞及分子機理、HIV1病毒蛋白相關(guān)的炎癥、以及兩者的相互作用將有助于我們建立提高年老的HIV感染者健康質(zhì)量的策略。

簡介：點擊查看更多慢性阻塞性肺疾病急性加重期對認(rèn)知功能的影響.pdf精彩內(nèi)容。

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簡介：目的構(gòu)建攜帶入HIL24△103基因的重組腺病毒載體，并檢測其對A549細(xì)胞生長及凋亡的影響，為進(jìn)一步研究白介素24細(xì)胞內(nèi)信號通路奠定了基礎(chǔ)。方法本課題采用PCR技術(shù)以重組質(zhì)粒PGEXIL24為模板擴增人白介素24N端104206位氨基酸殘基編碼序列，PCR產(chǎn)物連入PMD18T載體，藍(lán)白斑初步篩選，挑取白色菌落，經(jīng)KPNⅠ和XHOⅠ雙酶切及測序鑒定正確后酶切并膠回收目的片段，亞克隆至穿梭載體PADTRACKCMV中。鑒定正確的穿梭載體經(jīng)PMEⅠ酶切后與腺病毒骨架載體PADEASY1共轉(zhuǎn)化BJ5183菌挑取陽性克隆經(jīng)PACⅠ酶切鑒定正確。腺病毒載體經(jīng)PACⅠ酶切后脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染HEK293細(xì)胞包裝并大量擴增ADHIL24△103腺病毒，重組病毒感染A549細(xì)胞，MTT觀察細(xì)胞活力，HOECHST33258染色及流式細(xì)胞術(shù)檢測凋亡。WESTERNBLOTTING檢測PKR、EIF2Α蛋白表達(dá)及活化。結(jié)果通過PCR獲得目的基因HIL24△103，2％瓊脂糖凝膠電泳顯示目的片段大小約312BP。目的基因克隆入PMD18T載體后，挑取陽性克隆經(jīng)雙酶切，PCR可見目的條帶，測序正確。目的基因亞克隆至PADTRACKCMV后雙酶切及PCR鑒定正確。同源重組后腺病毒載體經(jīng)PACⅠ酶切得到一條23KB左右的大片段和一條約45KB的特征性小片段，表明重組腺病毒質(zhì)粒構(gòu)建成功。線性化的重組病毒質(zhì)粒轉(zhuǎn)染293細(xì)胞3D后熒光顯微鏡下可見大量細(xì)胞有EGFP表達(dá)，細(xì)胞出現(xiàn)病變效應(yīng)，細(xì)胞核大，黏附力降低。取病毒上清作PCR鑒定可見HIL24△103目的條帶。WESTERNBLOTTING可檢測到15KD處有一蛋白條帶，為HIL24△103蛋白，表明重組腺病毒包裝成功。TCID法測病毒滴度為21010PFUML。HIL24△103重組腺病毒感染A549細(xì)胞后MTT檢測細(xì)胞活力隨病毒量增加而顯著降低，相對細(xì)胞活力在10PFUML時為095，25PFUML時為071，50PFUML時為047，100PFUML時為020。HOECHST33258染色顯示HIL24△103重組腺病毒感染的A549細(xì)胞核深染、固縮、碎裂，出現(xiàn)典型的凋亡小體。流式細(xì)胞儀檢測結(jié)果顯示HIL24△103重組腺病毒處理組凋亡率為2242±069，相比空病毒處理（125±053）組和PBS對照（103±037）組有明顯統(tǒng)計學(xué)差異。WESTERNBLOTTING檢測到HIL24△103重組腺病毒處理組PKR和EIF2Α蛋白表達(dá)增加，并檢測到磷酸化的PKR和EIF2Α蛋白，說明兩者被HIL24△103激活。結(jié)論本實驗成功構(gòu)建攜帶增強型綠色熒光蛋白的人HIL24△103重組腺病毒，病毒滴度高。HIL24△103通過激活PKR和EIF2Α抑制A549細(xì)胞增殖，促進(jìn)凋亡。

簡介：研究背景塵肺至今仍是世界上最重要的職業(yè)衛(wèi)生問題之一，目前尚無有效可行的治療方法。西方發(fā)達(dá)國家中塵肺病患病率穩(wěn)高不下。在我國，粉塵接觸人員較多，塵肺病發(fā)生情況比較嚴(yán)重，且目前我國塵肺病在每年新發(fā)病例占各類職業(yè)病總病例數(shù)的70％左右，而安徽作為石英砂工廠比較集中的省份之一，塵肺病現(xiàn)狀也不容樂觀，據(jù)統(tǒng)計截止2007年底，安徽省累計發(fā)生塵肺病17282例，其中2007年發(fā)461例，死亡17例。接觸職業(yè)病危害因素的群體中農(nóng)民占很大的比例，近年來農(nóng)民工職業(yè)健康問題正逐漸成為學(xué)術(shù)界乃至全社會關(guān)注的熱點。安徽省無為小煤窯塵肺病事件、河南張海超開胸驗肺事件、云南水富怪病事件、深圳塵肺門事件等事件均從一定角度反映出農(nóng)民工所面臨的職業(yè)衛(wèi)生問題。眾所周知，農(nóng)民工的職業(yè)性塵肺問題涉及醫(yī)學(xué)和社會科學(xué)的方方面面，農(nóng)民工的職業(yè)性塵肺患病情況與人群的社會心理、行為密不可分。在疾病產(chǎn)生和發(fā)展過程中，社會、經(jīng)濟、文化因素起著極為重要的作用。因此，農(nóng)民工的職業(yè)性塵肺防治不僅需要有正確的理論指導(dǎo)，更需要有正確的策略和方法措施。這就特別需要將醫(yī)學(xué)和多種其他學(xué)科有機的結(jié)合在一起。綜合評價法被廣泛應(yīng)用于疾病防治效果評價、生存質(zhì)量評價、衛(wèi)生服務(wù)水平評價等醫(yī)學(xué)相關(guān)領(lǐng)域，該方法不僅具有重大的實用價值而且具有廣泛的應(yīng)用前景。本課題嘗試采用綜合評價的方法分析某地區(qū)從砂作業(yè)人員的健康狀況，從而為塵肺病防治及干預(yù)等方面提供一定依據(jù)。研究目的了解石英砂企業(yè)職工健康狀況及職業(yè)衛(wèi)生認(rèn)知現(xiàn)狀，并以綜合評價的方式分析從砂作業(yè)工人健康狀況，提出措施改善石英砂企業(yè)職工的生存質(zhì)量，為今后開展相關(guān)研究提供一定基礎(chǔ)資料，并為政府、企業(yè)等相關(guān)部門采取策略和措施，提高石英砂企業(yè)職工職業(yè)生存質(zhì)量提供科學(xué)依據(jù)。研究方法通過檢索CNKI、維普、萬方、PUBMED等相關(guān)數(shù)據(jù)庫查閱國內(nèi)外文獻(xiàn)，咨詢相關(guān)專家獲取寶貴意見，并結(jié)合某縣特殊地理位置、歷史背景、工業(yè)發(fā)展體系、農(nóng)民工流動等社會學(xué)情況，選取某縣從事石英砂加工生產(chǎn)企業(yè)職工及相關(guān)人員進(jìn)行調(diào)查。采用分層整群抽樣方法，隨機選取該地區(qū)石英砂企業(yè)職工參與相關(guān)調(diào)查。1選擇出某縣4個鄉(xiāng)鎮(zhèn)的190名石英砂企業(yè)職工為接觸組調(diào)查對象，其中包括140名本地工人和50名外地工人同時采用按個體1∶12匹配的方法共選取同工作環(huán)境，非接觸石英砂人員200名作為對照組，采用問卷進(jìn)行調(diào)查。采用綜合評價法對接砂作業(yè)人員健康狀況進(jìn)行評價對接觸組人員職業(yè)衛(wèi)生認(rèn)知狀況進(jìn)行分析、評價。2采用整群抽樣方法，隨機選取企業(yè)車間，對農(nóng)民工進(jìn)行深入訪談，并結(jié)合觀察法，深入到研究對象的工作場所收集其家庭情況、社會地位、社會交往、人際關(guān)系等資料，調(diào)查并了解調(diào)查對象的主觀認(rèn)知、態(tài)度等情況對于訪談中的塵肺病患者、鐵路退伍老兵進(jìn)行案例調(diào)查，全面了解其機體健康狀況及其他職業(yè)相關(guān)方面問題。主要結(jié)果1接觸組綜合評分指數(shù)GI大于對照組接觸組GI333898，對照組GI256029，綜合評價各項指標(biāo)的選擇均比較合理均有CI＜010，各層子目標(biāo)權(quán)重系數(shù)均是合乎邏輯的CRCIRI，均小于010。2兩組間比較視力下降、頭痛、記憶力減退、易激動、咳嗽、咳痰、關(guān)節(jié)痛、胸痛、胸悶、心前區(qū)不適項目上的差異具有統(tǒng)計學(xué)意義P＜005，且隨著專業(yè)工齡增加接觸組癥狀的發(fā)生率總體呈上升趨勢。3石英砂職工職業(yè)衛(wèi)生相關(guān)知識認(rèn)知率較低。結(jié)論與建議石英砂粉塵對接塵作業(yè)人員健康狀況有一定影響石英砂企業(yè)職工職業(yè)衛(wèi)生認(rèn)知率較低，存在一定問題。由于矽肺對機體的危害嚴(yán)重，政府及各級相關(guān)部門均要給予其總夠重視，故結(jié)合本課題結(jié)果給出以下建議1政府應(yīng)該進(jìn)一步健全法律法規(guī)，健全監(jiān)督監(jiān)管機構(gòu)機制。限定粉塵最高容許濃度2企業(yè)應(yīng)該重視塵肺病的防治工作，制定本地區(qū)和部門塵肺病防治規(guī)劃和制度，專人負(fù)責(zé)實施，加強宣傳教育，設(shè)立防塵設(shè)施維護(hù)制度，獎懲結(jié)合。3各級衛(wèi)生監(jiān)督機構(gòu)和相關(guān)部門定期對企業(yè)粉塵濃度、塵肺發(fā)病情況依法監(jiān)督和監(jiān)測。4社會應(yīng)該構(gòu)建公眾監(jiān)督環(huán)境，維護(hù)社會健康。5工人應(yīng)該加強個人防護(hù)和注意個人衛(wèi)生?？傊瀼貙嵤┓缐m降塵的八字方針即“革、水、密、風(fēng)、護(hù)、管、教、查”，全力維護(hù)企業(yè)職工的身體健康，營造和諧社會。